Nucleic acid ti pin si deoxyribonucleic acid (DNA) ati ribonucleic acid (RNA), laarin eyiti RNA le pin si ribosomal RNA (rRNA), ojiṣẹ RNA (mRNA) ati gbigbe RNA (tRNA) ni ibamu si awọn iṣẹ oriṣiriṣi.

DNA wa ni ogidi ni arin, mitochondria ati chloroplasts, nigba ti RNA wa ni o kun pin ninu awọn cytoplasm.

Nitoripe awọn ipilẹ purine ati awọn ipilẹ pyrimidine ni awọn ifunmọ ilọpo meji ni awọn acids nucleic, awọn acids nucleic ni awọn abuda ti gbigba ultraviolet. Gbigba ultraviolet ti awọn iyọ sodium sodium DNA wa ni ayika 260nm, ati gbigba rẹ jẹ afihan bi A260, ati pe o wa ni ibi ifunmọ ni 230nm, nitorinaa ultraviolet spectroscopy le ṣee lo. Awọn acids Nucleic jẹ ipinnu ni iwọn ati ni agbara nipasẹ luminometer kan.

Awọn acids Nucleic jẹ ampholytes, eyiti o jẹ deede si awọn polyacids. Awọn acids Nucleic le ti pin si awọn anions nipa lilo didoju tabi awọn buffers ipilẹ, ati gbe sinu aaye ina lati gbe si anode. Eyi ni ilana ti electrophoresis.

Iyọkuro acid Nucleic ati awọn ipilẹ mimọ ati awọn ibeere

1. Rii daju awọn iyege ti nucleic acid ipilẹ akọkọ

2. Imukuro idoti ti awọn ohun elo miiran (gẹgẹbi laisi kikọlu RNA nigba yiyọ DNA jade)

3. Ko yẹ ki o jẹ awọn nkan ti o nfo Organic ati awọn ifọkansi giga ti awọn ions irin ti o dẹkun awọn enzymu ninu awọn ayẹwo acid nucleic.

4. Dinku awọn nkan macromolecular gẹgẹbi awọn ọlọjẹ, polysaccharides ati lipids bi o ti ṣee ṣe.

Nucleic acid isediwon ati ọna ìwẹnumọ

1. Phenol / chloroform isediwon ọna

O ti a se ni 1956. Lẹhin ti atọju awọn sẹẹli bajẹ omi tabi tissu homogenate pẹlu phenol/chloroform, awọn nucleic acid irinše, o kun DNA, ti wa ni tituka ni olomi alakoso, lipids wa ni o kun ninu awọn Organic alakoso, ati awọn ọlọjẹ ti wa ni be laarin awọn meji. awọn ipele.

2. Oti ojoriro

Ethanol le ṣe imukuro Layer hydration ti nucleic acid ati ṣafihan ẹgbẹ fosifeti ti o gba agbara ni odi, ati awọn ions ti o gba agbara daadaa bii NA﹢ le darapọ pẹlu ẹgbẹ fosifeti lati ṣe itusilẹ.

3. Chromatographic iwe ọna

Nipasẹ ohun elo adsorption ti o da lori silica pataki, DNA le jẹ ipolowo pataki, lakoko ti RNA ati amuaradagba le kọja laisiyonu, ati lẹhinna lo iyo giga ati pH kekere lati di acid nucleic, ati elute pẹlu iyọ kekere ati pH giga lati yapa ati sọ di mimọ nucleic. acid.

4. Gbona wo inu alkali ọna

Iyọkuro alkali ni pataki nlo awọn iyatọ topological laarin awọn plasmids iyika ti o ni pipade ati chromatin laini lati ya wọn sọtọ. Labẹ awọn ipo ipilẹ, awọn ọlọjẹ denatured jẹ tiotuka.

5. ọna pyrolysis farabale

Ojutu DNA jẹ itọju ooru lati lo anfani awọn ohun-ini ti awọn ohun alumọni DNA laini lati ya awọn ajẹkù DNA kuro ninu isunmọ ti o ṣẹda nipasẹ awọn ọlọjẹ denatured ati idoti cellular nipasẹ centrifugation.

6. Nanomagnetic awọn ilẹkẹ ọna

Lilo nanotechnology lati ni ilọsiwaju ati yipada dada ti awọn ẹwẹ titobi superparamagnetic, superparamagnetic silikoni oxide nano-magnetic beads ti pese sile. Awọn ilẹkẹ oofa naa le ṣe idanimọ ni pataki ati daradara sopọ mọ awọn ohun elo acid nucleic lori wiwo airi kan. Lilo awọn ohun-ini superparamagnetic ti silica nanospheres, labẹ iṣe ti awọn iyọ Chaotropic (guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate, bbl) ati aaye oofa ita, DNA ati RNA ti ya sọtọ lati ẹjẹ, ẹran ara ẹranko, ounjẹ, awọn microorganisms pathogenic ati awọn apẹẹrẹ miiran.