Awọn ọna tiamuaradagba ìwẹnumọ:

Ọna ti isọdọmọ amuaradagba, iyapa ati isọdi ti amuaradagba, amuaradagba ti tu silẹ lati awọn sẹẹli atilẹba tabi awọn tissu ni ipo tituka ati pe o wa ni ipo adayeba atilẹba laisi pipadanu iṣẹ ṣiṣe ti ibi. Fun idi eyi, ohun elo yẹ ki o yọ ẹran ati adipose adipose, ohun elo irugbin yẹ ki o paapaa yọ kuro ni idoti ti ẹwu irugbin lati awọn nkan bii tannins, ati pe irugbin epo yẹ ki o lo epo-ara-kekere ti o ni epo-ara.

1. Awọn ọna ti amuaradagba ìwẹnumọ, iwọn ati ki o yatọ Iyapa onínọmbà awọn ọna: dialysis ati ultrafiltration lo awọn wọnyi awọn ọlọjẹ lati ṣe nipasẹ awọn iseda ti awọn ohun elo ti ko le ṣe nipasẹ awọn ologbele-permeable awo; density gradient centrifugation Didara ati iwuwo ti amuaradagba ni alabọde yoo ni ipa nla lori awọn patikulu. Iyara iyara jẹ yiyara; filtration jeli jẹ iru kiromatogirafi ọwọn.

2. Iyapa ti iyatọ solubility ni lilo: elekitiro-ojoriro nitori idiyele apapọ ti awọn ohun elo amuaradagba wa ni aaye isoelectric odo, idinku iyọkuro elekitirosi laarin awọn ohun elo, rọrun lati ṣajọpọ, ati solubility to kere julọ; iyọ iyọ ti a lo pẹlu ojutu iyọ Ifọkansi pọ si tabi dinku solubility ti amuaradagba.

3. Awọn idiyele ti yapa ati itupalẹ nipasẹ awọn ọna oriṣiriṣi, awọn akoonu akọkọ pẹlu electrophoresis ati chromatography paṣipaarọ ion.

4. Awọn ọna tiamuaradagba ìwẹnumọYiyan adsorption ati iyapa ti awọn ọlọjẹ lo agbara adsorption patiku.

5. Affinity chromatography da lori iyapa ti awọn ligands. Iwa abuda ti ibi yii ngbanilaaye awọn ohun elo amuaradagba lati so pọ ni pataki dipo kikojọpọ si molikula miiran ti a pe ni ligand.

6. Ọna ti iwẹnumọ amuaradagba: Ọna jijoro olomi-otutu-kekere: Lo awọn nkan ti o ni nkan ti o ni nkan ṣe pẹlu omi, gẹgẹbi kẹmika, ethanol, lati dinku solubility ati ojoriro ti ọpọlọpọ awọn ọlọjẹ. Ọna yii ga ju iyọkuro ipinnu lọ, ṣugbọn amuaradagba denatures diẹ sii Nigbati o rọrun, o yẹ ki o ṣee ṣe ni iwọn otutu kekere.

Bawo ni lati sọ di mimọamuaradagba ìwẹnumọ:

Bii o ṣe le sọ amuaradagba di mimọ, amuaradagba jẹ moleku nla kan, ati ọpọlọpọ awọn iwọn molikula ti albumin, awọn ọna ti o rọrun diẹ wa lati ya awọn amuaradagba ati awọn ohun elo moleku kekere, ati tun pin idapọ amuaradagba. Awọn ọna akọkọ fun ipinya awọn ọlọjẹ ti awọn iwọn molikula oriṣiriṣi jẹ dialysis, ultrafiltration, filtration gel, ati ipinya centrifugal. Dialysis ati ultrafiltration jẹ lilo nigbagbogbo ni awọn ọna iyapa amuaradagba. Adalu dialysis lati yapa ni a gbe sinu apo itọ-ọgbẹ ti a ṣe ti awo awọ ara semipermeable, ati lẹhinna immersed ninu ojutu itọsẹ fun iyapa. Ultrafiltration jẹ ilana ti gbigbe omi kọja ati awọn ohun elo kekere miiran nipa lilo agbara centrifugal tabi titẹ ni awo awọ ologbele-permeable ati awọn ọlọjẹ idẹkùn ninu awo awọ ologbele-permeable. Awọn ọna meji wọnyi ni a le yapa lati awọn macromolecules ti o da lori amuaradagba ati awọn ohun elo kekere ti o da lori iyọ ti ara eegun. Wọn ti wa ni iyọ nigbagbogbo, ti a lo ni apapo pẹlu ọna itujade iyọ, tabi o le ṣe afihan lati mu awọn ọna meji wọnyi jade lẹhin ti iyọ jade ni lilo awọn ojutu iyọ ti ko ni nkan.

1. Bii o ṣe le sọ amuaradagba di mimọ nipasẹ ọna iyọ-jade: Ipilẹ ti ọna iyọ-jade ni pe solubility ti amuaradagba ni ojutu iyọ dilute yoo pọ si pẹlu alekun ifọkansi iyọ, ṣugbọn nigbati ifọkansi iyọ ba pọ si iye kan, iṣẹ ṣiṣe omi yoo pọ si. Idinku, eyiti o le fa diẹ ninu awọn ọlọjẹ lati ṣe ina awọn idiyele nipasẹ dada igbekalẹ molikula lati jẹ didoju diẹdiẹ, ati pe awọ ara hydration ti wa ni iparun diẹdiẹ, eyiti o le fa awọn ọlọjẹ ati awọn ohun elo ti o ni ibatan lati dagbasoke agglomeration ati ṣaju lati awọn solusan oriṣiriṣi.

2. Awọn ọna ojoriro olomi-ara: Awọn idi meji lo wa lati dinku solubility ti amuaradagba ninu awọn ohun elo Organic: bawo ni a ṣe le sọ di mimọ bi ojutu iyọ pẹlu gbigbẹ; keji, awọn dielectric ibakan ti Organic epo ju omi le ti wa ni dinku Ni pola epo.

3. Protein precipitating agent: amuaradagba bi aṣoju ti n ṣafẹri nikan n ṣiṣẹ lori iru kan tabi ọkan ti ojoriro amuaradagba, awọn ti o wọpọ jẹ ipilẹ, amuaradagba, lectin, ati awọn irin eru.

4. Polyethylene glycol ojoriro: Bii o ṣe le sọ di mimọ awọn polima ti kii-ionic ti omi-tiotuka funamuaradagba ìwẹnumọ, gẹgẹbi polyethylene glycol ati sodium dextran sulfate lati ṣaju awọn ọlọjẹ.