פּראָטעין רייניקונג פון צעשיידונג מעטהאָדס

די צעשיידונג און רייניקונג פון פּראָטעינס איז וויידלי געניצט אין בייאָוקעמאַסטרי פאָרשונג און אַפּלאַקיישאַן און איז אַ וויכטיק אַפּעריישאַנאַל בקיעס. א טיפּיש עוקאַריאָטיק צעל קענען אַנטהאַלטן טויזנטער פון פאַרשידענע פּראָטעינס, עטלעכע זענען זייער רייַך און עטלעכע אַנטהאַלטן בלויז אַ ביסל עקזעמפלארן. אין סדר צו לערנען אַ זיכערפּראָטעין, עס איז נייטיק צו ערשטער רייניקן דעם פּראָטעין פון אנדערע פּראָטעינס און ניט-פּראָטעין מאַלאַקיולז.

6ca4b93f5

1. סאָלטינג-אויס אופֿן פוןפּראָטעין:

נייטראַל זאַלץ האט אַ באַטייטיק ווירקונג אויף די סאָלוביליטי פון פּראָטעין. אין אַלגעמיין, מיט די פאַרגרעסערן פון זאַלץ קאַנסאַנטריישאַן אונטער נידעריק זאַלץ קאַנסאַנטריישאַן, די סאָלוביליטי פון פּראָטעין ינקריסיז. דאס הייסט זאלצן; ווען די זאַלץ קאַנסאַנטריישאַן האלט צו פאַרגרעסערן, די סאָלוביליטי פון פּראָטעין דיקריסאַז צו וועריינג דיגריז און סעפּערייץ איינער נאָך דעם אנדערן. די דערשיינונג ווערט גערופן אויסזאַלצן.

2. יסאָעלעקטריק פונט סטאַקינג אופֿן:

די ילעקטראָוסטאַטיק אָפּשטויסן צווישן פּאַרטיקאַלז איז דער קלענסטער ווען דער פּראָטעין איז סטאַטיק, אַזוי די סאָלוביליטי איז אויך דער קלענסטער. די יסאָעלעקטריק פונקטן פון פאַרשידן פּראָטעינס זענען אַנדערש. די ף פון די קאַנדישאַנינג לייזונג קענען זיין געוויינט צו דערגרייכן די יסאָעלעקטריק פונט פון אַ פּראָטעין מאַכן עס אַקיומיאַלייט, אָבער דעם אופֿן איז ראַרעלי געניצט אַליין און קענען זיין קאַמביינד מיט די סאָלטינג-אויס אופֿן.

3.דיאַליסיס און אַלטראַפילטריישאַן:

דיאַליסיס ניצט אַ האַלב-פּערמיאַבאַל מעמבראַנע צו באַזונדער פּראָטעינס פון פאַרשידענע מאָלעקולאַר סיזעס. די אַלטראַפילטריישאַן אופֿן ניצט הויך דרוק אָדער סענטריפוגאַל קראַפט צו מאַכן וואַסער און אנדערע קליין סאָלוט מאַלאַקיולז פאָרן דורך אַ האַלב-פּערמיאַבאַל מעמבראַנע,פּראָטעיןבלייבט אויף די מעמבראַנע. איר קענען קלייַבן פאַרשידענע פּאָרע סיזעס צו ינטערסעפּט פּראָטעינס פון פאַרשידענע מאָלעקולאַר ווייץ.

4.געל פילטריישאַן אופֿן:

אויך גערופן גרייס יקסקלוזשאַן קראָומאַטאַגראַפי אָדער מאָלעקולאַר זיפּ קראָומאַטאַגראַפי, דאָס איז איינער פון די מערסט נוציק מעטהאָדס פֿאַר סעפּערייטינג פּראָטעין מיקסטשערז לויט די מאָלעקולאַר גרייס. די מער קאַמאַנלי געניצט פּאַקינג מאַטעריאַלס אין די זייַל זענען גלוקאָוס געל (Sephadex ged) און אַגאַראָסע געל (אַגאַראָסע געל).

5. עלעקטראָפאָרעסיס:

אונטער די זעלבע ף צושטאַנד, פאַרשידן פּראָטעינס קענען זיין אפגעשיידט רעכט צו זייער פאַרשידענע מאָלעקולאַר ווייץ און פאַרשידענע טשאַרדזשיז אין די עלעקטריק פעלד. עס איז ווערט צו באַצאָלן ופמערקזאַמקייט צו יסאָעלעקטריק שטעלן עלעקטראָפאָרעסיס, וואָס ניצט אַן אַמפאָליט ווי אַ טרעגער. בעשאַס עלעקטראָפאָרעסיס, די אַמפּאָליטע פארמען אַ ף גראַדיענט ביסלעכווייַז צוגעגעבן פון די positive ילעקטראָוד צו די נעגאַטיוו ילעקטראָוד. ווען דער פּראָטעין מיט אַ זיכער אָפּצאָל שווימען אין עס, עס וועט דערגרייכן יעדער אנדערער. די ף שטעלע פון ​​די עלעקטריקאַל פונט איז דיסקאַנטיניואַס, און דעם אופֿן קענען זיין געוויינט צו פונאַנדערקלייַבן און צוגרייטן פאַרשידן פּראָטעינס.

6.יאָן קאָמוניקאַציע קראָומאַטאַגראַפי:

יאָן קאָמוניקאַציע אגענטן אַרייַננעמען קאַטיאָניק קאָמוניקאַציע אגענטן (אַזאַ ווי קאַרבאָקסימעטהיל סעליאַלאָוס; CM-cellolose) און אַניאָניק קאָמוניקאַציע אגענטן (דיעטהילאַמינאָעטהיל סעליאַלאָוס). ווען גייט פארביי דורך די יאָן קאָמוניקאַציע קראָומאַטאַגראַפי זייַל, דער פּראָטעין מיט די פאַרקערט אָפּצאָל צו די יאָן קאָמוניקאַציע אַגענט איז אַדסאָרבעד אויף די יאָן קאָמוניקאַציע אַגענט, און דערנאָך די אַדסאָרבעד.פּראָטעיןאיז ילוייטיד דורך טשאַנגינג די ף אָדער ייאַניק שטאַרקייַט.

7. אַפיניטי קראָומאַטאַגראַפי:

אַפיניטי קראָומאַטאַגראַפי איז אַ גאָר נוציק אופֿן פֿאַר סעפּערייטינג פּראָטעינס. עס אָפט ריקווייערז בלויז איין שריט צו באַזונדער אַ זיכער פּראָטעין צו זיין פּיוראַפייד פון אַ מעסי פּראָטעין געמיש מיט הויך ריינקייַט.

דער אופֿן איז באזירט אויף די ספּעציפיש אלא ווי קאָוואַלענט ביינדינג פון זיכער פּראָטעינס צו אן אנדער מאַלאַקיול גערופן אַ ליגאַנד (ליגאַנד).

דער גרונט פּרינציפּ:

פּראָטעינס עקסיסטירן אין אַ מעסי געמיש אין געוועבן אָדער סעלז, און יעדער טיפּ פון צעל כּולל טויזנטער פון פאַרשידענע פּראָטעינס. דעריבער, די דיסטינגקשאַן צווישן פּראָטעינס איז אַ וויכטיק טייל פון בייאָוקעמאַסטרי, און עס איז נישט אַליין. אָדער אַ סכום פון פאַרטיק מעטהאָדס קענען באַזייַטיקן קיין סאָרט פון פּראָטעין פון אַ מעסי געמישט פּראָטעין, אַזוי עטלעכע מעטהאָדס זענען אָפט געניצט אין קאָמבינאַציע.


פּאָסטן צייט: נאוועמבער 05-2020