Proteinlarni ajratish va tozalash biokimyoviy tadqiqotlar va qo'llashda keng qo'llaniladi va muhim operatsion mahoratdir. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument xom ashyoni ajratish va nozik ajratish tarkibini tuzdi.oqsilhamma uchun tozalash. Oddiy eukaryotik hujayra minglab turli xil oqsillarni o'z ichiga olishi mumkin, ba'zilari juda boy, ba'zilari esa faqat bir nechta nusxalarni o'z ichiga oladi. Muayyan oqsilni o'rganish uchun avvalo oqsilni boshqa oqsillardan va oqsil bo'lmagan molekulalardan tozalash kerak.

Qattiq ajralish

Protein ekstrakti (ba'zan nuklein kislotalar, polisakkaridlar va boshqalar bilan aralashtiriladi) olinganda, kerakli ajratish uchun tegishli usullar to'plami tanlanadi.oqsilboshqa aralashmalardan. Umuman olganda, ajratishning bu bosqichi tuzlash, izoelektrik nuqta to'plash va organik erituvchini fraktsiyalash kabi usullardan foydalanadi. Ushbu usullar soddaligi va katta ishlov berish qobiliyati bilan ajralib turadi, ular ko'plab aralashmalarni olib tashlashi va oqsil eritmasini konsentratsiyalashi mumkin. Ba'zi protein ekstraktlari katta hajmga ega va ularni to'plash yoki tuzlash orqali konsentratsiyaga mos kelmaydi. Konsentratsiya uchun ultrafiltratsiya, jel filtrlash, muzlatish vakuumli quritish yoki boshqa usullarni tanlashingiz mumkin.

Nozik ajratish

Namuna qo'pol fraksiyasidan so'ng, hajmi odatda kichik bo'ladi va aralashmalarning ko'p qismi olib tashlanadi. Keyinchalik tozalash uchun xromatografiya usullari odatda gel filtrlash, ion almashinish xromatografiyasi, adsorbsion xromatografiya va yaqinlik xromatografiyasini o'z ichiga oladi. Agar kerak bo'lsa, oxirgi tozalash jarayoni sifatida siz elektroforezni, jumladan, zona elektroforezini, izoelektrik nuqta to'plamini va boshqalarni tanlashingiz mumkin. Bo'linma darajasini ajratish uchun qo'llaniladigan usul rejalashtirishda odatda kichik, lekin yuqori aniqlikda.

Kristallanish oqsillarni ajratish va tozalashning yakuniy jarayonidir. Kristallanish jarayoni oqsilning bir xil bo'lishini ta'minlamasa-da, faqat ma'lum bir oqsil kristall hosil qilish uchun eritmada afzalliklarga ega bo'lsa. Kristallanish jarayonining o'zi ma'lum darajada tozalash bilan birga keladi va qayta kristallanish oz miqdorda soxtalashtirilgan oqsilni olib tashlashi mumkin. Denatüratsiya qilinganidan berioqsilkristallanish jarayonida hech qachon topilmagan, oqsil kristallanishi nafaqat tozalik belgisi, balki mahsulotning tabiiy holatida ekanligini aniqlash uchun kuchli ko'rsatma hamdir.