Розділення та очищення білків широко використовується в біохімічних дослідженнях і застосуванні та є важливою операційною навичкою. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument склала дані про вміст сирої та тонкої сепараціїбілокочищення для всіх. Типова еукаріотична клітина може містити тисячі різних білків, деякі з них дуже багаті, а деякі містять лише кілька копій. Щоб досліджувати певний білок, необхідно спочатку очистити білок від інших білків і небілкових молекул.

Груба сепарація

Після отримання білкового екстракту (іноді змішаного з нуклеїновими кислотами, полісахаридами тощо) вибирається набір відповідних методів для виділення бажаногобілоквід інших домішок. Зазвичай на цьому етапі розділення використовуються такі методи, як висолювання, накопичення ізоелектричної точки та фракціонування органічного розчинника. Ці методи характеризуються простотою і великою технологічною здатністю, яка дозволяє видалити багато домішок і сконцентрувати білковий розчин. Деякі білкові екстракти мають великий об'єм і непридатні для концентрування шляхом накопичення або висолювання. Ви можете вибрати ультрафільтрацію, гель-фільтрацію, заморожування, вакуумну сушку або інші методи концентрації.

Тонка сепарація

Після грубого фракціонування зразка об’єм, як правило, невеликий, і більшість домішок видалено. Для подальшого очищення методи хроматографії зазвичай включають гель-фільтрацію, іонообмінну хроматографію, адсорбційну хроматографію та афінну хроматографію. За необхідності ви також можете вибрати електрофорез, включаючи зональний електрофорез, встановлення ізоелектричної точки тощо як остаточний процес очищення. Метод, який використовується для поділу на рівні підрозділів, як правило, невеликий у плануванні, але з високою роздільною здатністю.

Кристалізація є завершальним процесом розділення та очищення білка. Хоча процес кристалізації не гарантує, що білок повинен бути однорідним, лише тоді, коли певний білок має перевагу в розчині, утворюється кристал. Сам процес кристалізації супроводжується певним ступенем очищення, а перекристалізація може видалити невелику кількість фальсифікованого білка. Оскільки денатуратбілокніколи не було виявлено під час процесу кристалізації, кристалізація білка є не тільки ознакою чистоти, але й потужним орієнтиром для визначення того, що продукт знаходиться в його природному стані.