Методиочищення білка:

Спосіб очищення білка, розділення та очищення білка, білок вивільняється з вихідних клітин або тканин у розчиненому стані і залишається у вихідному природному стані без втрати біологічної активності. З цієї причини матеріал повинен видаляти тваринну та жирову тканину, насіннєвий матеріал повинен навіть злущувати забруднення насіннєвої оболонки такими речовинами, як таніни, а олійне насіння має переважно використовувати органічний розчинник з низькою температурою кипіння.

1. Метод очищення білків, розмір і різні методи аналізу поділу: діаліз і ультрафільтрація використовують ці білки для проходження через природу молекул, які не можуть пройти через напівпроникну мембрану; центрифугування в градієнті щільності Якість і щільність білка в середовищі матимуть більший вплив на частинки. Швидкість осідання швидше; Гель-фільтрація є різновидом колонкової хроматографії.

2. Розділення різниці в розчинності у використанні: електроосадження, оскільки сумарний заряд білкових молекул знаходиться в нульовій ізоелектричній точці, зменшуючи електростатичне відштовхування між молекулами, легко агрегуючи, і мінімальна розчинність; сольовий розчин, що використовується з сольовим розчином Концентрація збільшує або зменшує розчинність білка.

3. Заряд розділяється та аналізується різними методами, основний вміст включає електрофорез та іонообмінну хроматографію.

4. Методиочищення білкаСелективна адсорбція та розділення білків використовують силу адсорбції частинок.

5. Афінна хроматографія заснована на розділенні лігандів. Ця біологічна характеристика дозволяє білковим молекулам зв’язуватися специфічно, а не ковалентно, з іншою молекулою, яка називається лігандом.

6. Метод очищення білка: метод осадження за допомогою низькотемпературного органічного розчинника: використовуйте органічні розчинники, які змішуються з водою, такі як метанол, етанол, щоб зменшити розчинність і осадження більшості білків. Цей метод є вищим, ніж роздільна здатність висолювання, але протеїн сильніше денатурує. Коли легко, це слід робити за низької температури.

Як очиститиочищення білка:

Як очистити білок, протеїн — це велика молекула альбуміну з різними розмірами молекул. Існує кілька простіших методів розділення білка та малих молекул, а також розділеної білкової суміші. Основними методами поділу білків різного молекулярного розміру є діаліз, ультрафільтрація, гель-фільтрація та відцентрове поділ. Діаліз і ультрафільтрація зазвичай використовуються в методах розділення білків. Діалізну суміш, яку необхідно розділити, поміщають у діалізний мішок, виготовлений із напівпроникної мембрани, а потім занурюють у діалізний розчин для розділення. Ультрафільтрація — це процес пропускання води та інших малих молекул за допомогою відцентрової сили або тиску через напівпроникну мембрану та захоплення білків у напівпроникній мембрані. Ці два методи можна відокремити від макромолекул на основі білка та малих молекул на основі неорганічної солі. Вони часто висолюються, використовуються в поєднанні з методом розчинення солі або можуть бути введені для вилучення цих двох методів після висолювання за допомогою розчинів неорганічної солі.

1. Як очистити білок методом висолювання: Основою методу висолювання є те, що розчинність білка в розбавленому розчині солі зростатиме зі збільшенням концентрації солі, але коли концентрація солі зростає до певного значення, активність води підвищиться. Зменшення, яке, у свою чергу, може призвести до того, що деякі білки генерують заряди через поверхню молекулярної структури, поступово нейтралізуються, а гідратаційна мембрана поступово руйнується, що в кінцевому підсумку може призвести до агломерації споріднених білків і молекул і випадання осаду з різних розчинів.

2. Метод осадження органічним розчинником: існує дві причини для зменшення розчинності білка в органічних розчинниках: як очистити білок як розчин солі з дегідратацією; по-друге, діелектрична проникність органічних розчинників, ніж вода, може бути знижена в полярних розчинниках.

3. Осаджувач білка: білок як осаджувач діє лише на один або один тип осадження білка, поширеними є лужні, білкові, лектинові та важкі метали.

4. Осадження поліетиленгліколю: як очистити водорозчинні неіонні полімери дляочищення білка, такі як поліетиленгліколь і декстрансульфат натрію для осадження білків.