ئاقسىلنى ئايرىش ۋە ساپلاشتۇرۇش بىئو-خىمىيىلىك تەتقىقات ۋە قوللىنىشتا كەڭ قوللىنىلىدۇ ۋە مۇھىم مەشغۇلات ماھارىتى. تىپىك بولغان ئېۋكارىئوتىك ھۈجەيرىسىدە مىڭلىغان ئوخشىمىغان ئاقسىل بار ، بەزىلىرى ئىنتايىن مول ، بەزىلىرىدە پەقەت بىر نەچچە نۇسخا بار. مەلۇمنى ئۆگىنىش ئۈچۈنئاقسىل، ئالدى بىلەن ئاقسىلنى باشقا ئاقسىل ۋە ئاقسىل بولمىغان مولېكۇلادىن تازىلاش كېرەك.
1. تۇز چىقىرىش ئۇسۇلىئاقسىل:
نېيترال تۇز ئاقسىلنىڭ ئېرىشچانلىقىغا كۆرۈنەرلىك تەسىر كۆرسىتىدۇ. ئادەتتە ، تۇزنىڭ قويۇقلۇقى تۆۋەن تۇز قويۇقلۇقىنىڭ ئېشىشىغا ئەگىشىپ ، ئاقسىلنىڭ ئېرىشچانلىقى ئاشىدۇ. بۇ تۇز دەپ ئاتىلىدۇ. تۇزنىڭ قويۇقلۇقى داۋاملىق ئېشىپ كەتسە ، ئاقسىلنىڭ ئېرىشچانلىقى ئوخشىمىغان دەرىجىدە تۆۋەنلەيدۇ ۋە كەينى-كەينىدىن ئايرىلىدۇ. بۇ ھادىسە تۇز سېلىش دەپ ئاتىلىدۇ.
2. ئىزوئېلېكتىرلىق نۇقتىلارنى تىزىش ئۇسۇلى:
زەررىچىلەر ئارىسىدىكى ئېلېكتروستاتتىك ئىتتىرىش ئاقسىل تۇراقلىق بولغاندا ئەڭ كىچىك بولىدۇ ، شۇڭا ئېرىشچانلىقىمۇ ئەڭ كىچىك بولىدۇ. ھەر خىل ئاقسىللارنىڭ ئايرىلىش نۇقتىلىرى ئوخشىمايدۇ. تەڭشىگۈچ ئېرىتمىسىنىڭ pH نى ئاقسىلنىڭ ئىزوئېلېكترىك نۇقتىسىغا يەتكىلى بولىدۇ ، ئۇنى توپلاڭ ، ئەمما بۇ ئۇسۇل يالغۇز ئىشلىتىلمەيدۇ ، تۇز چىقىرىش ئۇسۇلى بىلەن بىرلەشتۈرگىلى بولىدۇ.
3. دىئالىز ۋە ئۇلترا بىنەپشە نۇر:
دىئالىز يېرىم ئۆتكۈزگۈچ پەردىدىن پايدىلىنىپ ئوخشىمىغان مولېكۇلا چوڭلۇقتىكى ئاقسىلنى ئايرىيدۇ. ئۇلترا بىنەپشە نۇر يۇقىرى بېسىم ياكى مەركەزدىن قاچۇرۇش كۈچى ئىشلىتىپ سۇ ۋە باشقا كىچىك ئېرىتكۈچى مولېكۇلالارنى يېرىم ئۆتكۈزگۈچ پەردىدىن ئۆتكۈزىدۇ ،ئاقسىلپەردىدە قالىدۇ. ئوخشىمىغان مولېكۇلا ئېغىرلىقتىكى ئاقسىللارنى توسۇش ئۈچۈن ئوخشىمىغان تۆشۈكچىلەرنىڭ چوڭ-كىچىكلىكىنى تاللىيالايسىز.
4. گېل سۈزۈش ئۇسۇلى:
چوڭلۇقنى چىقىرىۋېتىش خروموگرافىيىسى ياكى مولېكۇلا ئەلگەك خروموگرافىيىسى دەپمۇ ئاتىلىدۇ ، بۇ ئاقسىل ئارىلاشمىسىنى مولېكۇلا چوڭ-كىچىكلىكىگە ئاساسەن ئايرىشنىڭ ئەڭ پايدىلىق ئۇسۇللىرىنىڭ بىرى. تۈۋرۈكتە كۆپ ئىشلىتىلىدىغان ئورالما ماتېرىياللار گلۇكوزا گېلى (Sephadex ged) ۋە ئاگاروزا گېلى (ئاگاروزا گېلى).
5. ئېلېكتىروفورېس:
ئوخشاش pH شارائىتىدا ، ئوخشىمىغان مولېكۇلا ئېغىرلىقى ۋە ئېلېكتر ساھەسىدىكى توكنىڭ ئوخشىماسلىقى سەۋەبىدىن ھەر خىل ئاقسىللارنى ئايرىغىلى بولىدۇ. ئامفولىتنى توشۇغۇچى سۈپىتىدە ئىشلىتىدىغان ئىزوئېلېكتىرلىق ئېلېكتروفورېزغا دىققەت قىلىشقا ئەرزىيدۇ. ئېلېكتروفورېز جەريانىدا ، ئامفولىت مۇسبەت ئېلېكترودتىن مەنپىي ئېلېكترودقا تەدرىجىي قوشۇلغان pH دەرىجىسىنى ھاسىل قىلىدۇ. ئۇنىڭدا مەلۇم توك قاچىلانغان ئاقسىل ئۈزگەندە ، ئۇ بىر-بىرىگە يېتىدۇ. ئېلېكتر نۇقتىسىنىڭ pH ئورنى ئۈزۈلۈپ قالمايدۇ ، بۇ ئۇسۇل ئارقىلىق ھەر خىل ئاقسىللارنى ئانالىز قىلىش ۋە تەييارلاشقا بولىدۇ.
6.ئىن ئالاقە خروموگرافىيىسى:
ئىئون خەۋەرلىشىش ۋاكالەتچىلىرى كاتېگورىيەلىك ئالاقە ۋاكالەتچىسى (مەسىلەن: كاربوناتسىئېل سېللۇلوزا CM CM- سېللۇلوزا) ۋە ئانئونىي ئالاقە ۋاكالەتچىسى (diethylaminoethyl cellulose) قاتارلىقلارنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ. ئىئون ئالاقە خروموگرافىيە ئىستونىدىن ئۆتكەندە ، ئىئون ئالاقە ۋاكالەتچىسىگە قارشى توك قاچىلانغان ئاقسىل ئىئون ئالاقە ۋاكالەتچىسىگە چاپلىنىدۇ ، ئاندىن ئېلان بېرىلىدۇ.ئاقسىلpH ياكى ئىئون كۈچىنى ئۆزگەرتىش ئارقىلىق شاللىنىدۇ.
7. يېقىنلىق خروموگرافىيىسى:
يېقىنلىق خروموگرافىيىسى ئاقسىلنى ئايرىشتا ئىنتايىن پايدىلىق ئۇسۇل. ئۇ يۇقىرى ئاقسىللىق ئارىلاشما ئاقسىل ئارىلاشمىسىدىن پاكلىنىش ئۈچۈن مەلۇم ئاقسىلنى ئايرىش ئۈچۈن پەقەت بىرلا قەدەم تەلەپ قىلىدۇ.
بۇ ئۇسۇل مەلۇم ئاقسىلنىڭ لەگلەك (Ligand) دەپ ئاتىلىدىغان باشقا مولېكۇلاغا يانداش باغلىنىشنى ئەمەس ، بەلكى كونكرېتنى ئاساس قىلىدۇ.
ئاساسىي پرىنسىپ:
ئاقسىل توقۇلمىلار ياكى ھۈجەيرىلەردە قالايمىقان ئارىلاشما ماددىدا مەۋجۇت بولۇپ ، ھەر خىل ھۈجەيرىلەردە مىڭلىغان ئوخشىمىغان ئاقسىل بار. شۇڭلاشقا ، ئاقسىلنىڭ پەرقى بىئوخېمىيەنىڭ مۇھىم تەركىبىي قىسمى ، ئۇ يالغۇز ئەمەس. ياكى بىر يۈرۈش تەييار ئۇسۇللار قالايمىقان ئارىلاشما ئاقسىلدىن ھەر خىل ئاقسىلنى چىقىرىپ تاشلىيالايدۇ ، شۇڭا دائىم بىر قانچە خىل ئۇسۇل قوللىنىلىدۇ.
يوللانغان ۋاقتى: 11-نويابىردىن 05-2020-يىلغىچە