Протеинны чистартуның тупас аерылуы һәм яхшы аерылуы

Белгечләрне аеру һәм чистарту биохимия тикшеренүләрендә һәм кулланылышында киң кулланыла һәм мөһим оператив осталык булып тора. SCG протеин чистарту системасы компаниясе-Сайпу инструменты чиста аеруны һәм яхшы аеру эчтәлеген тупладыпротеинһәркем өчен чистарту. Типик эукариотик күзәнәк меңләгән төрле протеиннарны үз эченә ала, кайберләре бик бай, кайберләрендә берничә нөсхә генә бар. Билгеле бер протеинны өйрәнү өчен, башта протеинны башка протеиннардан һәм протеин булмаган молекулалардан чистартырга кирәк.

19

Каты аеру

Протеин экстракты (кайвакыт нуклеин кислоталары, полисахаридлар һ.б. белән кушылганда) алынгач, кирәклене аеру өчен тиешле ысуллар җыелмасы сайлана.протеинбүтән пычраклардан. Гадәттә, бу аеру адымы тозлау, изоэлектрик нокта туплау һәм органик эретүче ваклану кебек ысулларны куллана. Бу ысуллар гадилек һәм зур эшкәртү сыйфаты белән аерылып тора, алар күп пычракларны бетерә һәм протеин эремәсен туплый ала. Кайбер протеин экстрактлары зур күләмдә, туплау яки тозлау белән концентрация өчен яраксыз. Сез ультрафильтрлау, гель фильтрлау, вакуум киптерү яки концентрацияләү өчен башка ысулларны сайлый аласыз.

Яхшы аеру

Ampleрнәкнең тупас фракциясеннән соң, күләм гадәттә кечкенә, пычракларның күбесе алынды. Алга таба чистарту өчен, хроматография ысулларына гадәттә гель фильтрлау, ион алмашу хроматографиясе, адсорбция хроматографиясе һәм якынлык хроматографиясе керә. Кирәк булса, сез шулай ук ​​электрофорезны сайлый аласыз, шул исәптән зона электрофорезы, изоэлектрик ноктасы һ.б. Подразделение дәрәҗәсен аеру өчен кулланылган ысул планлаштыруда гадәттә кечкенә, ләкин югары резолюция белән.

Кристализация - протеинны аеру һәм чистартуның соңгы процессы. Кристаллизация процессы протеинның бертөрле булырга тиешлеген тәэмин итмәсә дә, кристалл формалаштыру өчен билгеле бер протеинның өстенлеге булганда гына. Кристаллизация процессы үзе билгеле бер чистарту белән бергә бара, һәм рекристализация аз күләмдә зина кылган аксымны бетерә ала. Денатурланганнан бирлепротеинКристализация процессында беркайчан да табылмады, протеин кристаллашуы чисталык билгесе генә түгел, продуктның табигый халәттә булуын ачыклау өчен көчле күрсәтмә.


Пост вакыты: 19-2020 ноябрь