Нуклеин кислотасы дезоксирибонуклеин кислотасына (ДНК) һәм рибонуклеин кислотасына (РНК) бүленә, алар арасында РНКны рибосомаль РНК (rRNA), хәбәрче РНК (mRNA) һәм РНК (tRNA) төрле функцияләр буенча бүлеп була.

ДНК нигездә ядрода, митохондриядә һәм хлоропластларда тупланган, РНК нигездә цитоплазмада таралган.

Пурин нигезләре һәм пиримидин нигезләре нуклеин кислоталарында икеләтә бәйләнеш булганлыктан, нуклеин кислоталары ультрафиолетның үзләштерү үзенчәлекләренә ия. ДНК натрий тозларының ультрафиолет үзләштерүе 260нм тирәсе, һәм аның үзләштерүе A260 рәвешендә күрсәтелә, һәм ул үзләштерү куышында 230нм тәшкил итә, шуңа күрә ультрафиолет спектроскопиясе кулланылырга мөмкин. Нуклеин кислоталары сан һәм сыйфат ягыннан луминометр белән билгеләнә.

Нуклеин кислоталары полиасидларга тиң булган амфолитлар. Нуклеин кислоталары нейтраль яки эшкәртүле буферлар кулланып анионнарга бүленергә һәм анодка таба хәрәкәт итү өчен электр кырына урнаштырылырга мөмкин. Бу электрофорез принцибы.

Нуклеин кислотасын чыгару һәм чистарту принциплары һәм таләпләре

1. Нуклеин кислотасының төп структурасының бөтенлеген тәэмин итү

2. Башка молекулаларның пычрануын бетерегез (мәсәлән, ДНК чыгарганда РНК комачаулавын исәпкә алмаганда).

3. Нуклеин кислотасы үрнәкләрендә ферментларны тыя торган органик эреткечләр һәм металл ионнарның югары концентрацияләре булырга тиеш түгел

4. Белгечләр, полисахаридлар һәм липидлар кебек макромолекуляр матдәләрне мөмкин кадәр киметегез

Нуклеин кислотасын чыгару һәм чистарту ысулы

1. Фенол / хлороформ алу ысулы

Ул 1956-нчы елда уйлап табылган. Күзәнәк ватылган сыек яки тукымалар гомогенатын фенол / хлороформ белән дәвалаганнан соң, нуклеин кислотасы компонентлары, нигездә, ДНК, су фазасында эриләр, липидлар нигездә органик фазада, һәм протеиннар икесе арасында урнашкан. этаплар.

2. Алкоголь явым-төшеме

Этанол нуклеин кислотасының гидратлашу катламын бетерә һәм тискәре корылган фосфат төркемен фаш итә ала, һәм NA as кебек уңай корылган ионнар фосфат төркеме белән кушылып явым-төшем барлыкка китерә ала.

3. Хрестоматия баганасы ысулы

Силикатка нигезләнгән махсус adsorption материалы ярдәмендә ДНК махсус adsorbed була ала, ә РНК һәм протеин шома үтеп китә ала, аннары нуклеин кислотасын бәйләү өчен югары тоз һәм аз рН куллана, һәм аз тоз һәм югары pH белән нуклеикны аеру һәм чистарту өчен. кислотасы.

4. Термаль ярылу алкалы ысулы

Шакар чыгару, нигездә, ковалентлы ябык түгәрәк плазмидлар һәм сызыклы хроматиннар арасындагы топологик аермаларны куллана. Кычыткыч шартларда денатурланган аксымнар эри.

5. Кайнату пиролиз ысулы

ДНК эремәсе җылылык белән эшкәртелә, сызыклы ДНК молекулаларының үзлекләреннән файдалану өчен, ДНК фрагментларын денатурланган аксымнар һәм кәрәзле калдыклар центрифугация ярдәмендә барлыкка килгән явым-төшемнән аеру өчен.

6. Наномагнит мишәр ысулы

Суперпарамагнит нанопартикларының өслеген яхшырту һәм үзгәртү өчен нанотехнологияләр кулланып, суперпарамагнит кремний оксиды нано-магнит мишәрләр әзерләнә. Магнит мишәрләр микроскопик интерфейста нуклеин кислотасы молекулаларын махсус таный һәм эффектив бәйли ала. Силикат наносфераларның суперпарамагнит үзлекләрен кулланып, Хаотроп тозлары (гуанидин гидрохлорид, гуанидин изотиокянат һ.б.) һәм тышкы магнит кыры, ДНК һәм РНК кан, хайван тукымасы, азык, патогеник микроорганизмнар һәм башка үрнәкләрдән аерылды.