Proteinlerin ayrılması ve saflaştırılması, biyokimya araştırma ve uygulamalarında yaygın olarak kullanılmaktadır ve önemli bir operasyonel beceridir. SCG Protein Saflaştırma Sistemi Şirketi-Saipu Instrument, ham ayırma ve ince ayırma içeriğini derlediproteinherkes için arınma. Tipik bir ökaryotik hücre binlerce farklı protein içerebilir; bunların bazıları çok zengin, bazıları ise yalnızca birkaç kopya içerir. Belirli bir proteini incelemek için öncelikle proteini diğer proteinlerden ve protein olmayan moleküllerden saflaştırmak gerekir.

Kaba ayırma

Protein ekstraktı (bazen nükleik asitler, polisakkaritler vb. ile karıştırılarak) elde edildiğinde, istenen proteinleri ayırmak için bir dizi uygun yöntem seçilir.proteindiğer yabancı maddelerden. Genel olarak ayırmanın bu adımında, tuzla ayırma, izoelektrik nokta birikimi ve organik çözücünün ayrıştırılması gibi yöntemler kullanılır. Bu yöntemler, birçok safsızlığı giderebilen ve protein çözeltisini konsantre edebilen basitlik ve büyük işleme kapasitesi ile karakterize edilir. Bazı protein ekstraktlarının hacmi büyüktür ve biriktirme veya tuzlama yoluyla konsantrasyona uygun değildir. Konsantrasyon için ultrafiltrasyon, jel filtreleme, dondurarak vakumla kurutma veya diğer yöntemleri seçebilirsiniz.

İnce ayırma

Numunenin kaba fraksiyonlanmasının ardından hacim genellikle küçüktür ve yabancı maddelerin çoğu uzaklaştırılmıştır. Daha fazla saflaştırma için kromatografi yöntemleri genellikle jel filtrasyonunu, iyon değiştirme kromatografisini, adsorpsiyon kromatografisini ve afinite kromatografisini içerir. Gerekirse son saflaştırma işlemi olarak bölge elektroforezi, izoelektrik nokta seti vb. dahil olmak üzere elektroforezi de seçebilirsiniz. Alt bölüm düzeyinde ayırma için kullanılan yöntem genellikle planlamada küçüktür ancak çözünürlüğü yüksektir.

Kristalizasyon, protein ayırma ve saflaştırmanın son işlemidir. Kristalizasyon işlemi proteinin tekdüze olmasını garantilemese de, yalnızca belirli bir proteinin çözeltide kristal oluşturma avantajına sahip olması durumunda gerçekleşir. Kristalizasyon işleminin kendisine belirli bir derecede saflaştırma eşlik eder ve yeniden kristalleştirme, az miktarda katkılı proteini ortadan kaldırabilir. Denatüre olduğundan beriproteinKristalizasyon işlemi sırasında hiçbir zaman bulunamayan protein kristalizasyonu yalnızca saflığın bir işareti değil, aynı zamanda ürünün doğal halinde olduğunu belirlemek için güçlü bir kılavuzdur.