Yöntemleriprotein saflaştırma:

Protein saflaştırma, ayırma ve saflaştırma yönteminde protein, orijinal hücrelerden veya dokulardan çözünmüş halde salınır ve biyolojik aktivite kaybı olmadan orijinal doğal halinde kalır. Bu nedenle materyalin hayvan ve yağ dokusunu uzaklaştırması, tohum materyalinin tohum kabuğundaki tanen gibi maddelerden kaynaklanan kontaminasyonu bile soyması ve yağlı tohumun tercihen düşük kaynama noktalı bir organik solvent kullanması gerekir.

1. Protein saflaştırma yöntemi, boyutu ve farklı ayırma analiz yöntemleri: diyaliz ve ultrafiltrasyon, yarı geçirgen zardan geçemeyen moleküllerin doğasından geçmek için bu proteinleri kullanır; yoğunluk gradyanlı santrifüjleme Ortamdaki proteinin kalitesi ve yoğunluğunun parçacıklar üzerinde daha büyük etkisi olacaktır. Yerleşme hızı daha hızlıdır; jel filtrasyonu bir tür kolon kromatografisidir.

2. Kullanımda çözünürlük farkının ayrılması: elektro-çöktürme, çünkü protein moleküllerinin net yükü sıfır izoelektrik noktadadır, moleküller arasındaki elektrostatik itmeyi azaltır, toplanması kolaydır ve minimum çözünürlük; Tuz çözeltisiyle birlikte kullanılan tuz çözeltisi Konsantrasyon, proteinin çözünürlüğünü artırır veya azaltır.

3. Yük farklı yöntemlerle ayrılır ve analiz edilir; ana içerikler elektroforez ve iyon değişim kromatografisini içerir.

4. Yöntemlerprotein saflaştırmaProteinlerin seçici adsorpsiyonu ve ayrılması, partikül adsorpsiyonunun gücünden yararlanır.

5. Afinite kromatografisi ligandların ayrılmasına dayanır. Bu biyolojik özellik, protein moleküllerinin, ligand adı verilen başka bir moleküle kovalent olarak bağlanmak yerine spesifik olarak bağlanmasına olanak tanır.

6. Protein saflaştırma yöntemi: Düşük sıcaklıkta organik çözücü çökeltme yöntemi: Çoğu proteinin çözünürlüğünü ve çökelmesini azaltmak için metanol, etanol gibi suyla karışabilen organik çözücüler kullanın. Bu yöntemin çözünürlüğü tuzlamadan daha yüksektir ancak protein daha fazla denatüre olur. Kolay olduğunda düşük sıcaklıkta yapılmalıdır.

Nasıl arındırılırprotein saflaştırma:

Protein nasıl saflaştırılır, protein büyük bir moleküldür ve albüminin çeşitli moleküler boyutları vardır, proteini ve küçük moleküllü malzemeleri ayırmak için daha basit yöntemler vardır ve ayrıca protein karışımını da ayırır. Farklı moleküler boyutlardaki proteinleri ayırmanın ana yöntemleri diyaliz, ultrafiltrasyon, jel filtrasyonu ve santrifüjle ayırmadır. Protein ayırma yöntemlerinde yaygın olarak diyaliz ve ultrafiltrasyon kullanılır. Ayırılacak diyaliz karışımı, yarı geçirgen bir membrandan yapılmış bir diyaliz torbasına konulur ve daha sonra ayrıştırılmak üzere diyaliz solüsyonuna daldırılır. Ultrafiltrasyon, suyun ve diğer küçük moleküllerin merkezkaç kuvveti veya basınç kullanarak yarı geçirgen bir zardan geçirilmesi ve proteinlerin yarı geçirgen zarda tutulması işlemidir. Bu iki yöntem protein bazlı makromoleküllerden ve inorganik tuz bazlı küçük moleküllerden ayrılabilir. Genellikle tuzla eritilirler, tuz eritme yöntemiyle birlikte kullanılırlar veya inorganik tuz çözeltileri kullanılarak tuzla uzaklaştırıldıktan sonra bu iki yöntemi çıkarmak için eklenebilirler.

1. Tuzlama yöntemi ile protein nasıl saflaştırılır: Tuzlama yönteminin temeli, tuz konsantrasyonunun artmasıyla proteinin seyreltik tuz çözeltisindeki çözünürlüğünün artması, ancak tuz konsantrasyonu belirli bir değere çıktığında, proteinin seyreltik tuz çözeltisindeki çözünürlüğünün artmasıdır. su aktivitesi artacaktır. Azalma, bazı proteinlerin moleküler yapı yüzeyi boyunca yük oluşturmasına neden olabilir ve yavaş yavaş nötralize edilir ve hidrasyon membranı yavaş yavaş yok edilir, bu da sonuçta ilgili proteinlerin ve moleküllerin topaklaşma geliştirmesine ve farklı çözeltilerden çökelmesine neden olabilir.

2. Organik çözücü çökeltme yöntemi: Proteinin organik çözücüler içindeki çözünürlüğünü azaltmanın iki nedeni vardır: proteinin dehidrasyonla bir tuz çözeltisi halinde nasıl saflaştırılacağı; ikincisi, organik çözücülerin dielektrik sabiti suya göre polar çözücülerde azaltılabilir.

3. Protein çökeltici ajan: çökeltici bir ajan olarak protein, yalnızca bir tür veya protein çökeltmesinden birinde etki eder; yaygın olanları alkalin, protein, lektin ve ağır metallerdir.

4. Polietilen glikol çökeltme: Suda çözünebilen iyonik olmayan polimerler nasıl saflaştırılır?protein saflaştırmaproteinleri çökeltmek için polietilen glikol ve sodyum dekstran sülfat gibi.