Ang paghihiwalay at paglilinis ng mga protina ay malawakang ginagamit sa biochemistry na pananaliksik at aplikasyon at ito ay isang mahalagang kasanayan sa pagpapatakbo. Ang SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument ay pinagsama-sama ang krudo separation at fine separation content ngprotinapaglilinis para sa lahat. Ang isang tipikal na eukaryotic cell ay maaaring maglaman ng libu-libong iba't ibang mga protina, ang ilan ay napakayaman at ang ilan ay naglalaman lamang ng ilang mga kopya. Upang pag-aralan ang isang tiyak na protina, kinakailangan na linisin muna ang protina mula sa iba pang mga protina at mga molekulang hindi protina.

Magaspang na paghihiwalay

Kapag nakuha ang katas ng protina (kung minsan ay may halong mga nucleic acid, polysaccharides, atbp.), isang hanay ng mga naaangkop na pamamaraan ang pipiliin upang paghiwalayin ang naisprotinamula sa iba pang mga impurities. Sa pangkalahatan, ang hakbang na ito ng paghihiwalay ay gumagamit ng mga pamamaraan tulad ng salting out, isoelectric point accumulation at organic solvent fractionation. Ang mga pamamaraan na ito ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagiging simple at malaking kapasidad sa pagproseso, na maaaring mag-alis ng maraming mga impurities at tumutok sa solusyon ng protina. Ang ilang mga extract ng protina ay malaki ang dami at hindi angkop para sa konsentrasyon sa pamamagitan ng akumulasyon o pag-aasin. Maaari kang pumili ng ultrafiltration, gel filtration, nagyeyelong vacuum drying o iba pang paraan para sa konsentrasyon.

Mabuting paghihiwalay

Pagkatapos ng magaspang na fractionation ng sample, ang volume ay karaniwang maliit, at karamihan sa mga impurities ay naalis na. Para sa karagdagang paglilinis, ang mga pamamaraan ng chromatography sa pangkalahatan ay kinabibilangan ng gel filtration, ion exchange chromatography, adsorption chromatography, at affinity chromatography. Kung kinakailangan, maaari ka ring pumili ng electrophoresis, kabilang ang zone electrophoresis, isoelectric point set, atbp. bilang panghuling proseso ng paglilinis. Ang paraan na ginagamit para sa paghihiwalay sa antas ng subdivision ay karaniwang maliit sa pagpaplano, ngunit may mataas na resolusyon.

Ang crystallization ay ang huling proseso ng paghihiwalay at paglilinis ng protina. Bagaman ang proseso ng pagkikristal ay hindi tinitiyak na ang protina ay dapat na pare-pareho, ito ay kapag ang isang tiyak na protina ay may kalamangan sa solusyon upang bumuo ng isang kristal. Ang proseso ng crystallization mismo ay sinamahan ng isang tiyak na antas ng purification, at ang recrystallization ay maaaring mag-alis ng isang maliit na halaga ng adulterated protein. Dahil na-denaturedprotinaay hindi kailanman natagpuan sa panahon ng proseso ng pagkikristal, ang pagkikristal ng protina ay hindi lamang isang tanda ng kadalisayan, ngunit isang malakas na patnubay upang matukoy na ang produkto ay nasa natural na estado nito.