Ang nucleic acid ay nahahati sa deoxyribonucleic acid (DNA) at ribonucleic acid (RNA), kung saan ang RNA ay maaaring nahahati sa ribosomal RNA (rRNA), messenger RNA (mRNA) at transfer RNA (tRNA) ayon sa iba't ibang mga function.

Ang DNA ay pangunahing puro sa nucleus, mitochondria at chloroplast, habang ang RNA ay pangunahing ipinamamahagi sa cytoplasm.

Dahil ang purine base at pyrimidine base ay may conjugated double bonds sa nucleic acids, ang mga nucleic acid ay may mga katangian ng ultraviolet absorption. Ang ultraviolet absorption ng DNA sodium salts ay nasa paligid ng 260nm, at ang absorbance nito ay ipinahayag bilang A260, at ito ay nasa absorption trough sa 230nm, kaya ang ultraviolet spectroscopy ay maaaring gamitin. Ang mga nucleic acid ay quantitatively at qualitatively na tinutukoy ng isang luminometer.

Ang mga nucleic acid ay ampholytes, na katumbas ng polyacids. Ang mga nucleic acid ay maaaring ihiwalay sa mga anion sa pamamagitan ng paggamit ng mga neutral o alkaline na buffer, at ilagay sa isang electric field upang lumipat patungo sa anode. Ito ang prinsipyo ng electrophoresis.

Mga prinsipyo at kinakailangan sa pagkuha at pagdalisay ng nucleic acid

1. Tiyakin ang integridad ng pangunahing istraktura ng nucleic acid

2. Tanggalin ang kontaminasyon ng iba pang mga molecule (tulad ng pagbubukod ng RNA interference kapag kumukuha ng DNA)

3. Dapat ay walang mga organikong solvent at mataas na konsentrasyon ng mga metal ions na pumipigil sa mga enzyme sa mga sample ng nucleic acid

4. Bawasan ang mga macromolecular substance tulad ng mga protina, polysaccharides at lipids hangga't maaari

Paraan ng pagkuha at paglilinis ng nucleic acid

1. Paraan ng pagkuha ng Phenol/chloroform

Ito ay naimbento noong 1956. Matapos gamutin ang sirang selulang likido o tissue homogenate na may phenol/chloroform, ang mga bahagi ng nucleic acid, pangunahin ang DNA, ay natutunaw sa aqueous phase, ang mga lipid ay pangunahing nasa organic phase, at ang mga protina ay matatagpuan sa pagitan ng dalawa. mga yugto.

2. Pag-ulan ng alak

Maaaring alisin ng ethanol ang hydration layer ng nucleic acid at ilantad ang negatibong sisingilin na phosphate group, at ang mga positively charged na ion tulad ng NA﹢ ay maaaring pagsamahin sa phosphate group upang bumuo ng precipitate.

3. Chromatographic column method

Sa pamamagitan ng espesyal na materyal na adsorption na nakabatay sa silica, ang DNA ay maaaring partikular na ma-adsorbed, habang ang RNA at protina ay maaaring dumaan nang maayos, at pagkatapos ay gumamit ng mataas na asin at mababang pH upang magbigkis ng nucleic acid, at mag-elute ng mababang asin at mataas na pH upang paghiwalayin at linisin ang nucleic acid.

4. Thermal cracking alkali method

Pangunahing ginagamit ng alkaline extraction ang mga topological na pagkakaiba sa pagitan ng covalently closed circular plasmids at linear chromatin upang paghiwalayin ang mga ito. Sa ilalim ng alkaline na mga kondisyon, ang mga denatured na protina ay natutunaw.

5. Pamamaraan ng boiling pyrolysis

Ang solusyon sa DNA ay pinainit upang samantalahin ang mga katangian ng mga linear na molekula ng DNA upang paghiwalayin ang mga fragment ng DNA mula sa precipitate na nabuo ng mga denatured na protina at cellular debris sa pamamagitan ng centrifugation.

6. Paraan ng Nanomagnetic beads

Gamit ang nanotechnology upang mapabuti at baguhin ang ibabaw ng superparamagnetic nanoparticle, ang superparamagnetic silicon oxide nano-magnetic beads ay inihanda. Ang mga magnetic bead ay maaaring partikular na makilala at mahusay na magbigkis sa mga nucleic acid molecule sa isang microscopic interface. Gamit ang mga superparamagnetic na katangian ng silica nanospheres, sa ilalim ng pagkilos ng Chaotropic salts (guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate, atbp.) At isang panlabas na magnetic field, ang DNA at RNA ay nakahiwalay sa dugo, tissue ng hayop, pagkain, pathogenic microorganism at iba pang mga sample .