Pamamaraan ngpaglilinis ng protina:

Ang paraan ng paglilinis ng protina, paghihiwalay at paglilinis ng protina, ang protina ay inilabas mula sa orihinal na mga selula o tisyu sa isang dissolved na estado at nananatili sa orihinal na natural na estado nang walang pagkawala ng biological na aktibidad. Para sa kadahilanang ito, ang materyal ay dapat mag-alis ng tissue ng hayop at adipose, ang materyal ng buto ay dapat kahit na alisan ng balat ang kontaminasyon ng seed coat mula sa mga sangkap tulad ng mga tannin, at ang buto ng langis ay dapat na mas mabuti na gumamit ng isang mababang kumukulo na organikong solvent.

1. Ang paraan ng pagdalisay ng protina, laki at iba't ibang paraan ng pagsusuri sa paghihiwalay: ginagamit ng dialysis at ultrafiltration ang mga protina na ito upang dumaan sa likas na katangian ng mga molekula na hindi maaaring dumaan sa semi-permeable membrane; density gradient centrifugation Ang kalidad at density ng protina sa medium ay magkakaroon ng mas malaking epekto sa mga particle. Ang bilis ng pag-aayos ay mas mabilis; Ang pagsasala ng gel ay isang uri ng column chromatography.

2. Paghihiwalay ng pagkakaiba sa solubility sa paggamit: electro-precipitation dahil ang net charge ng mga molekula ng protina ay nasa zero isoelectric point, binabawasan ang electrostatic repulsion sa pagitan ng mga molecule, madaling pagsama-samahin, at pinakamababang solubility; solusyon ng asin na ginagamit sa solusyon ng asin Ang konsentrasyon ay nagpapataas o nagpapababa ng solubility ng protina.

3. Ang singil ay pinaghihiwalay at sinusuri ng iba't ibang pamamaraan, ang pangunahing nilalaman ay kinabibilangan ng electrophoresis at chromatography ng pagpapalitan ng ion.

4. Paraan ngpaglilinis ng protinaAng pumipili na adsorption at paghihiwalay ng mga protina ay gumagamit ng lakas ng particle adsorption.

5. Ang affinity chromatography ay batay sa paghihiwalay ng mga ligand. Ang biyolohikal na katangiang ito ay nagpapahintulot sa mga molekula ng protina na partikular na magbigkis sa halip na covalently sa isa pang molekula na tinatawag na ligand.

6. Paraan ng paglilinis ng protina: Paraan ng pag-ulan ng organikong solvent na may mababang temperatura: Gumamit ng mga organikong solvent na nahahalo sa tubig, tulad ng methanol, ethanol, upang bawasan ang solubility at precipitation ng karamihan sa mga protina. Ang pamamaraang ito ay mas mataas kaysa sa resolution salting out, ngunit ang protina ay mas nadenatura Kapag madali, dapat itong gawin sa mababang temperatura.

Paano maglinispaglilinis ng protina:

Paano linisin ang protina, ang protina ay isang malaking molekula, at iba't ibang mga molekular na sukat ng albumin, mayroong ilang mas simpleng paraan upang paghiwalayin ang protina at maliit na molekula na materyales, at pinaghiwalay din ang pinaghalong protina. Ang mga pangunahing pamamaraan para sa paghihiwalay ng mga protina ng iba't ibang laki ng molekular ay dialysis, ultrafiltration, gel filtration, at centrifugal separation. Ang dialysis at ultrafiltration ay karaniwang ginagamit sa mga paraan ng paghihiwalay ng protina. Ang pinaghalong dialysis na ihihiwalay ay inilalagay sa isang dialysis bag na gawa sa isang semipermeable membrane, at pagkatapos ay ilulubog sa dialysis solution para sa paghihiwalay. Ang ultrafiltration ay ang proseso ng pagpasa ng tubig at iba pang maliliit na molekula gamit ang sentripugal na puwersa o presyon sa isang semi-permeable na lamad at pag-trap ng mga protina sa semi-permeable na lamad. Ang dalawang pamamaraan na ito ay maaaring paghiwalayin mula sa mga macromolecule na nakabatay sa protina at maliliit na molekula na nakabatay sa asin. Ang mga ito ay madalas na inasnan, ginagamit kasabay ng paraan ng pagtunaw ng asin, o maaaring ipakilala upang kunin ang dalawang pamamaraang ito pagkatapos mag-asin gamit ang mga inorganic na solusyon sa asin.

1. Paano linisin ang protina sa pamamagitan ng paraan ng pag-aasin: Ang batayan ng paraan ng pag-aasin ay ang solubility ng protina sa dilute na solusyon ng asin ay tataas sa pagtaas ng konsentrasyon ng asin, ngunit kapag ang konsentrasyon ng asin ay tumaas sa isang tiyak na halaga, ang tataas ang aktibidad ng tubig. Ang pagbaba, na kung saan ay maaaring maging sanhi ng ilang mga protina upang makabuo ng mga singil sa pamamagitan ng molecular structure surface na unti-unting na-neutralize, at ang hydration membrane ay unti-unting nawasak, na sa kalaunan ay maaaring maging sanhi ng mga nauugnay na protina at molekula upang bumuo ng agglomeration at precipitate mula sa iba't ibang mga solusyon.

2. Organic solvent precipitation method: Mayroong dalawang dahilan upang bawasan ang solubility ng protina sa mga organic solvents: kung paano linisin ang protina bilang solusyon sa asin na may dehydration; pangalawa, ang dielectric na pare-pareho ng mga organic solvents kaysa sa tubig ay maaaring mabawasan Sa polar solvents.

3. Protein precipitating agent: ang protina bilang isang precipitating agent ay kumikilos lamang sa isang uri o isa sa protein precipitation, ang mga karaniwan ay alkaline, protein, lectin, at heavy metals.

4. Polyethylene glycol precipitation: Paano linisin ang mga non-ionic polymer na nalulusaw sa tubig para sapaglilinis ng protina, tulad ng polyethylene glycol at sodium dextran sulfate para mag-precipitate ng mga protina.