Nuklein kislotasy deoksiribonuklein kislotasyna (DNK) we ribonuklein kislotasyna (RNK) bölünýär, olaryň arasynda RNK ribosomal RNK (rRNA), habarçy RNA (mRNA) we dürli funksiýalara laýyklykda RNK (tRNA) bölünip bilner.

DNK esasan ýadroda, mitohondriýada we hloroplastlarda jemlenýär, RNK esasan sitoplazmada paýlanýar.

Pürin esaslary we pirimidin esaslary nuklein kislotalarynda goşa baglanyşyklary emele getirendigi sebäpli, nuklein kislotalar ultramelewşe siňdiriş aýratynlyklaryna eýe. DNK natriý duzlarynyň ultramelewşe siňdirişi 260nm töweregi, siňdirilişi A260 hökmünde aňladylýar we 230nm tizlikde sorulýar, şonuň üçin ultramelewşe spektroskopiýa ulanylyp bilner. Nuklein kislotalary mukdar we hil taýdan luminometr bilen kesgitlenýär.

Nuklein kislotalary poliasidlere deň bolan amfolitlerdir. Nuklein kislotalary bitarap ýa-da gidroksidi buferleri ulanyp, anionlara bölünip, anoda tarap hereket etmek üçin elektrik meýdanyna ýerleşdirilip bilner. Bu elektroforez prinsipidir.

Nuklein kislotasyny çykarmak we arassalamak ýörelgeleri we talaplary

1. Nuklein kislotasynyň esasy gurluşynyň bitewiligini üpjün ediň

2. Beýleki molekulalaryň hapalanmagyny ýok ediň (meselem, DNK çykarylanda RNK päsgelçiligini hasaba almazdan)

3. Nuklein kislotasynyň nusgalarynda fermentleri saklaýan organiki erginler we metal ionlarynyň ýokary konsentrasiýasy bolmaly däldir

4. Beloklar, polisakaridler we lipidler ýaly makromolekulýar maddalary mümkin boldugyça azaltmak

Nuklein kislotasyny çykarmak we arassalamak usuly

1. Fenol / hloroform çykarmak usuly

1956-njy ýylda oýlanyp tapyldy. Öýjük döwülen suwuk ýa-da dokuma gomogenatyny fenol / hloroform bilen bejermekden soň, nuklein kislotasynyň düzüm bölekleri, esasan DNK, suw fazasynda erär, lipidler esasan organiki fazada we beloklar ikisiniň arasynda ýerleşýär. tapgyrlary.

2. Alkogol ýagyşy

Etanol nuklein kislotasynyň gidrasiýa gatlagyny ýok edip, otrisatel zarýadlanan fosfat toparyny paş edip biler we NA as ýaly pololyitel zarýadly ionlar fosfat topary bilen birleşip çökgünlik döredip biler.

3. Hromatografiki sütün usuly

Silörite kremniýa esasly adsorbsion materialyň üsti bilen DNK ýörite adsorbsiýa edilip bilner, RNK we belok bolsa rahat geçip biler, soň bolsa nuklein kislotasyny baglamak üçin ýokary duz we pes pH ulanyp, az duz we ýokary pH bilen nukleini bölmek we arassalamak üçin ulanylýar. kislotasy.

4. malylylyk döwmek aşgar usuly

Alkogol çykarmak, esasan, ýapyk tegelek plazmidler bilen çyzykly hromatiniň arasyndaky topologiki tapawutlary ulanýar. Alkogol şertlerinde denatirlenen beloklar erär.

5. Piroliziň gaýnadyş usuly

DNK ergini, DNK böleklerini merkezden gaçyryş arkaly bölünen beloklardan we öýjükli galyndylardan emele gelen çökündilerden bölmek üçin çyzykly DNK molekulalarynyň häsiýetlerinden peýdalanmak üçin ýylylyk bilen bejerilýär.

6. Nanomagnit monjuk usuly

Superparamagnetik nanobölejikleriň ýüzüni gowulandyrmak we üýtgetmek üçin nanotehnologiýany ulanyp, superparamagnetik kremniniň oksidi nano-magnit monjuklary taýýarlanýar. Magnit monjuklar mikroskopik interfeýsde nuklein kislotasynyň molekulalaryny ýörite tanap we netijeli baglanyşdyryp bilerler. Silotiki nanosferalaryň superparamagnetiki aýratynlyklaryny ulanyp, Çaotrop duzlarynyň (guanidin gidroklorid, guanidin izotiosýanat we ş.m.) we daşarky magnit meýdany, DNK we RNK gan, haýwan dokumalary, iýmit, patogen mikroorganizmler we beýleki nusgalardan izolirlendi.