Beloklary bölmek we arassalamak biohimiýa gözleginde we ulanylyşynda giňden ulanylýar we möhüm iş ussatlygydyr. Adaty eukariotik öýjükde müňlerçe dürli belok bolup biler, käbirleri örän baý we käbirlerinde diňe birnäçe nusgasy bar. Belli bir zady öwrenmek üçinbelok, ilki bilen belogy beýleki beloklardan we belok däl molekulalardan arassalamaly.
1. Duzlamagyň usulybelok:
Bitarap duz belogyň erginine ep-esli täsir edýär. Adatça, az duz konsentrasiýasynda duz konsentrasiýasynyň köpelmegi bilen belogyň erginligi ýokarlanýar. Bu duzlamak diýilýär; duzuň konsentrasiýasy ýokarlananda, belogyň erginligi dürli derejelere çenli azalýar we biri-birinden aýrylýar. Bu hadysa duzlamak diýilýär.
2. Izoelektrik nokatlaryny ýygnamak usuly:
Bölejikleriň arasyndaky elektrostatik süýşme, belok statik bolanda iň kiçidir, şonuň üçin çözülişi hem iň kiçidir. Dürli beloklaryň izoelektrik nokatlary dürli-dürli. Kondisioner ergininiň pH-i bir belogyň izoelektrik nokadyna ýetmek üçin ulanylyp bilner, ýöne bu usul seýrek ulanylýar we duzlamak usuly bilen birleşdirilip bilner.
3.Dializ we ultrafiltrasiýa:
Dializ dürli molekulýar ululykdaky beloklary bölmek üçin ýarym geçirijilikli membranany ulanýar. Ultrafiltrasiýa usuly suwy we beýleki ownuk erginli molekulalary ýarym geçirijilikli membranadan geçirmek üçin ýokary basyş ýa-da merkezden gaçyryş güýji ulanýar.belokmembranada galýar. Dürli molekulýar agramly beloklary saklamak üçin dürli gözenek ululyklaryny saýlap bilersiňiz.
4.Gel süzgüç usuly:
Şeýle hem ululygy aýyrmak hromatografiýasy ýa-da molekulýar elek hromatografiýasy diýilýär, bu belok garyndylaryny molekulýar ululyga görä bölmek üçin iň peýdaly usullardan biridir. Sütünde has köp ulanylýan gaplaýyş materiallary glýukoza jeli (Sephadex ged) we agarose gel (agarose gel).
5.Elektroforez:
Şol bir pH şertinde dürli molekulalar dürli molekulýar agramlary we elektrik meýdanyndaky dürli zarýadlar sebäpli bölünip bilner. Amfoliti daşaýjy hökmünde ulanýan izoelektrik toplum elektroforezine üns bermelidiris. Elektroforez wagtynda amfolit polo positiveitel elektroddan otrisatel elektroda kem-kemden goşulan pH gradiýentini emele getirýär. Belli bir zarýadly belok onuň içinde ýüzse, biri-birine ýeter. Elektrik nokadynyň pH ýagdaýy üznüksiz, bu usul dürli beloklary seljermek we taýýarlamak üçin ulanylyp bilner.
6.Ion aragatnaşyk hromatografiýasy:
ion aragatnaşyk serişdelerine kationiki aragatnaşyk serişdeleri (karboksimetil sellýuloza; CM-sellýuloza) we anion aragatnaşyk serişdeleri (dietilaminoetil sellýuloza) degişlidir. Ion aragatnaşygynyň hromatografiýa sütüninden geçende, ion aragatnaşyk agentine ters zarýadly belok, ion aragatnaşyk agentine, soň bolsa adsorbsiýa edilýär.belokpH ýa-da ion güýjüni üýtgetmek arkaly uzalýar.
7.Affinity hromatografiýasy:
Affinity hromatografiýasy beloklary bölmek üçin örän peýdaly usuldyr. Köplenç ýokary arassalygy bilen bulaşyk belok garyndysyndan arassalanmak üçin belli bir belogy aýyrmak üçin diňe bir ädim talap edýär.
Bu usul, belli bir beloklaryň ligand (Ligand) diýilýän başga bir molekula kovalent baglanyşygyna esaslanýar.
Esasy ýörelge:
beloklar dokumalarda ýa-da öýjüklerde bulaşyk garyndyda bar we öýjügiň her görnüşinde müňlerçe dürli belok bar. Şonuň üçin beloklaryň arasyndaky tapawut biohimiýanyň möhüm bölegi bolup, ýeke däldi. Ora-da taýýar usullaryň toplumy bulaşyk garylan belokdan islendik belogy aýryp biler, şonuň üçin köplenç birnäçe usul bilelikde ulanylýar.
Iş wagty: Noýabr-05-2020