กรดนิวคลีอิกแบ่งออกเป็นกรดดีออกซีไรโบนิวคลีอิก (DNA) และกรดไรโบนิวคลีอิก (RNA) ซึ่ง RNA สามารถแบ่งออกเป็นไรโบโซมอล RNA (rRNA), เมสเซนเจอร์ RNA (mRNA) และถ่ายโอน RNA (tRNA) ตามหน้าที่ต่างๆ

DNA ส่วนใหญ่กระจุกตัวอยู่ในนิวเคลียส ไมโตคอนเดรีย และคลอโรพลาสต์ ในขณะที่ RNA ส่วนใหญ่กระจายอยู่ในไซโตพลาสซึม

เนื่องจากเบสพิวรีนและเบสไพริมิดีนมีพันธะคู่ร่วมกันในกรดนิวคลีอิก กรดนิวคลีอิกจึงมีคุณลักษณะของการดูดซับรังสีอัลตราไวโอเลต การดูดกลืนแสงอัลตราไวโอเลตของเกลือโซเดียม DNA อยู่ที่ประมาณ 260 นาโนเมตร และการดูดกลืนแสงจะแสดงเป็น A260 และอยู่ที่รางการดูดกลืนแสงที่ 230 นาโนเมตร ดังนั้นจึงสามารถใช้สเปกโทรสโกปีอัลตราไวโอเลตได้ กรดนิวคลีอิกถูกกำหนดโดยเครื่องวัดความสว่างในเชิงปริมาณและเชิงคุณภาพ

กรดนิวคลีอิกคือแอมโฟไลต์ ซึ่งเทียบเท่ากับโพลีแอซิด กรดนิวคลีอิกสามารถแยกตัวออกเป็นไอออนได้โดยใช้บัฟเฟอร์ที่เป็นกลางหรือเป็นด่าง และวางไว้ในสนามไฟฟ้าเพื่อเคลื่อนไปทางขั้วบวก นี่คือหลักการของอิเล็กโทรโฟรีซิส

หลักการและข้อกำหนดในการสกัดกรดนิวคลีอิกและการทำให้บริสุทธิ์

1. ตรวจสอบความสมบูรณ์ของโครงสร้างปฐมภูมิของกรดนิวคลีอิก

2. ขจัดการปนเปื้อนของโมเลกุลอื่นๆ (เช่น ไม่รวมการรบกวน RNA เมื่อสกัด DNA)

3. ไม่ควรมีตัวทำละลายอินทรีย์และไอออนของโลหะที่มีความเข้มข้นสูงซึ่งยับยั้งเอนไซม์ในตัวอย่างกรดนิวคลีอิก

4. ลดสารโมเลกุลขนาดใหญ่ เช่น โปรตีน โพลีแซ็กคาไรด์ และลิพิด ให้มากที่สุด

วิธีการสกัดกรดนิวคลีอิกและการทำให้บริสุทธิ์

1. วิธีการสกัดฟีนอล/คลอโรฟอร์ม

มันถูกประดิษฐ์ขึ้นในปี 1956 หลังจากบำบัดของเหลวที่แตกของเซลล์หรือเนื้อเยื่อที่เป็นเนื้อเดียวกันด้วยฟีนอล/คลอโรฟอร์ม ส่วนประกอบของกรดนิวคลีอิก ซึ่งส่วนใหญ่เป็น DNA จะถูกละลายในระยะที่เป็นน้ำ ไขมันส่วนใหญ่จะอยู่ในระยะอินทรีย์ และโปรตีนจะอยู่ระหว่างทั้งสอง เฟส

2. การตกตะกอนของแอลกอฮอล์

เอทานอลสามารถกำจัดชั้นไฮเดรชั่นของกรดนิวคลีอิกและเผยให้เห็นหมู่ฟอสเฟตที่มีประจุลบ และไอออนที่มีประจุบวก เช่น NA﹢ สามารถรวมกับหมู่ฟอสเฟตเพื่อก่อตัวเป็นตะกอน

3. วิธีคอลัมน์โครมาโตกราฟี

ด้วยวัสดุดูดซับที่มีซิลิกาพิเศษ DNA สามารถดูดซับได้โดยเฉพาะ ในขณะที่ RNA และโปรตีนสามารถผ่านได้อย่างราบรื่น จากนั้นใช้เกลือสูงและ pH ต่ำเพื่อจับกรดนิวคลีอิก และชะด้วยเกลือต่ำและ pH สูงเพื่อแยกและทำให้นิวคลีอิกบริสุทธิ์ กรด.

4. วิธีด่างแคร็กด้วยความร้อน

การสกัดด้วยอัลคาไลน์ส่วนใหญ่ใช้ความแตกต่างทอพอโลยีระหว่างพลาสมิดทรงกลมแบบปิดด้วยโควาเลนต์และโครมาตินเชิงเส้นเพื่อแยกพวกมัน ภายใต้สภาวะที่เป็นด่าง โปรตีนที่ถูกทำลายจะละลายได้

5. วิธีไพโรไลซิสแบบต้ม

สารละลาย DNA ได้รับการบำบัดด้วยความร้อนเพื่อใช้ประโยชน์จากคุณสมบัติของโมเลกุล DNA เชิงเส้นเพื่อแยกชิ้นส่วน DNA ออกจากตะกอนที่เกิดจากโปรตีนที่ถูกทำลายและเศษเซลล์โดยการหมุนเหวี่ยง

6. วิธีลูกปัดนาโนแม่เหล็ก

การใช้นาโนเทคโนโลยีเพื่อปรับปรุงและปรับเปลี่ยนพื้นผิวของอนุภาคนาโนซุปเปอร์พาราแมกเนติก จึงเตรียมเม็ดบีดนาโนแม่เหล็กซุปเปอร์พาราแมกเนติกออกไซด์ เม็ดบีดแม่เหล็กสามารถจดจำและจับกับโมเลกุลกรดนิวคลีอิกบนส่วนต่อประสานด้วยกล้องจุลทรรศน์ได้อย่างมีประสิทธิภาพ การใช้คุณสมบัติซุปเปอร์พาราแมกเนติกของซิลิกานาโนสเฟียร์ ภายใต้การกระทำของเกลือ Chaotropic (guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate ฯลฯ ) และสนามแม่เหล็กภายนอก DNA และ RNA ถูกแยกออกจากเลือด เนื้อเยื่อสัตว์ อาหาร จุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรค และตัวอย่างอื่น ๆ .