న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ వెలికితీత కాలమ్ వెలికితీత పద్ధతి మరియు సూత్రం

న్యూక్లియిక్ ఆమ్లం డియోక్సిరిబోన్యూక్లియిక్ ఆమ్లం (DNA) మరియు రిబోన్యూక్లియిక్ ఆమ్లం (RNA)గా విభజించబడింది, వీటిలో RNAను రైబోసోమల్ RNA (rRNA), మెసెంజర్ RNA (mRNA)గా విభజించవచ్చు మరియు వివిధ విధుల ప్రకారం RNA (tRNA)ని బదిలీ చేయవచ్చు.

DNA ప్రధానంగా న్యూక్లియస్, మైటోకాండ్రియా మరియు క్లోరోప్లాస్ట్‌లలో కేంద్రీకృతమై ఉంటుంది, అయితే RNA ప్రధానంగా సైటోప్లాజంలో పంపిణీ చేయబడుతుంది.

న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలలో ప్యూరిన్ స్థావరాలు మరియు పిరిమిడిన్ స్థావరాలు సంయోగం చేయబడిన డబుల్ బాండ్‌లను కలిగి ఉన్నందున, న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలు అతినీలలోహిత శోషణ లక్షణాలను కలిగి ఉంటాయి. DNA సోడియం లవణాల అతినీలలోహిత శోషణ సుమారు 260nm, మరియు దాని శోషణ A260గా వ్యక్తీకరించబడుతుంది మరియు ఇది 230nm వద్ద శోషణ పతన వద్ద ఉంటుంది, కాబట్టి అతినీలలోహిత స్పెక్ట్రోస్కోపీని ఉపయోగించవచ్చు. న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలు లుమినోమీటర్ ద్వారా పరిమాణాత్మకంగా మరియు గుణాత్మకంగా నిర్ణయించబడతాయి.

న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలు ఆంఫోలైట్‌లు, ఇవి పాలియాసిడ్‌లకు సమానం. న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలు తటస్థ లేదా ఆల్కలీన్ బఫర్‌లను ఉపయోగించడం ద్వారా అయాన్‌లుగా విడదీయబడతాయి మరియు యానోడ్ వైపు కదలడానికి విద్యుత్ క్షేత్రంలో ఉంచబడతాయి. ఇది ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ సూత్రం.

న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ వెలికితీత కాలమ్ వెలికితీత పద్ధతి మరియు సూత్రం

న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ వెలికితీత మరియు శుద్దీకరణ సూత్రాలు మరియు అవసరాలు

1. న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ ప్రాథమిక నిర్మాణం యొక్క సమగ్రతను నిర్ధారించండి

2. ఇతర అణువుల కలుషితాన్ని తొలగించండి (DNAను సంగ్రహిస్తున్నప్పుడు RNA జోక్యాన్ని మినహాయించడం వంటివి)

3. న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ నమూనాలలో ఎంజైమ్‌లను నిరోధించే సేంద్రీయ ద్రావకాలు మరియు లోహ అయాన్ల అధిక సాంద్రతలు ఉండకూడదు.

4. ప్రోటీన్లు, పాలీశాకరైడ్లు మరియు లిపిడ్లు వంటి స్థూల కణ పదార్థాలను వీలైనంత వరకు తగ్గించండి

న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ వెలికితీత మరియు శుద్దీకరణ పద్ధతి

1. ఫినాల్/క్లోరోఫామ్ వెలికితీత పద్ధతి

ఇది 1956లో కనుగొనబడింది. సెల్ విరిగిన ద్రవం లేదా కణజాల సజాతీయతను ఫినాల్/క్లోరోఫామ్‌తో చికిత్స చేసిన తర్వాత, న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ భాగాలు, ప్రధానంగా DNA, సజల దశలో కరిగిపోతాయి, లిపిడ్లు ప్రధానంగా సేంద్రీయ దశలో ఉంటాయి మరియు ప్రోటీన్లు రెండింటి మధ్య ఉంటాయి. దశలు.

2. ఆల్కహాల్ అవపాతం

ఇథనాల్ న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ యొక్క ఆర్ద్రీకరణ పొరను తొలగించగలదు మరియు ప్రతికూలంగా చార్జ్ చేయబడిన ఫాస్ఫేట్ సమూహాన్ని బహిర్గతం చేస్తుంది మరియు NA﹢ వంటి ధనాత్మకంగా చార్జ్ చేయబడిన అయాన్లు ఫాస్ఫేట్ సమూహంతో కలిసి అవక్షేపాన్ని ఏర్పరుస్తాయి.

3. క్రోమాటోగ్రాఫిక్ కాలమ్ పద్ధతి

ప్రత్యేక సిలికా-ఆధారిత శోషణ పదార్థం ద్వారా, DNA ప్రత్యేకంగా శోషించబడుతుంది, అయితే RNA మరియు ప్రోటీన్లు సజావుగా గుండా వెళతాయి, ఆపై న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాన్ని బంధించడానికి అధిక ఉప్పు మరియు తక్కువ pHని ఉపయోగిస్తాయి మరియు న్యూక్లియిక్‌ను వేరు చేయడానికి మరియు శుద్ధి చేయడానికి తక్కువ ఉప్పు మరియు అధిక pHతో elute యాసిడ్.

4. థర్మల్ క్రాకింగ్ క్షార పద్ధతి

ఆల్కలీన్ వెలికితీత ప్రధానంగా సమయోజనీయంగా మూసివేయబడిన వృత్తాకార ప్లాస్మిడ్‌లు మరియు లీనియర్ క్రోమాటిన్‌ల మధ్య టోపోలాజికల్ తేడాలను వేరు చేయడానికి ఉపయోగిస్తుంది. ఆల్కలీన్ పరిస్థితులలో, డీనాట్ చేసిన ప్రోటీన్లు కరుగుతాయి.

5. మరిగే పైరోలిసిస్ పద్ధతి

డీఎన్‌ఏ సొల్యూషన్‌ను డీనాట్ చేసిన ప్రొటీన్‌లు మరియు సెల్యులార్ శిధిలాల ద్వారా సెంట్రిఫ్యూగేషన్ ద్వారా ఏర్పడిన అవక్షేపం నుండి డీఎన్‌ఏ శకలాలు వేరు చేయడానికి లీనియర్ DNA అణువుల లక్షణాల ప్రయోజనాన్ని పొందేందుకు వేడి-చికిత్స చేస్తారు.

6. నానో అయస్కాంత పూసల పద్ధతి

సూపర్ పారా అయస్కాంత నానోపార్టికల్స్ యొక్క ఉపరితలాన్ని మెరుగుపరచడానికి మరియు సవరించడానికి నానోటెక్నాలజీని ఉపయోగించి, సూపర్ పారా అయస్కాంత సిలికాన్ ఆక్సైడ్ నానో-మాగ్నెటిక్ పూసలు తయారు చేయబడతాయి. అయస్కాంత పూసలు మైక్రోస్కోపిక్ ఇంటర్‌ఫేస్‌లో న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ అణువులను ప్రత్యేకంగా గుర్తించగలవు మరియు సమర్ధవంతంగా బంధించగలవు. సిలికా నానోస్పియర్స్ యొక్క సూపర్ పారా అయస్కాంత లక్షణాలను ఉపయోగించి, చాట్రోపిక్ లవణాలు (గ్వానిడిన్ హైడ్రోక్లోరైడ్, గ్వానిడిన్ ఐసోథియోసైనేట్, మొదలైనవి) మరియు బాహ్య అయస్కాంత క్షేత్రం, DNA మరియు RNA లు రక్తం, జంతు కణజాలం, ఆహారం, వ్యాధికారక సూక్ష్మజీవులు మరియు ఇతర నమూనాల నుండి వేరుచేయబడ్డాయి.


పోస్ట్ సమయం: మార్చి-18-2022