యొక్క పద్ధతులుప్రోటీన్ శుద్దీకరణ:

ప్రోటీన్ యొక్క ప్రోటీన్ శుద్దీకరణ, వేరు మరియు శుద్దీకరణ యొక్క పద్ధతి, ప్రోటీన్ అసలు కణాలు లేదా కణజాలాల నుండి కరిగిన స్థితిలో విడుదల చేయబడుతుంది మరియు జీవసంబంధ కార్యకలాపాలను కోల్పోకుండా అసలు సహజ స్థితిలో ఉంటుంది. ఈ కారణంగా, పదార్థం జంతు మరియు కొవ్వు కణజాలాన్ని తీసివేయాలి, విత్తన పదార్థం టానిన్ల వంటి పదార్ధాల నుండి విత్తన కోటు యొక్క కలుషితాన్ని కూడా తొలగించాలి మరియు నూనె గింజలు తక్కువ ఉడకబెట్టిన సేంద్రీయ ద్రావకాన్ని ఉపయోగించాలి.

1. ప్రోటీన్ శుద్దీకరణ, పరిమాణం మరియు విభిన్న విభజన విశ్లేషణ పద్ధతులు: డయాలసిస్ మరియు అల్ట్రాఫిల్ట్రేషన్ ఈ ప్రోటీన్లను సెమీ-పారగమ్య పొర గుండా వెళ్ళలేని అణువుల స్వభావం గుండా వెళ్ళడానికి ఉపయోగిస్తాయి; సాంద్రత ప్రవణత సెంట్రిఫ్యూగేషన్ మాధ్యమంలో ప్రోటీన్ యొక్క నాణ్యత మరియు సాంద్రత కణాలపై ఎక్కువ ప్రభావం చూపుతుంది. స్థిరీకరణ వేగం వేగంగా ఉంటుంది; జెల్ ఫిల్ట్రేషన్ అనేది ఒక రకమైన కాలమ్ క్రోమాటోగ్రఫీ.

2. ఉపయోగంలో ద్రావణీయత వ్యత్యాసాన్ని వేరు చేయడం: ఎలెక్ట్రో-అవక్షేపణ ఎందుకంటే ప్రోటీన్ అణువుల నికర ఛార్జ్ సున్నా ఐసోఎలెక్ట్రిక్ పాయింట్‌లో ఉంటుంది, అణువుల మధ్య ఎలెక్ట్రోస్టాటిక్ వికర్షణను తగ్గించడం, సమగ్రపరచడం సులభం మరియు కనిష్ట ద్రావణీయత; ఉప్పు ద్రావణంతో ఉపయోగించే ఉప్పు ద్రావణం ఏకాగ్రత ప్రోటీన్ యొక్క ద్రావణీయతను పెంచుతుంది లేదా తగ్గిస్తుంది.

3. ఛార్జ్ వేర్వేరు పద్ధతుల ద్వారా వేరు చేయబడుతుంది మరియు విశ్లేషించబడుతుంది, ప్రధాన విషయాలలో ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ మరియు అయాన్ ఎక్స్ఛేంజ్ క్రోమాటోగ్రఫీ ఉన్నాయి.

4. యొక్క పద్ధతులుప్రోటీన్ శుద్దీకరణప్రొటీన్ల ఎంపిక శోషణం మరియు విభజన కణ శోషణ బలాన్ని ఉపయోగించుకుంటుంది.

5. అనుబంధ క్రోమాటోగ్రఫీ లిగాండ్‌ల విభజనపై ఆధారపడి ఉంటుంది. ఈ జీవ లక్షణం ప్రోటీన్ అణువులను లిగాండ్ అని పిలువబడే మరొక అణువుతో సమయోజనీయంగా కాకుండా ప్రత్యేకంగా బంధించడానికి అనుమతిస్తుంది.

6. ప్రొటీన్ శుద్దీకరణ విధానం: తక్కువ-ఉష్ణోగ్రత సేంద్రీయ ద్రావకం అవపాతం పద్ధతి: చాలా ప్రొటీన్‌ల ద్రావణీయత మరియు అవక్షేపణను తగ్గించడానికి మిథనాల్, ఇథనాల్ వంటి నీటిలో కలిసిపోయే సేంద్రీయ ద్రావకాలను ఉపయోగించండి. ఈ పద్ధతి రిజల్యూషన్ సాల్టింగ్ అవుట్ కంటే ఎక్కువగా ఉంటుంది, అయితే ప్రొటీన్ మరింత తగ్గుతుంది, సులభంగా ఉన్నప్పుడు, ఇది తక్కువ ఉష్ణోగ్రత వద్ద చేయాలి.

ఎలా శుద్ధి చేయాలిప్రోటీన్ శుద్దీకరణ:

ప్రొటీన్‌ను శుద్ధి చేయడం ఎలా, ప్రొటీన్ అనేది ఒక పెద్ద అణువు, మరియు అల్బుమిన్ యొక్క వివిధ పరమాణు పరిమాణాలు, ప్రోటీన్ మరియు చిన్న మాలిక్యూల్ మెటీరియల్‌లను వేరు చేయడానికి కొన్ని సరళమైన పద్ధతులు ఉన్నాయి, అలాగే ప్రోటీన్ మిశ్రమాన్ని వేరు చేస్తారు. వివిధ పరమాణు పరిమాణాల ప్రోటీన్లను వేరు చేయడానికి ప్రధాన పద్ధతులు డయాలసిస్, అల్ట్రాఫిల్ట్రేషన్, జెల్ ఫిల్ట్రేషన్ మరియు సెంట్రిఫ్యూగల్ సెపరేషన్. డయాలసిస్ మరియు అల్ట్రాఫిల్ట్రేషన్ సాధారణంగా ప్రోటీన్ వేరు పద్ధతులలో ఉపయోగిస్తారు. వేరు చేయవలసిన డయాలసిస్ మిశ్రమాన్ని సెమిపెర్మెబుల్ మెమ్బ్రేన్‌తో తయారు చేసిన డయాలసిస్ బ్యాగ్‌లో ఉంచుతారు, ఆపై వేరుచేయడానికి డయాలసిస్ ద్రావణంలో ముంచాలి. అల్ట్రాఫిల్ట్రేషన్ అనేది సెమీ-పారగమ్య పొరలో సెంట్రిఫ్యూగల్ ఫోర్స్ లేదా పీడనాన్ని ఉపయోగించి నీరు మరియు ఇతర చిన్న అణువులను పంపడం మరియు సెమీ-పారగమ్య పొరలో ప్రోటీన్‌లను ట్రాప్ చేయడం. ఈ రెండు పద్ధతులను ప్రోటీన్-ఆధారిత స్థూల అణువులు మరియు అకర్బన ఉప్పు-ఆధారిత చిన్న అణువుల నుండి వేరు చేయవచ్చు. అవి తరచుగా ఉప్పు వేయబడతాయి, ఉప్పును కరిగించే పద్ధతితో కలిపి ఉపయోగిస్తారు లేదా అకర్బన ఉప్పు ద్రావణాలను ఉపయోగించి ఉప్పు వేసిన తర్వాత ఈ రెండు పద్ధతులను తీయడానికి పరిచయం చేయవచ్చు.

1. సాల్టింగ్-అవుట్ పద్ధతి ద్వారా ప్రోటీన్‌ను ఎలా శుద్ధి చేయాలి: సాల్టింగ్-అవుట్ పద్ధతి యొక్క ఆధారం ఏమిటంటే, పలుచన ఉప్పు ద్రావణంలో ప్రోటీన్ యొక్క ద్రావణీయత ఉప్పు సాంద్రత పెరుగుదలతో పెరుగుతుంది, అయితే ఉప్పు సాంద్రత ఒక నిర్దిష్ట విలువకు పెరిగినప్పుడు, నీటి కార్యకలాపాలు పెరుగుతాయి. తగ్గుదల, ఇది క్రమంగా తటస్థీకరించబడే పరమాణు నిర్మాణ ఉపరితలం ద్వారా కొన్ని ప్రొటీన్లు చార్జ్‌లను ఉత్పత్తి చేయడానికి కారణమవుతాయి మరియు హైడ్రేషన్ మెమ్బ్రేన్ క్రమంగా నాశనమవుతుంది, ఇది చివరికి సంబంధిత ప్రోటీన్లు మరియు అణువుల సముదాయాన్ని అభివృద్ధి చేయడానికి మరియు వివిధ పరిష్కారాల నుండి అవక్షేపణకు కారణమవుతుంది.

2. సేంద్రీయ ద్రావణి అవపాతం పద్ధతి: సేంద్రీయ ద్రావకాలలో ప్రోటీన్ యొక్క ద్రావణీయతను తగ్గించడానికి రెండు కారణాలు ఉన్నాయి: డీహైడ్రేషన్‌తో ప్రోటీన్‌ను ఉప్పు ద్రావణంగా ఎలా శుద్ధి చేయాలి; రెండవది, ధ్రువ ద్రావకాలలో నీటి కంటే కర్బన ద్రావకాల యొక్క విద్యుద్వాహక స్థిరాంకం తగ్గించబడుతుంది.

3. ప్రొటీన్ అవక్షేపణ ఏజెంట్: ప్రోటీన్ అవక్షేపణ ఏజెంట్‌గా ఒక రకమైన లేదా ప్రోటీన్ అవక్షేపణలో ఒకదానిపై మాత్రమే పనిచేస్తుంది, సాధారణమైనవి ఆల్కలీన్, ప్రోటీన్, లెక్టిన్ మరియు హెవీ మెటల్స్.

4. పాలిథిలిన్ గ్లైకాల్ అవపాతం: నీటిలో కరిగే నాన్-అయానిక్ పాలిమర్‌లను ఎలా శుద్ధి చేయాలిప్రోటీన్ శుద్దీకరణ, ప్రోటీన్లను అవక్షేపించడానికి పాలిథిలిన్ గ్లైకాల్ మరియు సోడియం డెక్స్ట్రాన్ సల్ఫేట్ వంటివి.