நியூக்ளிக் அமிலம் deoxyribonucleic acid (DNA) மற்றும் ribonucleic acid (RNA) எனப் பிரிக்கப்பட்டுள்ளது, இதில் RNA ரைபோசோமால் RNA (rRNA), தூதுவர் RNA (mRNA) எனப் பிரிக்கலாம் மற்றும் வெவ்வேறு செயல்பாடுகளுக்கு ஏற்ப RNA (tRNA) பரிமாற்றம் செய்யலாம்.

டிஎன்ஏ முக்கியமாக நியூக்ளியஸ், மைட்டோகாண்ட்ரியா மற்றும் குளோரோபிளாஸ்ட்களில் குவிந்துள்ளது, ஆர்என்ஏ முக்கியமாக சைட்டோபிளாஸில் விநியோகிக்கப்படுகிறது.

நியூக்ளிக் அமிலங்களில் பியூரின் தளங்களும் பைரிமிடின் தளங்களும் இணைந்த இரட்டைப் பிணைப்புகளைக் கொண்டிருப்பதால், நியூக்ளிக் அமிலங்கள் புற ஊதா உறிஞ்சும் பண்புகளைக் கொண்டுள்ளன. DNA சோடியம் உப்புகளின் புற ஊதா உறிஞ்சுதல் சுமார் 260nm ஆகும், மேலும் அதன் உறிஞ்சுதல் A260 ஆக வெளிப்படுத்தப்படுகிறது, மேலும் இது 230nm இல் உறிஞ்சுதல் தொட்டியில் உள்ளது, எனவே புற ஊதா நிறமாலையைப் பயன்படுத்தலாம். நியூக்ளிக் அமிலங்கள் லுமினோமீட்டரால் அளவு மற்றும் தரம் தீர்மானிக்கப்படுகின்றன.

நியூக்ளிக் அமிலங்கள் ஆம்போலைட்டுகள், அவை பாலிஆசிட்களுக்கு சமமானவை. நியூக்ளிக் அமிலங்கள் நடுநிலை அல்லது அல்கலைன் பஃபர்களைப் பயன்படுத்தி அயனிகளாகப் பிரிக்கப்பட்டு, அனோடை நோக்கி நகர ஒரு மின்சார புலத்தில் வைக்கப்படும். இது எலக்ட்ரோபோரேசிஸின் கொள்கை.

நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் சுத்திகரிப்பு கொள்கைகள் மற்றும் தேவைகள்

1. நியூக்ளிக் அமிலத்தின் முதன்மைக் கட்டமைப்பின் ஒருமைப்பாட்டை உறுதி செய்தல்

2. பிற மூலக்கூறுகளின் மாசுபாட்டை நீக்குதல் (டிஎன்ஏவை பிரித்தெடுக்கும் போது ஆர்என்ஏ குறுக்கீடுகளை தவிர்த்தல் போன்றவை)

3. நியூக்ளிக் அமில மாதிரிகளில் என்சைம்களைத் தடுக்கும் கரிம கரைப்பான்கள் மற்றும் உலோக அயனிகளின் அதிக செறிவுகள் இருக்கக்கூடாது.

4. புரதங்கள், பாலிசாக்கரைடுகள் மற்றும் லிப்பிடுகள் போன்ற மேக்ரோமாலிகுலர் பொருட்களை முடிந்தவரை குறைக்கவும்

நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் சுத்திகரிப்பு முறை

1. பீனால்/குளோரோஃபார்ம் பிரித்தெடுக்கும் முறை

இது 1956 இல் கண்டுபிடிக்கப்பட்டது. செல் உடைந்த திரவம் அல்லது திசு ஹோமோஜெனேட்டை பீனால்/குளோரோஃபார்முடன் சிகிச்சை செய்த பிறகு, நியூக்ளிக் அமிலக் கூறுகள், முக்கியமாக டிஎன்ஏ, அக்வஸ் கட்டத்தில் கரைக்கப்படுகின்றன, லிப்பிடுகள் முக்கியமாக கரிம கட்டத்தில் உள்ளன, மேலும் புரதங்கள் இரண்டிற்கும் இடையே அமைந்துள்ளன. கட்டங்கள்.

2. ஆல்கஹால் மழைப்பொழிவு

எத்தனால் நியூக்ளிக் அமிலத்தின் நீரேற்றம் அடுக்கை அகற்றி, எதிர்மறையாக சார்ஜ் செய்யப்பட்ட பாஸ்பேட் குழுவை வெளிப்படுத்தலாம், மேலும் NA﹢ போன்ற நேர்மறை சார்ஜ் செய்யப்பட்ட அயனிகள் பாஸ்பேட் குழுவுடன் இணைந்து ஒரு வீழ்படிவை உருவாக்கலாம்.

3. குரோமடோகிராஃபிக் நெடுவரிசை முறை

சிறப்பு சிலிக்கா அடிப்படையிலான உறிஞ்சுதல் பொருள் மூலம், டிஎன்ஏ குறிப்பாக உறிஞ்சப்படுகிறது, அதே நேரத்தில் ஆர்என்ஏ மற்றும் புரதம் சீராக கடந்து செல்ல முடியும், பின்னர் நியூக்ளிக் அமிலத்தை பிணைக்க அதிக உப்பு மற்றும் குறைந்த pH ஐப் பயன்படுத்துகிறது, மேலும் நியூக்ளிக்கைப் பிரித்து சுத்திகரிக்க குறைந்த உப்பு மற்றும் அதிக pH ஐப் பயன்படுத்துகிறது. அமிலம்.

4. தெர்மல் கிராக்கிங் ஆல்காலி முறை

அல்கலைன் பிரித்தெடுத்தல் முக்கியமாக கோவலன்ட்லி மூடிய வட்ட பிளாஸ்மிட்கள் மற்றும் நேரியல் குரோமாடின் ஆகியவற்றுக்கு இடையே உள்ள இடவியல் வேறுபாடுகளை பிரிக்க பயன்படுத்துகிறது. கார நிலைமைகளின் கீழ், குறைக்கப்பட்ட புரதங்கள் கரையக்கூடியவை.

5. கொதிக்கும் பைரோலிசிஸ் முறை

டிஎன்ஏ கரைசல், நேரியல் டிஎன்ஏ மூலக்கூறுகளின் பண்புகளைப் பயன்படுத்தி டிஎன்ஏ துண்டுகளைப் பிரித்தெடுக்கப்பட்ட புரதங்கள் மற்றும் செல்லுலார் குப்பைகளை மையவிலக்கு மூலம் உருவாகும் படிவுகளிலிருந்து பிரிக்க வெப்ப-சிகிச்சை செய்யப்படுகிறது.

6. நானோ காந்த மணிகள் முறை

சூப்பர்பரமாக்னடிக் நானோ துகள்களின் மேற்பரப்பை மேம்படுத்தவும் மாற்றவும் நானோ தொழில்நுட்பத்தைப் பயன்படுத்தி, சூப்பர்பரமேக்னடிக் சிலிக்கான் ஆக்சைடு நானோ-காந்த மணிகள் தயாரிக்கப்படுகின்றன. காந்த மணிகள் குறிப்பாக நுண்ணிய இடைமுகத்தில் நியூக்ளிக் அமில மூலக்கூறுகளை அடையாளம் கண்டு திறமையாக பிணைக்க முடியும். சிலிக்கா நானோஸ்பியர்களின் சூப்பர்பரமாக்னடிக் பண்புகளைப் பயன்படுத்தி, சாட்ரோபிக் உப்புகள் (குவானிடைன் ஹைட்ரோகுளோரைடு, குவானைடின் ஐசோதியோசயனேட் போன்றவை) மற்றும் வெளிப்புற காந்தப்புலத்தின் செயல்பாட்டின் கீழ், டிஎன்ஏ மற்றும் ஆர்என்ஏ ஆகியவை இரத்தம், விலங்கு திசு, உணவு, நோய்க்கிருமி நுண்ணுயிரிகள் மற்றும் பிற மாதிரிகளிலிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்டன.