Njia ya utakaso ni ninimfumo wa utakaso wa protini? Ni muhimu kujua mlolongo wa DNA ya usimbaji wa protini iliyosafishwa, ili kuona seli au tishu ambazo zimeonyeshwa kupita kiasi katika jeni inayolengwa, na kubuni viasili vya jeni ili kukuza safu ya kipande cha DNA inayolengwa. Huu ndio unaoitwa upatikanaji wa vipande vya jeni lengwa.

Ujenzi wa vekta ya kujieleza: Katika vekta ya kujieleza ya prokariyoti au yukariyoti yenye sifa za kujieleza kwa jeni yenyewe, tatizo kuu la hatua hii ni kujenga plasmid na jeni la riba, na mfumo wa kujieleza. Muda wa kujieleza kwa prokaryotic ni mfupi, gharama ni ya chini, na kiasi kikubwa cha kujieleza ni kipaumbele; jeni haijaonyeshwa katika E. koli, na tatizo hutokea katika uboreshaji wa kodoni. Kwa kuzingatia shughuli bora na utakaso wa protini, watafiti walichagua kuelezea katika chachu ya Pichi. Usemi uliofanikiwa wa uboreshaji wa kodoni ni muhimu.

Ni njia gani ya utakaso wa mfumo wa utakaso wa protini:

1. Mvua.

2. Electrophoresis: Protini iliyochajiwa ni ya juu au ya chini kuliko sehemu yake ya isoelectric na inaweza kuhamishiwa kwenye elektrodi hasi au elektrodi chanya ya uwanja wa umeme katika uwanja wa umeme. Msaada wa electrophoresis ya filamu, electrophoresis, nk.

3. Dialysis: Njia inayotumia mifuko miwili ya dayalisisi kutenganisha molekuli kubwa kutoka kwa protini na viambajengo vidogo vya kikaboni vya molekuli.

4. Kromatografia: Kromatografia ya kubadilishana ion hutumia sifa za bure za protini. Chini ya pH maalum, malipo na sifa za protini ni tofauti, na zinaweza kutenganishwa na kromatografia ya kubadilishana ioni. Katika kromatografia ya kubadilishana anion, protini zilizo na nguvu hasi kidogo hutolewa kwanza. Sieves Masi, pia inajulikana kama gel filtration. Protini ndogo huingia kwenye pores na kukaa ndani yao kwa muda mrefu. Protini kubwa haziwezi kuingia kwenye pores na hutoka moja kwa moja.

5. Njia ya utakaso ni ninimfumo wa utakaso wa protini? Ultracentrifugation: Utakaso wa protini unaweza kutumika kuamua uzito wa molekuli na inaweza kutumika kama protini. Uundaji wa protini na wiani tofauti hutenganishwa.