Utenganishaji na utakaso wa protini hutumiwa sana katika utafiti na matumizi ya biokemia na ni ujuzi muhimu wa uendeshaji. Kampuni ya SCG Protein Purification System-Saipu Instrument imekusanya utenganisho mbaya na maudhui mazuri ya kutenganishaprotiniutakaso kwa kila mtu. Seli ya yukariyoti ya kawaida inaweza kuwa na maelfu ya protini tofauti, zingine ni tajiri sana na zingine zina nakala chache tu. Ili kujifunza protini fulani, ni muhimu kwanza kutakasa protini kutoka kwa protini nyingine na molekuli zisizo za protini.

Utengano mkali

Wakati dondoo la protini (wakati mwingine huchanganywa na asidi ya nucleic, polysaccharides, nk) hupatikana, seti ya mbinu zinazofaa huchaguliwa kutenganisha taka.protinikutoka kwa uchafu mwingine. Kwa ujumla, hatua hii ya utengano hutumia mbinu kama vile kuweka chumvi nje, mkusanyo wa nukta ya isoelectric na ugawaji wa viyeyusho vya kikaboni. Njia hizi zina sifa ya unyenyekevu na uwezo mkubwa wa usindikaji, ambayo inaweza kuondoa uchafu mwingi na kuzingatia ufumbuzi wa protini. Baadhi ya dondoo za protini ni kubwa kwa kiasi na hazifai kwa mkusanyiko kwa kukusanyika au kuweka chumvi nje. Unaweza kuchagua ultrafiltration, gel filtration, kufungia utupu kukausha au mbinu nyingine kwa ajili ya mkusanyiko.

Kujitenga vizuri

Baada ya ugawaji mbaya wa sampuli, kiasi kwa ujumla ni kidogo, na uchafu mwingi umeondolewa. Kwa utakaso zaidi, mbinu za kromatografia kwa ujumla hujumuisha uchujaji wa jeli, kromatografia ya kubadilishana ioni, kromatografia ya adsorption, na kromatografia ya mshikamano. Ikiwa ni lazima, unaweza pia kuchagua electrophoresis, ikiwa ni pamoja na electrophoresis ya eneo, seti ya isoelectric, nk kama mchakato wa mwisho wa utakaso. Njia inayotumika kwa utengano wa kiwango cha ugawaji kwa ujumla ni ndogo katika kupanga, lakini kwa azimio la juu.

Crystallization ni mchakato wa mwisho wa kujitenga na utakaso wa protini. Ingawa mchakato wa fuwele hauhakikishi kwamba protini lazima iwe sawa, ni wakati tu protini fulani ina faida katika suluhisho la kuunda fuwele. Mchakato wa crystallization yenyewe unaambatana na kiwango fulani cha utakaso, na recrystallization inaweza kuondoa kiasi kidogo cha protini iliyoharibika. Tangu denaturedprotinihaijawahi kupatikana wakati wa mchakato wa crystallization, crystallization ya protini sio tu ishara ya usafi, lakini pia mwongozo wenye nguvu wa kuamua kuwa bidhaa iko katika hali yake ya asili.