Asidi ya nyuklia imegawanywa katika asidi ya deoxyribonucleic (DNA) na asidi ya ribonucleic (RNA), kati ya ambayo RNA inaweza kugawanywa katika ribosomal RNA (rRNA), mjumbe RNA (mRNA) na uhamisho wa RNA (tRNA) kulingana na kazi tofauti.

DNA imejilimbikizia hasa kwenye kiini, mitochondria na kloroplast, huku RNA ikisambazwa zaidi kwenye saitoplazimu.

Kwa sababu besi za purine na besi za pyrimidine zimeunganisha vifungo viwili katika asidi ya nucleic, asidi ya nucleic ina sifa za kunyonya kwa ultraviolet. Ufyonzwaji wa urujuanimno wa chumvi za sodiamu ya DNA ni karibu 260nm, na ufyonzaji wake unaonyeshwa kama A260, na uko kwenye njia ya kunyonya kwa 230nm, kwa hivyo uchunguzi wa urujuanimno unaweza kutumika. Asidi ya nyuklia imedhamiriwa kwa kiasi na ubora na luminometer.

Asidi za nucleic ni ampholytes, ambayo ni sawa na polyacids. Asidi za nyuklia zinaweza kutenganishwa kuwa anions kwa kutumia bafa zisizo na upande au alkali, na kuwekwa kwenye uwanja wa umeme ili kuelekea anodi. Hii ndiyo kanuni ya electrophoresis.

Uchimbaji wa asidi ya nyuklia na kanuni za utakaso na mahitaji

1. Hakikisha uadilifu wa muundo wa msingi wa asidi ya nucleic

2. Kuondoa uchafuzi wa molekuli nyingine (kama vile kutojumuisha mwingiliano wa RNA wakati wa kutoa DNA)

3. Kusiwe na vimumunyisho vya kikaboni na viwango vya juu vya ioni za chuma ambazo huzuia vimeng'enya katika sampuli za asidi ya nukleic.

4. Punguza vitu vya macromolecular kama vile protini, polysaccharides na lipids iwezekanavyo.

Uchimbaji wa asidi ya nyuklia na njia ya utakaso

1. Mbinu ya uchimbaji wa Phenol/chloroform

Iligunduliwa mwaka wa 1956. Baada ya kutibu kioevu kilichovunjika cha seli au homogenate ya tishu na phenol / chloroform, vipengele vya asidi ya nucleic, hasa DNA, huyeyushwa katika awamu ya maji, lipids ni hasa katika awamu ya kikaboni, na protini ziko kati ya mbili. awamu.

2. Kunyesha kwa pombe

Ethanoli inaweza kuondoa safu ya uhaigishaji ya asidi ya nukleiki na kufichua kundi la fosfati iliyo na chaji hasi, na ayoni zenye chaji chanya kama vile NA﹢ zinaweza kuunganishwa na kundi la fosfati kutengeneza mvua.

3. Mbinu ya safu ya kromatografia

Kupitia nyenzo maalum ya silika ya adsorption, DNA inaweza kutangazwa hasa, wakati RNA na protini zinaweza kupita vizuri, na kisha kutumia chumvi nyingi na pH ya chini ili kuunganisha asidi ya nucleic, na kuondokana na chumvi kidogo na pH ya juu ili kutenganisha na kusafisha nucleic. asidi.

4. Njia ya alkali ya kupasuka kwa joto

Uchimbaji wa alkali hutumia tofauti za kitopolojia kati ya plasmidi za mviringo zilizofungwa kwa ushirikiano na kromatini ya mstari ili kuzitenganisha. Chini ya hali ya alkali, protini denatured ni mumunyifu.

5. Njia ya pyrolysis ya kuchemsha

Suluhisho la DNA hutibiwa kwa joto ili kuchukua fursa ya sifa za molekuli za DNA za mstari kutenganisha vipande vya DNA kutoka kwa mvua inayoundwa na protini zilizobadilishwa na uchafu wa seli kwa kupenyeza katikati.

6. Mbinu ya shanga za Nanomagnetic

Kwa kutumia nanoteknolojia kuboresha na kurekebisha uso wa chembechembe za superparamagnetic, shanga za nano-magnetic za oksidi ya silicon hutayarishwa. Ushanga wa sumaku unaweza kutambua na kujifunga kwa ufasaha kwa molekuli za asidi nukleiki kwenye kiolesura cha hadubini. Kutumia mali ya superparamagnetic ya nanospheres ya silika, chini ya hatua ya chumvi za Chaotropic (guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate, nk) na uwanja wa nje wa magnetic, DNA na RNA zilitengwa na damu, tishu za wanyama, chakula, microorganisms pathogenic na sampuli nyingine .