Mbinu zautakaso wa protini:

Njia ya utakaso wa protini, kujitenga na utakaso wa protini, protini hutolewa kutoka kwa seli za awali au tishu katika hali ya kufutwa na inabakia katika hali ya asili ya asili bila kupoteza shughuli za kibiolojia. Kwa sababu hii, nyenzo zinapaswa kuondoa tishu za wanyama na mafuta, nyenzo za mbegu zinapaswa hata kuondoa uchafuzi wa koti ya mbegu kutoka kwa vitu kama vile tannins, na mbegu ya mafuta inapaswa kutumia kutengenezea kwa kiwango cha chini cha kikaboni.

1. Mbinu ya utakaso wa protini, ukubwa na mbinu tofauti za uchambuzi wa utengano: dialysis na ultrafiltration hutumia protini hizi kupitia asili ya molekuli ambazo haziwezi kupita kwenye utando wa nusu-penyeza; upenyo wa upenyo wa msongamano Ubora na msongamano wa protini katika wastani utakuwa na athari kubwa kwa chembe. Kasi ya kusuluhisha ni haraka; uchujaji wa gel ni aina ya kromatografia ya safu.

2. Mgawanyo wa tofauti ya umumunyifu katika matumizi: mvua ya kielektroniki kwa sababu chaji ya wavu ya molekuli za protini iko katika hatua ya sifuri ya isoelekti, inapunguza msukumo wa kielektroniki kati ya molekuli, kujumlisha kwa urahisi, na umumunyifu wa chini zaidi; mmumunyo wa chumvi unaotumiwa na mmumunyo wa chumvi Mkusanyiko huongeza au hupunguza umumunyifu wa protini.

3. Malipo yanatenganishwa na kuchambuliwa kwa njia tofauti, yaliyomo kuu ni pamoja na electrophoresis na chromatography ya kubadilishana ion.

4. Mbinu zautakaso wa protiniUteuzi uliochaguliwa na utengano wa protini hutumia nguvu ya utangazaji wa chembe.

5. Chromatography ya mshikamano inategemea mgawanyiko wa ligands. Sifa hii ya kibayolojia huruhusu molekuli za protini kujifunga haswa badala ya kushirikiana kwa molekuli nyingine inayoitwa ligand.

6. Mbinu ya utakaso wa protini: Mbinu ya mvua ya viyeyusho vya kikaboni yenye joto la chini: Tumia vimumunyisho vya kikaboni ambavyo vinachanganyika na maji, kama vile methanoli, ethanoli, ili kupunguza umumunyifu na unyeshaji wa protini nyingi. Njia hii ni ya juu zaidi kuliko azimio la salting nje, lakini protini denatures zaidi Wakati rahisi, ni lazima kufanyika kwa joto la chini.

Jinsi ya kutakasautakaso wa protini:

Jinsi ya kusafisha protini, protini ni molekuli kubwa, na ukubwa mbalimbali wa molekuli ya albumin, kuna baadhi ya mbinu rahisi kutenganisha protini na vifaa vya molekuli ndogo, na pia kutengwa mchanganyiko wa protini. Njia kuu za kutenganisha protini za ukubwa tofauti wa molekuli ni dialysis, ultrafiltration, filtration ya gel, na utengano wa centrifugal. Dialysis na ultrafiltration hutumiwa kwa kawaida katika njia za kutenganisha protini. Mchanganyiko wa dayalisisi utakaotenganishwa huwekwa kwenye mfuko wa dayalisisi uliotengenezwa kwa utando unaopitisha maji kidogo, na kisha kutumbukizwa kwenye suluhu ya dayalisisi kwa ajili ya kutenganishwa. Kuchuja kupita kiasi ni mchakato wa kupitisha maji na molekuli nyingine ndogo kwa kutumia nguvu ya katikati au shinikizo katika utando unaopitisha nusu-penyeza na kunasa protini katika utando unaoweza kupenyeza nusu. Njia hizi mbili zinaweza kutenganishwa kutoka kwa macromolecules zenye msingi wa protini na molekuli ndogo za chumvi zisizo za kikaboni. Mara nyingi hutiwa chumvi, hutumika pamoja na njia ya kuyeyusha chumvi, au inaweza kuletwa ili kuchukua njia hizi mbili baada ya kuweka chumvi kwa kutumia miyeyusho ya chumvi isokaboni.

1. Jinsi ya kusafisha protini kwa njia ya kuweka chumvi: Msingi wa njia ya kuweka chumvi ni kwamba umumunyifu wa protini katika suluhisho la chumvi huongezeka kwa kuongezeka kwa mkusanyiko wa chumvi, lakini wakati mkusanyiko wa chumvi huongezeka hadi thamani fulani, shughuli ya maji itaongezeka. Kupungua, ambayo kwa upande wake inaweza kusababisha baadhi ya protini kutoa malipo kupitia uso wa muundo wa molekuli kupunguzwa hatua kwa hatua, na utando wa uhamishaji maji huharibiwa hatua kwa hatua, ambayo hatimaye inaweza kusababisha protini na molekuli zinazohusiana kukuza mkusanyiko na kushuka kutoka kwa suluhu tofauti.

2. Mbinu ya kunyesha kwa viyeyusho vya kikaboni: Kuna sababu mbili za kupunguza umumunyifu wa protini katika vimumunyisho vya kikaboni: jinsi ya kusafisha protini kama suluhisho la chumvi kwa upungufu wa maji mwilini; pili, mara kwa mara dielectric ya vimumunyisho vya kikaboni kuliko maji inaweza kupunguzwa Katika vimumunyisho vya polar.

3. Wakala wa udondoshaji wa protini: protini kama kiambatanisho hutenda tu kwenye aina moja au mojawapo ya mvua ya protini, ya kawaida ni alkali, protini, lectini na metali nzito.

4. Kunyesha kwa polyethilini glikoli: Jinsi ya kusafisha polima zisizo na ioni zinazoyeyushwa na maji kwa ajili yautakaso wa protini, kama vile poliethilini glikoli na salfati ya sodiamu ya deksitrani ili kuongeza kasi ya protini.