Métode tinapurifikasi protéin:

Métode purifikasi protéin, separation jeung purifikasi protéin, protéin dileupaskeun tina sél aslina atawa jaringan dina kaayaan leyur sarta tetep dina kaayaan alam aslina tanpa leungitna aktivitas biologis. Ku sabab kitu, bahanna kedah nyabut jaringan sato sareng adiposa, bahan siki malah kedah ngahapus kontaminasi tina jaket siki tina zat sapertos tanin, sareng siki minyak kedah langkung milih ngagunakeun pangleyur organik anu ngagolak.

1. Métode purifikasi protéin, ukuran jeung métode analisis separation béda: dialysis na ultrafiltration ngagunakeun protéin ieu ngaliwatan alam molekul nu teu bisa ngaliwatan mémbran semi-permeabel; dénsitas gradién centrifugation Kualitas jeung dénsitas protéin dina medium bakal boga dampak gede dina partikel. Settling speed leuwih gancang; filtration gél mangrupakeun jenis kromatografi kolom.

2. Separation of béda kaleyuran dina pamakéan: electro-présipitasi sabab muatan net molekul protéin dina nol titik isoelektrik, ngurangan repulsion éléktrostatik antara molekul, gampang pikeun agrégat, jeung kaleyuran minimum; leyuran uyah dipaké jeung larutan uyah Konsentrasi nambahan atawa ngurangan kaleyuran protéin.

3. muatan ieu dipisahkeun jeung dianalisis ku métode béda, eusi utama kaasup éléktroforésis jeung kromatografi bursa ion.

4. Métode tinapurifikasi protéinAdsorpsi selektif sareng pamisahan protéin ngagunakeun kakuatan adsorpsi partikel.

5. Afinitas kromatografi dumasar kana pamisahan ligan. Karakteristik biologis ieu ngamungkinkeun molekul protéin ngabeungkeut sacara khusus tinimbang sacara kovalén ka molekul séjén anu disebut ligan.

6. Métode purifikasi protéin: Métode présipitasi pangleyur organik suhu rendah: Anggo pangleyur organik anu larut sareng cai, sapertos métanol, étanol, pikeun ngirangan kalarutan sareng présipitasi kalolobaan protéin. Metoda ieu leuwih luhur ti resolusi salting kaluar, tapi protéin denatures leuwih Lamun gampang, eta kudu dilakukeun dina suhu low.

Kumaha ngamurnikeunpurifikasi protéin:

Kumaha ngamurnikeun protéin, protéin nyaéta molekul badag, sarta sagala rupa ukuran molekul albumin, aya sababaraha métode basajan pikeun misahkeun protéin jeung bahan molekul leutik, sarta ogé misahkeun campuran protéin. Métode utama pikeun misahkeun protéin tina ukuran molekul anu béda nyaéta dialisis, ultrafiltrasi, filtrasi gél, sareng pamisahan centrifugal. Dialisis sareng ultrafiltrasi biasana dianggo dina metode pamisahan protéin. Campuran dialisis anu bakal dipisahkeun disimpen dina kantong dialisis anu didamel tina mémbran semipermeabel, teras dilebetkeun kana larutan dialisis pikeun pamisahan. Ultrafiltration nyaéta prosés ngalirkeun cai jeung molekul leutik lianna ngagunakeun gaya centrifugal atawa tekanan dina mémbran semi-permeabel sarta trapping protéin dina mémbran semi-permeabel. Dua metode ieu tiasa dipisahkeun tina makromolekul dumasar protéin sareng molekul leutik dumasar uyah anorganik. Éta téh mindeng asin kaluar, dipaké ditéang jeung métode disolusi uyah, atawa bisa diwanohkeun pikeun nyokot kaluar dua métode ieu sanggeus salting kaluar ngagunakeun solusi uyah anorganik.

1. Kumaha ngamurnikeun protéin ku metode salting-out: Dasar metode salting-out nyaéta yén kaleyuran protéin dina leyuran uyah éncér bakal ningkat jeung ngaronjatna konsentrasi uyah, tapi lamun konsentrasi uyah naek ka nilai nu tangtu, aktivitas cai bakal ngaronjat. Turunna, anu dina gilirannana bisa ngabalukarkeun sababaraha protéin pikeun ngahasilkeun muatan ngaliwatan beungeut struktur molekul laun neutralized, sarta mémbran hidrasi laun ancur, nu antukna bisa ngabalukarkeun protéin patali jeung molekul ngamekarkeun agglomeration sarta endapanana tina solusi béda.

2. Métode présipitasi pangleyur organik: Aya dua alesan pikeun ngurangan kaleyuran protéin dina pangleyur organik: kumaha purify protéin salaku leyuran uyah jeung dehidrasi; Bréh, konstanta diéléktrik pangleyur organik ti cai bisa ngurangan Dina pangleyur polar.

3. Agén precipitating protéin: protéin salaku agén precipitating ngan meta dina hiji tipe atawa salah sahiji présipitasi protéin, leuwih umum nyaéta basa, protéin, lektin, jeung logam beurat.

4. Présipitasi poliétilén glikol: Kumaha ngamurnikeun polimér non-ionik larut cai pikeunpurifikasi protéin, kayaning poliétilén glikol jeung natrium dextran sulfat pikeun endapan protéin.