Који је метод пречишћавања система за пречишћавање протеина

Који је метод пречишћавањасистем за пречишћавање протеина? Неопходно је знати кодирајућу ДНК секвенцу пречишћеног протеина, да би се видело које ћелије или ткива су прекомерно експримиране у циљном гену и да се дизајнирају генски прајмери ​​за амплификацију арф циљног ДНК фрагмента. Ово је такозвана аквизиција фрагмената циљног гена.

Конструкција експресионог вектора: У прокариотском или еукариотском експресионом вектору са карактеристикама саме експресије добијеног гена, главни проблем овог корака је конструисање плазмида и гена од интереса и експресионог система. Време експресије прокариота је кратко, цена је ниска, а велика количина експресије је приоритет; ген није експримиран у Е. цоли, а проблем се јавља у оптимизацији кодона. Узимајући у обзир бољу активност и пречишћавање протеина, истраживачи су одлучили да експримирају у Пицхи квасцу. Успешно изражавање оптимизације кодона је важно.

19

Који је метод пречишћавања система за пречишћавање протеина:

1. Падавине.

2. Електрофореза: Наелектрисани протеин је виши или нижи од своје изоелектричне тачке и може се померити на негативну електроду или позитивну електроду електричног поља у електричном пољу. Подржава филмску електрофорезу, електрофорезу итд.

3. Дијализа: Метода која користи две врећице за дијализу за одвајање великих молекула од протеина и малих молекуларних органских једињења.

4. Хроматографија: Јоноизмењивачка хроматографија користи слободна својства протеина. Под одређеним пХ, наелектрисања и својства протеина су различита, а могу се раздвојити јоноизмењивачком хроматографијом. У ањоноизмењивачкој хроматографији, протеини са малом негативном снагом се прво елуирају. Молекуларна сита, позната и као гел филтрација. Мали протеини улазе у поре и остају у њима дуго времена. Велики протеини не могу да уђу у поре и директно излазе.

5. Који је метод пречишћавањасистем за пречишћавање протеина? Ултрацентрифугирање: Пречишћавање протеина се може користити за одређивање молекулске тежине и може се користити као протеин. Формирање протеина различите густине је одвојено.


Време поста: 21.04.2021