Одвајање и пречишћавање протеина се широко користи у биохемијском истраживању и примени и представља важну оперативну вештину. Компанија СЦГ Систем за пречишћавање протеина-Саипу Инструмент је саставила садржај сирове сепарације и финог одвајањапротеинаочишћење за свакога. Типична еукариотска ћелија може да садржи хиљаде различитих протеина, неки су веома богати, а неки садрже само неколико копија. Да би се проучио одређени протеин, потребно је прво пречистити протеин од других протеина и непротеинских молекула.

Грубо одвајање

Када се добије протеински екстракт (понекад помешан са нуклеинским киселинама, полисахаридима, итд.), бира се скуп одговарајућих метода за одвајање жељенихпротеинаод других нечистоћа. Генерално, овај корак раздвајања користи методе као што су сољење, акумулација изоелектричне тачке и фракционисање органског растварача. Ове методе се одликују једноставношћу и великим капацитетом обраде, који може уклонити многе нечистоће и концентрисати раствор протеина. Неки протеински екстракти су велике запремине и нису погодни за концентрацију акумулацијом или сољењем. Можете одабрати ултрафилтрацију, гел филтрацију, сушење у вакууму замрзавањем или друге методе концентрације.

Фино одвајање

Након грубог фракционисања узорка, запремина је углавном мала, а већина нечистоћа је уклоњена. За даље пречишћавање, хроматографске методе генерално укључују гел филтрацију, хроматографију измене јона, адсорпциону хроматографију и афинитетну хроматографију. Ако је потребно, можете изабрати и електрофорезу, укључујући зонску електрофорезу, сет изоелектричних тачака, итд. као завршни процес пречишћавања. Метода која се користи за раздвајање на нивоу подела је углавном мала у планирању, али са високом резолуцијом.

Кристализација је завршни процес одвајања и пречишћавања протеина. Иако процес кристализације не обезбеђује да протеин мора бити униформан, то је само када одређени протеин има предност у раствору да формира кристал. Сам процес кристализације је праћен одређеним степеном пречишћавања, а рекристализација може уклонити малу количину фалсификованог протеина. Пошто је денатурисанпротеинаникада није пронађен током процеса кристализације, кристализација протеина није само знак чистоће, већ и моћна смерница за утврђивање да је производ у свом природном стању.