Cila është metoda e pastrimit tësistemi i pastrimit të proteinave? Është e nevojshme të dihet sekuenca e ADN-së koduese e proteinës së pastruar, për të parë se cilat qeliza ose inde janë të mbishprehura në gjenin e synuar dhe për të hartuar primerë të gjeneve për të amplifikuar arf-në e fragmentit të ADN-së së synuar. Ky është i ashtuquajturi përvetësimi i fragmenteve të gjenit të synuar.
Ndërtimi i vektorit të shprehjes: Në vektorin e shprehjes prokariote ose eukariote me karakteristikat e vetë shprehjes së gjenit të përftuar, problemi kryesor i këtij hapi është ndërtimi i plazmidit dhe gjenit me interes dhe sistemit të shprehjes. Koha e shprehjes prokariotike është e shkurtër, kostoja është e ulët dhe një sasi e madhe shprehjeje është prioritet; gjeni nuk shprehet në E. coli dhe problemi shfaqet në optimizimin e kodonit. Duke pasur parasysh aktivitetin më të mirë dhe pastrimin e proteinës, studiuesit zgjodhën të shpreheshin në maja Pichi. Shprehja e suksesshme e optimizimit të kodonit është e rëndësishme.
Cila është metoda e pastrimit të sistemit të pastrimit të proteinave:
1. Reshjet.
2. Elektroforeza: Një proteinë e ngarkuar është më e lartë ose më e ulët se pika e saj izoelektrike dhe mund të zhvendoset në elektrodën negative ose në elektrodën pozitive të fushës elektrike në fushën elektrike. Elektroforeza mbështetëse e filmit, elektroforeza, etj.
3. Dializa: Një metodë që përdor dy thasë dializë për të ndarë molekulat e mëdha nga proteinat dhe përbërjet organike të vogla molekulare.
4. Kromatografia: Kromatografia e shkëmbimit të joneve përdor vetitë e lira të proteinave. Nën një pH specifik, ngarkesat dhe vetitë e proteinave janë të ndryshme dhe ato mund të ndahen me kromatografi të shkëmbimit të joneve. Në kromatografinë e shkëmbimit të anionit, së pari eliminohen proteinat me fuqi të ulët negative. Sitë molekulare, të njohura edhe si filtrim xhel. Proteinat e vogla hyjnë në poret dhe qëndrojnë në to për një kohë të gjatë. Proteinat e mëdha nuk mund të hyjnë në poret dhe të rrjedhin drejtpërdrejt.
5. Cila është metoda e pastrimit tësistemi i pastrimit të proteinave? Ultracentrifugimi: Pastrimi i proteinave mund të përdoret për të përcaktuar peshën molekulare dhe mund të përdoret si proteinë. Ndahet formimi i proteinave me dendësi të ndryshme.
Koha e postimit: 21 Prill 2021