Ndarja e përafërt dhe ndarja e imët e pastrimit të proteinave

Ndarja dhe pastrimi i proteinave përdoret gjerësisht në kërkimin dhe aplikimin biokimik dhe është një aftësi e rëndësishme operacionale. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument ka përpiluar ndarjen e papërpunuar dhe përmbajtjen e ndarjes së imët tëproteinapastrim për të gjithë. Një qelizë tipike eukariote mund të përmbajë mijëra proteina të ndryshme, disa janë shumë të pasura dhe disa përmbajnë vetëm disa kopje. Për të studiuar një proteinë të caktuar, është e nevojshme që së pari të pastrohet proteina nga proteinat e tjera dhe molekulat joproteinike.

19

Ndarje e trashë

Kur përftohet ekstrakti i proteinave (ndonjëherë i përzier me acide nukleike, polisaharide etj.), zgjidhet një grup metodash të përshtatshme për të ndarë atë të dëshiruar.proteinanga papastërtitë e tjera. Në përgjithësi, ky hap i ndarjes përdor metoda të tilla si kriposja, akumulimi i pikës izoelektrike dhe fraksionimi i tretësit organik. Këto metoda karakterizohen nga thjeshtësia dhe kapaciteti i madh përpunues, i cili mund të largojë shumë papastërti dhe të përqendrojë tretësirën proteinike. Disa ekstrakte proteinash janë të mëdha në vëllim dhe nuk janë të përshtatshme për t'u përqendruar me akumulim ose kripë. Ju mund të zgjidhni ultrafiltrimin, filtrimin me xhel, tharjen me vakum me ngrirje ose metoda të tjera për përqendrim.

Ndarje e imët

Pas fraksionimit të përafërt të mostrës, vëllimi është përgjithësisht i vogël dhe shumica e papastërtive janë hequr. Për pastrim të mëtejshëm, metodat e kromatografisë në përgjithësi përfshijnë filtrimin e xhelit, kromatografinë e shkëmbimit të joneve, kromatografinë e adsorbimit dhe kromatografinë e afinitetit. Nëse është e nevojshme, mund të zgjidhni edhe elektroforezën, duke përfshirë elektroforezën e zonës, grupin e pikave izoelektrike, etj. si procesi përfundimtar i pastrimit. Metoda e përdorur për ndarjen e nivelit të nënndarjes është përgjithësisht e vogël në planifikim, por me rezolucion të lartë.

Kristalizimi është procesi përfundimtar i ndarjes dhe pastrimit të proteinave. Edhe pse procesi i kristalizimit nuk siguron që proteina duhet të jetë uniforme, vetëm kur një proteinë e caktuar ka përparësi në tretësirë ​​për të formuar një kristal. Vetë procesi i kristalizimit shoqërohet me një shkallë të caktuar pastrimi, dhe rikristalizimi mund të heqë një sasi të vogël të proteinave të falsifikuara. Që nga denatyrimiproteinanuk është gjetur kurrë gjatë procesit të kristalizimit, kristalizimi i proteinave nuk është vetëm një shenjë e pastërtisë, por edhe një udhëzues i fuqishëm për të përcaktuar që produkti është në gjendjen e tij natyrale.


Koha e postimit: Nëntor-19-2020