Metodat epastrimin e proteinave:

Metoda e pastrimit të proteinave, ndarjes dhe pastrimit të proteinave, proteina lirohet nga qelizat ose indet origjinale në një gjendje të tretur dhe mbetet në gjendjen origjinale natyrore pa humbje të aktivitetit biologjik. Për këtë arsye, materiali duhet të heqë indet shtazore dhe dhjamore, materiali i farës duhet të heqë edhe ndotjen e shtresës së farës nga substanca të tilla si taninet dhe fara vajore duhet të përdorë mundësisht një tretës organik me valë të ulët.

1. Metoda e pastrimit të proteinave, madhësia dhe metodat e ndryshme të analizës së ndarjes: dializa dhe ultrafiltrimi përdorin këto proteina për të kaluar përmes natyrës së molekulave që nuk mund të kalojnë nëpër membranën gjysmë të përshkueshme; Centrifugimi i gradientit të densitetit Cilësia dhe dendësia e proteinës në mjedis do të ketë një ndikim më të madh në grimcat. Shpejtësia e vendosjes është më e shpejtë; filtrimi me xhel është një lloj kromatografie në kolonë.

2. Ndarja e ndryshimit të tretshmërisë në përdorim: elektro-precipitimi sepse ngarkesa neto e molekulave të proteinave është në pikën izoelektrike zero, duke reduktuar zmbrapsjen elektrostatike midis molekulave, të lehtë për t'u grumbulluar dhe tretshmëri minimale; tretësirë ​​kripe që përdoret me tretësirë ​​kripe Përqendrimi rrit ose ul tretshmërinë e proteinës.

3. Ngarkesa ndahet dhe analizohet me metoda të ndryshme, përmbajtja kryesore përfshin elektroforezën dhe kromatografinë e shkëmbimit të joneve.

4. Metodat epastrimin e proteinaveAdsorbimi selektiv dhe ndarja e proteinave shfrytëzon fuqinë e adsorbimit të grimcave.

5. Kromatografia e afinitetit bazohet në ndarjen e ligandëve. Kjo karakteristikë biologjike lejon që molekulat e proteinave të lidhen në mënyrë specifike dhe jo në mënyrë kovalente me një molekulë tjetër të quajtur ligand.

6. Metoda e pastrimit të proteinave: Metoda e precipitimit me tretës organik në temperaturë të ulët: Përdorni tretës organikë që janë të përzier me ujë, si metanoli, etanoli, për të reduktuar tretshmërinë dhe precipitimin e shumicës së proteinave. Kjo metodë është më e lartë se kriposja e rezolucionit, por proteina denatyrohet më shumë Kur është e lehtë, duhet bërë në temperaturë të ulët.

Si të pastrohetpastrimin e proteinave:

Si të pastrohet proteina, proteina është një molekulë e madhe, dhe madhësi të ndryshme molekulare të albuminës, ka disa metoda më të thjeshta për të ndarë proteinat dhe materialet molekulare të vogla, si dhe përzierjen e proteinave të ndara. Metodat kryesore për ndarjen e proteinave të madhësive të ndryshme molekulare janë dializa, ultrafiltrimi, filtrimi me xhel dhe ndarja centrifugale. Dializa dhe ultrafiltrimi përdoren zakonisht në metodat e ndarjes së proteinave. Përzierja e dializës që do të ndahet vendoset në një qese dialize të bërë nga një membranë gjysmë e përshkueshme dhe më pas zhytet në tretësirën e dializës për ndarje. Ultrafiltrimi është procesi i kalimit të ujit dhe molekulave të tjera të vogla duke përdorur forcën centrifugale ose presionin në një membranë gjysmë të përshkueshme dhe bllokimin e proteinave në membranën gjysmë të përshkueshme. Këto dy metoda mund të ndahen nga makromolekulat me bazë proteina dhe molekulat e vogla të bazuara në kripëra inorganike. Ato shpesh kripen, përdoren së bashku me metodën e tretjes së kripës, ose mund të futen për të hequr këto dy metoda pas kriposjes duke përdorur solucione kripe inorganike.

1. Si të pastrohet proteina me metodën e kriposjes: Baza e metodës së kriposjes është se tretshmëria e proteinës në tretësirën e kripës së holluar do të rritet me rritjen e përqendrimit të kripës, por kur përqendrimi i kripës rritet në një vlerë të caktuar, aktiviteti i ujit do të rritet. Zvogëlimi, i cili nga ana tjetër mund të shkaktojë që disa proteina të gjenerojnë ngarkesa përmes sipërfaqes së strukturës molekulare që të neutralizohet gradualisht, dhe membrana e hidratimit shkatërrohet gradualisht, gjë që përfundimisht mund të shkaktojë që proteinat dhe molekulat e lidhura të zhvillojnë grumbullim dhe të precipitojnë nga solucione të ndryshme.

2. Metoda e precipitimit të tretësit organik: Ka dy arsye për të reduktuar tretshmërinë e proteinave në tretësit organikë: si të pastrohet proteina si tretësirë ​​kripe me dehidrim; së dyti, konstanta dielektrike e tretësve organikë se uji mund të reduktohet në tretës polare.

3. Agjent precipitues i proteinave: proteina si agjent precipitues vepron vetëm në një lloj ose një të precipitimit të proteinave, të zakonshmet janë alkaline, proteina, lektina dhe metalet e rënda.

4. Reshjet e polietilen glikolit: Si të pastrohen polimerët jojonikë të tretshëm në ujë përpastrimin e proteinave, të tilla si glikol polietileni dhe sulfati i dekstranit të natriumit për të precipituar proteinat.