O le tuueseeseina ma le faʻamamaina o polotini e faʻaaogaina lautele i suʻesuʻega ma le faʻaogaina o le biochemistry ma o se tomai faʻatino taua. O se sela eukaryotic masani e mafai ona aofia ai le faitau afe o polotini eseese, o nisi e matua mauoa ma o nisi e na o ni nai kopi e aofia ai. Ina ia mafai ona suʻesuʻeina se meapolotini, e tatau ona faʻamamā muamua le polotini mai isi polotini ma molelaʻau e le o ni polotini.
1. Auala e faamasima aipolotini:
O le masima e leai sona aafiaga tele i le solubility o le polotini. E masani lava, faatasi ai ma le faateleina o le masima i lalo o le maualalo o le masima, o le solubility o le porotini e faateleina. E ta'ua lea o le masima; pe a faʻaauau le faʻateleina o le masima, O le solubility o le polotini e faʻaitiitia i tikeri eseese ma vavae ese le tasi ma le isi. O lenei mea e ta'ua o le salting out.
2. Isoelectric fa'apipi'i auala:
O le electrostatic repulsion i le va o vaega e sili ona laʻititi pe a tumau le polotini, o le mea lea o le solubility e sili ona laʻititi. E ese'ese itu ole isoelectric o polotini eseese. E mafai ona fa'aoga le pH o le vaifofo fa'amuta e o'o atu ai i le isoelectric point o se porotini Fa'aputuina, ae o lenei metotia e seasea fa'aaogaina na'o ia ma e mafai ona tu'ufa'atasia ma le salting-out method.
3. Fa'amama toto ma ultrafiltration:
O le fa'amama toto e fa'aaoga ai se pa'u semi-permeable e tu'u'ese'ese ai polotini o lapopo'a mole mole eseese. O le auala ultrafiltration e faʻaaogaina ai le maualuga o le mamafa poʻo le centrifugal malosi e faʻafefe ai le vai ma isi mole solute laiti e ui atu i totonu o se membrane semi-permeable, ae o lepolotinitumau i luga o le membrane. E mafai ona e filifilia ni pupuni eseese e fa'alavelave ai polotini o mamafa mole mole eseese.
4.Gel filtration auala:
E ta'ua fo'i le lapopo'a fa'ate'aina chromatography po'o le molecular sieve chromatography, o se tasi lea o auala sili ona aoga mo le tu'u'ese'ese o paluga polotini e tusa ai ma le tele mole. O mea e masani ona fa'aogaina i totonu ole koluma ole kulukose gel (Sephadex ged) ma le agarose gel (agarose gel).
5. Electrophoresis:
I lalo o le tulaga tutusa o le pH, e mafai ona vavaeeseina polotini eseese ona o latou mamafa mole mole eseese ma tau eseese i le eletise eletise. E taua le gauai atu i le electrophoresis seti isoelectric, lea e faʻaaogaina ai se ampholyte e fai ma ave. I le taimi o le electrophoresis, o le ampholyte e fausia ai se pH gradient faasolosolo faʻaopoopoina mai le eletise lelei i le eletise leaga. Pe a aau i totonu le polotini e iai lona tau, e oo atu le tasi i le isi. O le tulaga o le pH o le eletise e le faʻaauau, ma o lenei metotia e mafai ona faʻaaogaina e iloilo ma saunia ai polotini eseese.
6. Ion fesootaiga chromatography:
fa'afeso'ota'i feso'ota'iga ion e aofia ai so'o feso'ota'iga cationic (e pei o le carboxymethyl cellulose; CM-cellulose) ma mea fa'afeso'ota'i anionic (diethylaminoethyl cellulose). Pe a pasia le koluma chromatography fesoʻotaʻiga ion, o le polotini ma le faʻafeagai tau i le ion communication agent e adsorbed i luga o le ion communication agent, ona faʻapipiʻi lea o le adsorbed.polotinie fa'amama e ala i le suia o le pH po'o le malosi o le ionic.
7. Affinity chromatography:
Affinity chromatography o se auala sili ona aoga mo le tuueseeseina o polotini. E masani ona manaʻomia naʻo le tasi le laasaga e vavae ese ai se polotini e faʻamamāina mai se paluga palatini gaogao ma maualuga le mama.
O lenei metotia e faʻavae i luga o le faʻapitoa nai lo le faʻapipiʻiina o ni polotini i se isi mole e taʻua o le ligand (Ligand).
O le mataupu faavae:
o lo'o iai polotini i totonu o se paluga gaogao i totonu o masini po'o sela, ma o ituaiga ta'itasi o sela e iai le faitau afe o polotini eseese. O le mea lea, o le eseesega i le va o polotini o se vaega taua o le biochemistry, ma e leʻi naʻo. Po'o se seti o metotia ua saunia e mafai ona aveese so'o se ituaiga porotini mai se palatini fefiloi gaogao, o lea e tele auala e masani ona fa'aoga fa'atasi.
Taimi meli: Nov-05-2020