Metodečiščenje beljakovin:

Metoda čiščenja beljakovin, ločevanje in čiščenje beljakovin, se beljakovina sprosti iz prvotnih celic ali tkiv v raztopljenem stanju in ostane v prvotnem naravnem stanju brez izgube biološke aktivnosti. Iz tega razloga mora material odstraniti živalsko in maščobno tkivo, semenski material mora celo oluščiti kontaminacijo semenske ovojnice s snovmi, kot so tanini, oljna semena pa morajo po možnosti uporabiti organsko topilo z nizkim vreliščem.

1. Metoda čiščenja beljakovin, velikost in različne metode analize ločevanja: dializa in ultrafiltracija uporabljata te beljakovine za prehod skozi naravo molekul, ki ne morejo skozi polprepustno membrano; centrifugiranje z gradientom gostote Kakovost in gostota beljakovin v mediju bo imela večji vpliv na delce. Hitrost usedanja je hitrejša; gelska filtracija je neke vrste kolonska kromatografija.

2. Ločevanje razlike v topnosti pri uporabi: elektroobarjanje, ker je neto naboj proteinskih molekul na ničelni izoelektrični točki, kar zmanjšuje elektrostatično odbojnost med molekulami, enostavno združevanje in minimalno topnost; raztopina soli, ki se uporablja z raztopino soli Koncentracija poveča ali zmanjša topnost beljakovin.

3. Naboj se loči in analizira z različnimi metodami, glavne vsebine vključujejo elektroforezo in ionsko izmenjevalno kromatografijo.

4. Metodečiščenje beljakovinSelektivna adsorpcija in ločevanje beljakovin izkoriščata moč adsorpcije delcev.

5. Afinitetna kromatografija temelji na ločevanju ligandov. Ta biološka značilnost omogoča, da se beljakovinske molekule vežejo specifično in ne kovalentno na drugo molekulo, imenovano ligand.

6. Metoda čiščenja beljakovin: Metoda obarjanja z nizko temperaturo organskih topil: Uporabite organska topila, ki se mešajo z vodo, kot sta metanol, etanol, da zmanjšate topnost in obarjanje večine beljakovin. Ta metoda je višja od ločljivosti soljenja, vendar beljakovine bolj denaturirajo. Ko je preprosta, je treba to storiti pri nizki temperaturi.

Kako prečistitičiščenje beljakovin:

Kako očistiti beljakovine, beljakovine so velike molekule in različne velikosti molekul albumina, obstaja nekaj enostavnejših metod za ločevanje beljakovin in materialov z majhnimi molekulami, pa tudi ločene mešanice beljakovin. Glavne metode za ločevanje beljakovin različnih velikosti molekul so dializa, ultrafiltracija, gelska filtracija in centrifugalna separacija. Dializa in ultrafiltracija se pogosto uporabljata pri metodah ločevanja beljakovin. Dializno mešanico, ki jo je treba ločiti, damo v dializno vrečko iz polprepustne membrane in nato potopimo v dializno raztopino za ločitev. Ultrafiltracija je postopek prehajanja vode in drugih majhnih molekul z uporabo centrifugalne sile ali tlaka v polprepustni membrani in lovljenje beljakovin v polprepustno membrano. Ti dve metodi je mogoče ločiti od makromolekul na osnovi beljakovin in majhnih molekul na osnovi anorganske soli. Pogosto so izsoljene, uporabljene v povezavi z metodo raztapljanja soli ali pa se lahko uvedejo za odstranitev teh dveh metod po soljenju z anorganskimi solnimi raztopinami.

1. Kako očistiti beljakovine z metodo izsoljevanja: Osnova metode izsoljevanja je, da se bo topnost beljakovin v razredčeni raztopini soli povečala s povečanjem koncentracije soli, ko pa se koncentracija soli poveča na določeno vrednost, aktivnost vode se bo povečala. Zmanjšanje, kar lahko povzroči, da nekateri proteini ustvarjajo naboje skozi površino molekularne strukture, ki se postopoma nevtralizira, hidratacijska membrana pa se postopoma uniči, kar lahko sčasoma povzroči, da sorodni proteini in molekule razvijejo aglomeracijo in se oborijo iz različnih raztopin.

2. Metoda obarjanja z organskim topilom: Obstajata dva razloga za zmanjšanje topnosti beljakovin v organskih topilih: kako očistiti beljakovine kot raztopino soli z dehidracijo; drugič, dielektrična konstanta organskih topil kot voda se lahko zmanjša v polarnih topilih.

3. Sredstvo za obarjanje beljakovin: beljakovine kot sredstvo za obarjanje delujejo samo na eno vrsto obarjanja beljakovin, običajne so alkalne, beljakovine, lektin in težke kovine.

4. Obarjanje polietilen glikola: Kako očistiti vodotopne neionske polimere začiščenje beljakovin, kot sta polietilen glikol in natrijev dekstran sulfat za obarjanje beljakovin.