Separácia a čistenie proteínov sa široko používa v biochemickom výskume a aplikáciách a je dôležitou operačnou zručnosťou. Spoločnosť SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument zostavila obsah surovej separácie a jemnej separácieproteínočista pre každého. Typická eukaryotická bunka môže obsahovať tisíce rôznych proteínov, niektoré sú veľmi bohaté a niektoré obsahujú len niekoľko kópií. Aby bolo možné študovať určitý proteín, je potrebné najprv vyčistiť proteín od iných proteínov a neproteínových molekúl.

Hrubé oddelenie

Keď sa získa proteínový extrakt (niekedy zmiešaný s nukleovými kyselinami, polysacharidmi atď.), vyberie sa súbor vhodných metód na oddelenie požadovanýchproteínod iných nečistôt. Vo všeobecnosti tento krok separácie využíva metódy, ako je vysolovanie, akumulácia izoelektrického bodu a frakcionácia organickým rozpúšťadlom. Tieto metódy sa vyznačujú jednoduchosťou a veľkou spracovateľskou kapacitou, ktorá dokáže odstrániť mnohé nečistoty a koncentrovať proteínový roztok. Niektoré proteínové extrakty majú veľký objem a nie sú vhodné na zahusťovanie hromadením alebo vysolovaním. Na zahustenie si môžete zvoliť ultrafiltráciu, gélovú filtráciu, mraziace vákuové sušenie alebo iné metódy.

Jemné oddelenie

Po hrubej frakcionácii vzorky je objem vo všeobecnosti malý a väčšina nečistôt bola odstránená. Na ďalšie čistenie chromatografické metódy vo všeobecnosti zahŕňajú gélovú filtráciu, iónomeničovú chromatografiu, adsorpčnú chromatografiu a afinitnú chromatografiu. V prípade potreby si môžete ako konečný proces čistenia zvoliť aj elektroforézu vrátane zónovej elektroforézy, izoelektrického bodového setu atď. Metóda používaná na oddelenie na úrovni pododdelenia je vo všeobecnosti malá pri plánovaní, ale s vysokým rozlíšením.

Kryštalizácia je konečný proces separácie a čistenia proteínov. Hoci proces kryštalizácie nezabezpečuje, že proteín musí byť jednotný, je to len vtedy, keď má určitý proteín v roztoku výhodu, že tvorí kryštál. Samotný proces kryštalizácie je sprevádzaný určitým stupňom čistenia a rekryštalizáciou je možné odstrániť malé množstvo falšovaného proteínu. Od denaturácieproteínnebol nikdy nájdený počas procesu kryštalizácie, kryštalizácia proteínu nie je len znakom čistoty, ale aj silným vodítkom na určenie, či je produkt v prirodzenom stave.