SPE ڏهاڪن تائين، ۽ سٺو سبب آهي. جڏهن سائنسدان پنهنجن نمونن مان پس منظر جي اجزاء کي هٽائڻ چاهيندا آهن، انهن کي انهن جي دلچسپي جي مرڪب جي موجودگي ۽ مقدار کي درست ۽ صحيح طور تي طئي ڪرڻ جي صلاحيت کي گهٽائڻ کان سواء ائين ڪرڻ جي چئلينج کي منهن ڏيڻو پوندو. SPE هڪ ٽيڪنڪ آهي جنهن کي سائنسدان اڪثر استعمال ڪندا آهن انهن جا نمونا تيار ڪرڻ ۾ مدد لاءِ استعمال ٿيندڙ حساس اوزارن لاءِ مقداري تجزيي لاءِ. SPE مضبوط آهي، نموني جي قسمن جي وسيع صف لاء ڪم ڪري ٿو، ۽ نئين SPE پروڊڪٽس ۽ طريقن کي ترقي ڪرڻ جاري آهي. انهن طريقن کي ترقي ڪرڻ جي دل ۾ هڪ تعريف آهي ته جيتوڻيڪ لفظ "chromatography" ٽيڪنڪ جي نالي ۾ ظاهر نٿو ٿئي، SPE بهرحال ڪروميٽوگرافڪ علحدگيء جو هڪ روپ آهي.

SPE: خاموش ڪروماتوگرافي

هڪ پراڻي چوڻي آهي ته ”جيڪڏهن ڪو وڻ ڪنهن ٻيلي ۾ ڪري پوي ۽ ان کي ٻڌڻ لاءِ آس پاس ڪو نه هجي، ته پوءِ به آواز اٿندو آهي؟ اهو چوڻ اسان کي SPE جي ياد ڏياري ٿو. اهو چوڻ ۾ عجيب لڳي سگهي ٿو، پر جڏهن اسان SPE جي باري ۾ سوچيو ٿا، سوال اهو بڻجي ٿو ته "جيڪڏهن هڪ جداگي ٿي وڃي ٿي ۽ ان کي رڪارڊ ڪرڻ لاء ڪو به ڊيڪٽر موجود نه آهي، ڇا ڪروميگرافي واقعي ٿي چڪو آهي؟" SPE جي صورت ۾، جواب هڪ شاندار آهي "ها!" جڏهن هڪ SPE طريقي کي ترقي يا مسئلو حل ڪرڻ، اهو ياد رکڻ لاء تمام مددگار ثابت ٿي سگهي ٿو ته SPE صرف ڪروميٽوگرام کان سواء ڪروميٽوگرافي آهي. جڏهن توهان ان جي باري ۾ سوچيو ٿا، ڇا ميخائل سوٽ نه هو، جيڪو "ڪروميٽوگرافي جو پيء" جي نالي سان سڃاتو وڃي ٿو، جيڪو اڄ اسان کي "SPE" سڏين ٿا؟ جڏهن هن پنهنجي ٻوٽن جي رنگن جي مرکبن کي ڪشش ثقل کي کڻي وڃڻ جي اجازت ڏيندي، هڪ سالوينٽ ۾، گرائونڊ اپ چاڪ جي بستري ذريعي، الڳ ڪيو، ڇا اهو جديد SPE طريقي کان گهڻو مختلف آهي؟

توهان جي نموني کي سمجهڻ

جيئن ته SPE ڪروميٽوگرافڪ اصولن تي مبني آهي، هر سٺي SPE طريقي جي دل ۾ تجزياتي، ميٽرڪس، اسٽيشنري مرحلو (SPE sorbent) ۽ موبائيل مرحلو (نموني کي ڌوئڻ يا صاف ڪرڻ لاءِ استعمال ٿيندڙ محلولن) جي وچ ۾ تعلق هوندو آهي. .

توھان جي نموني جي فطرت کي سمجھڻ جيترو ممڪن آھي اھو شروع ڪرڻ لاءِ بھترين جڳھ آھي جيڪڏھن توھان کي SPE طريقو ٺاھيو يا مسئلو حل ڪرڻو آھي. طريقي جي ترقي دوران غير ضروري آزمائش ۽ غلطي کان بچڻ لاء، توهان جي تجزياتي ۽ ميٽرڪس ٻنهي جي جسماني ۽ ڪيميائي ملڪيت جي وضاحت تمام مددگار آهي. هڪ دفعو توهان پنهنجي نموني جي باري ۾ ڄاڻو ٿا، توهان انهي نموني کي مناسب SPE پراڊڪٽ سان ملائڻ لاء بهتر پوزيشن ۾ هوندا. مثال طور، هڪ ٻئي جي مقابلي ۾ تجزياتي قطبيت کي ڄاڻڻ ۽ ميٽرڪس توهان کي اهو فيصلو ڪرڻ ۾ مدد ڪري سگهي ٿو ته ڇا ميٽرڪس کان تجزيي کي الڳ ڪرڻ لاء پولارٽي استعمال ڪرڻ صحيح طريقو آهي. اهو ڄاڻڻ ته ڇا توهان جا تجزيا غير جانبدار آهن يا چارج ٿيل رياستن ۾ موجود ٿي سگهن ٿا پڻ توهان کي SPE پروڊڪٽس ڏانهن سڌو ڪرڻ ۾ مدد ڪري سگھن ٿيون جيڪي غير جانبدار، مثبت طور تي چارج ٿيل، يا منفي طور تي چارج ٿيل نسلن کي برقرار رکڻ يا ختم ڪرڻ ۾ ماهر آهن. اهي ٻه تصور پيش ڪن ٿا ٻن عام طور تي استعمال ٿيل تجزياتي ملڪيتن مان فائدو حاصل ڪرڻ لاءِ جڏهن SPE طريقن کي ترقي ڪندي ۽ SPE پروڊڪٽس کي چونڊيو وڃي. جيڪڏهن توهان انهن شرطن ۾ پنهنجا تجزيا ۽ نمايان ميٽرڪس جزا بيان ڪري سگهو ٿا، ته توهان پنهنجي SPE طريقي جي ترقيءَ لاءِ هڪ سٺي هدايت چونڊڻ جي رستي تي آهيو.

وابستگي جي ذريعي علحدگي

اهي اصول جيڪي الڳ ٿيڻ جي وضاحت ڪن ٿا جيڪي LC ڪالمن ۾ ٿين ٿا، مثال طور، SPE علحدگيءَ ۾ راند ۾ آهن. ڪنهن به ڪروميٽوگرافڪ علحدگيءَ جو بنياد هڪ اهڙو نظام قائم ڪري رهيو آهي جنهن ۾ نمونن جي اجزاء ۽ ڪالمن يا SPE ڪارٽريج ۾ موجود ٻن مرحلن، موبائيل مرحلو ۽ اسٽيشنري مرحلي جي وچ ۾ رابطي جا مختلف درجا هجن.

SPE طريقي جي ترقيءَ سان آرامده محسوس ڪرڻ جي طرف پھرين قدمن مان ھڪڙو آھي SPE علحدگيءَ ۾ استعمال ٿيندڙ ڳالھين جي ٻن سڀ کان وڌيڪ عام قسمين سان واقفيت حاصل ڪرڻ: پولارٽي ۽/يا چارج اسٽيٽ.

قطبيت

جيڪڏھن توھان پنھنجي نموني کي صاف ڪرڻ لاءِ پولارٽي استعمال ڪرڻ وارا آھيو، توھان کي پھرين انتخابن مان ھڪڙو اھو فيصلو ڪرڻو آھي ته ڪھڙو ”موڊ“ بھترين آھي. اهو بهتر آهي ته هڪ نسبتا پولر SPE وچولي سان ڪم ڪرڻ ۽ هڪ نسبتا غير پولر موبائيل مرحلو (يعني عام موڊ) يا ان جي سامهون، هڪ نسبتا غير پولر SPE وچولي سان گڏ نسبتا پولر موبائيل مرحلو سان گڏ (يعني ريورس موڊ، تنهنڪري نالو رکيو ويو آهي ڇو ته اهو سامهون آهي. شروعاتي طور تي قائم ڪيل "عام موڊ").

جئين توهان SPE پراڊڪٽس کي ڳوليندا، توهان کي معلوم ٿيندو ته SPE مرحلا پولارٽيز جي هڪ حد ۾ موجود آهن. ان کان علاوه، موبائيل مرحلو سالوينٽ جو انتخاب پڻ پولارٽيز جو هڪ وسيع سلسلو پيش ڪري ٿو، اڪثر ڪري سولوينٽس، بفرز، يا ٻين اضافو جي مرکبن جي استعمال جي ذريعي تمام گهڻو قابل اطلاق. توهان جي تجزين کي ميٽرڪس مداخلتن (يا هڪ ٻئي کان) کان الڳ ڪرڻ لاءِ استحصال ڪرڻ لاءِ اهم خصوصيت جي طور تي پولارٽي اختلافن کي استعمال ڪرڻ وقت تمام گهڻي خوبي ممڪن آهي.

بس ذهن ۾ رکو پراڻي ڪيمسٽري جي چوڻي ”جهڙوڪ ٺهڪندڙ وانگر“ جڏهن توهان غور ڪري رهيا آهيو قطبيت کي علحدگيءَ لاءِ ڊرائيور. وڌيڪ هڪ مرڪب هڪ موبائيل يا اسٽيشنري مرحلي جي polarity لاء هڪجهڙائي آهي، وڌيڪ ممڪن آهي ته ان کي وڌيڪ مضبوطي سان رابطي ۾ آهي. اسٽيشنري مرحلي سان مضبوط لاڳاپا SPE وچولي تي ڊگھي برقرار رکڻ جي ڪري ٿي. موبائيل مرحلن سان مضبوط رابطي کي گهٽ برقرار رکڻ ۽ اڳوڻو خارج ٿيڻ جي ڪري ٿي.

چارج رياست

جيڪڏهن دلچسپي جا تجزيا يا ته هميشه چارج ٿيل حالت ۾ موجود آهن يا انهن حل جي حالتن جي ڪري چارج ٿيل حالت ۾ رکڻ جي قابل آهن (مثال طور pH)، پوء انهن کي ميٽرڪس (يا هر هڪ) کان الڳ ڪرڻ جو هڪ ٻيو طاقتور ذريعو ٻيو) SPE ميڊيا جي استعمال ذريعي آهي جيڪو انهن کي پنهنجي چارج سان متوجه ڪري سگهي ٿو.

هن معاملي ۾، کلاسک electrostatic ڪشش ضابطا لاڳو. الڳ ٿيڻ جي برعڪس جيڪي قطبيت جي خاصيتن تي ڀاڙين ٿا ۽ ”لائيڪ ڊزلز لائيڪ“ تعامل جا ماڊل، چارج ٿيل رياستي لاڳاپا ”مخالف طرف متوجه“ جي اصول تي هلن ٿا. مثال طور، توهان وٽ شايد هڪ SPE وچولي هجي جنهن جي مٿاڇري تي مثبت چارج هجي. مثبت طور تي چارج ٿيل مٿاڇري کي توازن ڪرڻ لاء، عام طور تي منفي طور تي چارج ٿيل نسل (هڪ اينون) شروع ۾ پابند آهي. جيڪڏهن توهان جو منفي طور تي چارج ٿيل تجزيه سسٽم ۾ متعارف ڪرايو ويو آهي، ان ۾ شروعاتي طور تي پابند آئن کي هٽائڻ ۽ مثبت طور تي چارج ٿيل SPE سطح سان رابطو ڪرڻ جي صلاحيت آهي. اهو نتيجو SPE مرحلي تي تجزيي جي برقرار رکڻ ۾. anions جي ھن بدلجڻ کي "Anion Exchange" سڏيو ويندو آھي ۽ "Ion Exchange" SPE پروڊڪٽس جي وسيع درجي جو صرف ھڪڙو مثال آھي. هن مثال ۾، مثبت طور تي چارج ٿيل نسلن کي موبائيل مرحلي ۾ رهڻ لاءِ مضبوط ترغيب هوندي ۽ مثبت طور تي چارج ٿيل SPE سطح سان لهه وچڙ ۾ نه ايندي، تنهنڪري انهن کي برقرار نه رکيو ويندو. ۽، جيستائين SPE مٿاڇري تي ان جي آئن مٽاسٽا جي خاصيتن کان علاوه ٻيون خاصيتون نه هونديون، غير جانبدار نسلن کي به گهٽ ۾ گهٽ برقرار رکيو ويندو (جيتوڻيڪ، اهڙيون ٺهيل SPE پروڊڪٽس موجود آهن، توهان کي استعمال ڪرڻ جي اجازت ڏين ٿا آئن ايڪسچينج ۽ ريورس فيز برقرار رکڻ واري ميڪانيزم کي ساڳئي SPE وچولي ۾. ).

ذهن ۾ رکڻ لاء هڪ اهم فرق جڏهن آئن ايڪسچينج ميڪانيزم کي استعمال ڪندي تجزيي جي چارج رياست جي فطرت آهي. جيڪڏهن تجزياتي هميشه چارج ڪيو ويندو آهي، ان جي حل جي pH کان سواء، ان کي "مضبوط" نسل سمجهيو ويندو آهي. جيڪڏهن تجزيي صرف ڪجهه پي ايڇ جي حالتن جي تحت چارج ڪئي وئي آهي، اهو سمجهيو ويندو آهي "ضعيف" ذات. اھو ھڪڙو اھم خصوصيت آھي توھان جي تجزين بابت سمجھڻ لاءِ ڇاڪاڻ ته اھو طئي ڪندو ته ڪھڙي قسم جي SPE ميڊيا استعمال ڪرڻ لاءِ. عام اصطلاحن ۾، مخالفن کي گڏ ڪرڻ بابت سوچڻ هتي مدد ڪندو. اهو مشورو ڏنو ويو آهي ته هڪ ڪمزور آئن ايڪسچينج SPE سوربينٽ کي ”مضبوط“ نسل سان ۽ مضبوط آئن ايڪسچينج شربت کي ”ڪمزور“ تجزيي سان جوڙيو وڃي.