پروٽينن جي علحدگي ۽ صفائي وڏي پيماني تي بايو ڪيمسٽري تحقيق ۽ ايپليڪيشن ۾ استعمال ڪيو ويندو آهي ۽ هڪ اهم عملياتي مهارت آهي. ايس سي جي پروٽين پيوريفڪيشن سسٽم ڪمپني- سائپو انسٽرمينٽ تيار ڪيو آهي خام علحدگيءَ ۽ ٺيڪ الڳ ڪرڻ واري مواد کيپروٽينهر ڪنهن لاء صفائي. هڪ عام يوڪريوٽڪ سيل هزارين مختلف پروٽينن تي مشتمل ٿي سگهي ٿو، ڪجهه تمام امير آهن ۽ ڪجهه صرف چند نقلن تي مشتمل آهن. ڪنهن خاص پروٽين جو مطالعو ڪرڻ لاءِ، اهو ضروري آهي ته پهرين پروٽين کي ٻين پروٽينن ۽ غير پروٽينين ماليڪيولن کان پاڪ ڪيو وڃي.

سخت جدائي

جڏهن پروٽين جو نچوڙ (ڪڏهن ڪڏهن ملايو ويندو آهي نيوڪليڪ اسيد، پولي سيڪرائڊس وغيره)، ته مناسب طريقن جو هڪ سيٽ چونڊيو وڃي ٿو گهربل شين کي الڳ ڪرڻ لاءِ.پروٽينٻين نجاست کان. عام طور تي، علحدگيء جو هي مرحلو طريقن کي استعمال ڪري ٿو جهڙوڪ لوڻ ڪڍڻ، isoelectric point accumulation ۽ organic solvent fractionation. اهي طريقا سادگي ۽ وڏي پروسيسنگ جي صلاحيت سان منسوب ڪيا ويا آهن، جيڪي ڪيترن ئي تڪليف کي ختم ڪري سگهن ٿا ۽ پروٽين جي حل کي وڌايو. ڪجھ پروٽين جو نچوڙي مقدار ۾ وڏو ھوندو آھي ۽ ان کي گڏ ڪرڻ يا لوڻ جي ذريعي ڪنسنٽريشن لاءِ مناسب نه ھوندو آھي. توهان ultrafiltration، جيل فلٽريشن، منجمد ويڪيوم خشڪ ڪرڻ يا ڪنسنٽريشن لاءِ ٻيا طريقا چونڊي سگهو ٿا.

سٺي جدائي

نموني جي اڻ وڻندڙ ​​​​فرڪشن کان پوء، حجم عام طور تي ننڍڙو هوندو آهي، ۽ اڪثريت کي هٽايو ويو آهي. وڌيڪ صاف ڪرڻ لاء، ڪروميٽوگرافي طريقن ۾ عام طور تي جيل فلٽريشن، آئن ايڪسچينج ڪروميٽوگرافي، جذب ڪروماتوگرافي، ۽ لاڳاپو ڪروميٽوگرافي شامل آهن. جيڪڏهن ضروري هجي ته، توهان پڻ چونڊ ڪري سگهو ٿا اليڪٽرروفورسس، بشمول زون الیکٹروفورسس، آئسو اليڪٽرڪ پوائنٽ سيٽ، وغيره. ذيلي تقسيم سطح جي علحدگيء لاء استعمال ٿيل طريقو عام طور تي پلاننگ ۾ ننڍڙو آهي، پر اعلي قرارداد سان.

Crystallization پروٽين جي الڳ ٿيڻ ۽ صاف ڪرڻ جو آخري عمل آهي. جيتوڻيڪ ڪرسٽل ڪرڻ وارو عمل ان ڳالهه کي يقيني نه ٿو بڻائي ته پروٽين کي يونيفارم هجڻ گهرجي، اهو صرف تڏهن آهي جڏهن هڪ خاص پروٽين کي ڪرسٽل ٺاهڻ جي حل ۾ فائدو حاصل ٿئي. ڪرسٽلائزيشن جو عمل پاڻ کي صاف ڪرڻ جي هڪ خاص درجي سان گڏ هوندو آهي، ۽ ٻيهر ريسٽاللائيزيشن ٿوري مقدار ۾ ملاوٽ ٿيل پروٽين کي ختم ڪري سگهي ٿي. denatured کان وٺيپروٽينڪرسٽلائيزيشن جي عمل دوران ڪڏهن به نه مليو آهي، پروٽين جي ڪرسٽلائيزيشن نه رڳو پاڪائي جي نشاني آهي، پر هڪ طاقتور رهنمائي پڻ آهي ته اهو طئي ڪرڻ لاء ته پيداوار پنهنجي قدرتي حالت ۾ آهي.