نيوڪليڪ ايسڊ ڊي آڪسائيريبونيوڪليڪ ايسڊ (ڊي اين اي) ۽ رائبونيوڪلڪ ايسڊ (آر اين اي) ۾ ورهايل آهي، جن مان آر اين اي کي مختلف ڪمن جي مطابق رائبوسومل آر اين اي (آر آر اين اي)، ميسينجر آر اين اي (ايم آر اين اي) ۽ منتقلي آر اين اي (ٽي آر اين اي) ۾ ورهائي سگهجي ٿو.
ڊي اين اي بنيادي طور تي نيوڪليس، ميڪوڪونڊريا ۽ ڪلوروپلاسٽس ۾ مرڪوز آهي، جڏهن ته آر اين اي بنيادي طور تي cytoplasm ۾ ورهايل آهي.
ڇاڪاڻ ته purine bases ۽ pyrimidine bases nucleic acids ۾ ڊبل بانڊ جوڙيا آهن، nucleic acids ۾ الٽراوائلٽ جذب جون خاصيتون هونديون آهن. ڊي اين اي سوڊيم لوڻ جو الٽرا وائلٽ جذب 260nm جي لڳ ڀڳ آهي، ۽ ان جي جذب کي A260 طور ظاهر ڪيو ويو آهي، ۽ اهو 230nm تي جذب گرت تي آهي، تنهنڪري الٽراوائلٽ اسپيڪٽروڪوپي استعمال ڪري سگهجي ٿي. نيوڪليڪ اسيد مقداري ۽ قابليت سان ليوميومٽر ذريعي طئي ڪيا ويندا آهن.
Nucleic acids ampholytes آهن، جيڪي polyacids جي برابر آهن. نيوڪليڪ ايسڊس کي غير جانبدار يا الڪائن بفر استعمال ڪندي اينئنز ۾ ورهائي سگهجي ٿو، ۽ انوڊ ڏانهن منتقل ڪرڻ لاء هڪ برقي ميدان ۾ رکيل آهي. هي اليڪٽرروفورسس جو اصول آهي.
نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ ۽ صاف ڪرڻ جا اصول ۽ ضرورتون
1. nucleic acid بنيادي ڍانچي جي سالميت کي يقيني بڻائي
2. ٻين ماليڪيولن جي آلودگي کي ختم ڪريو (جهڙوڪ ڊي اين اي ڪڍڻ وقت آر اين اي جي مداخلت کان سواءِ)
3. ڪو به نامياتي محلول نه هجڻ گهرجي ۽ ڌاتو جي آئن جي اعلي ڪنسنٽريشن جيڪي نيوڪليڪ ايسڊ جي نمونن ۾ اينزائمز کي روڪيندا آهن.
4. ميڪروموليڪيولر مواد کي گھٽايو جيئن پروٽين، پولي سيڪرائڊس ۽ لپڊس جيترو ٿي سگھي.
نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ ۽ صاف ڪرڻ جو طريقو
1. فينول / ڪلوروفارم ڪڍڻ جو طريقو
اهو 1956 ۾ ايجاد ڪيو ويو. سيل جي ٽٽل مائع يا ٽشو هوموجنيٽ کي فينول / ڪلوروفارم سان علاج ڪرڻ کان پوء، نيوڪلڪ ايسڊ جزا، خاص طور تي ڊي اين اي، آبي مرحلي ۾ ڦهليل آهن، لپيد بنيادي طور تي نامياتي مرحلي ۾ آهن، ۽ پروٽين ٻنهي جي وچ ۾ واقع آهن. مرحلا.
2. شراب جي ورهاڱي
ايٿانول نيوڪليڪ ايسڊ جي هائيڊريشن پرت کي ختم ڪري سگهي ٿو ۽ منفي طور تي چارج ٿيل فاسفيٽ گروپ کي بي نقاب ڪري سگهي ٿو، ۽ مثبت طور تي چارج ٿيل آئنز جهڙوڪ NA﹢ فاسفيٽ گروپ سان گڏ گڏ ڪري سگھن ٿا هڪ فالج ٺاهي.
3. ڪروميٽوگرافڪ ڪالمن جو طريقو
خاص سليڪا جي بنياد تي جذب ڪرڻ واري مواد جي ذريعي، ڊي اين اي خاص طور تي جذب ڪري سگهجي ٿو، جڏهن ته آر اين اي ۽ پروٽين آسانيء سان گذري سگهن ٿا، ۽ پوء نيوڪليڪ ايسڊ کي پابند ڪرڻ لاء اعلي لوڻ ۽ گهٽ پي ايڇ استعمال ڪريو، ۽ گهٽ لوڻ ۽ اعلي پي ايڇ سان ايلٽ کي الڳ ڪرڻ ۽ نيوڪليڪ کي صاف ڪرڻ لاء. تيزاب
4. حرارتي cracking alkali طريقو
Alkaline extractions بنيادي طور covalently بند سرڪلر plasmids ۽ لڪير chromatin جي وچ ۾ topological فرق استعمال ڪري انھن کي الڳ ڪرڻ لاء. الڪائن جي حالتن ۾، رد ٿيل پروٽين حليل آهن.
5. ابلڻ pyrolysis طريقو
ڊي اين اي حل کي گرميءَ جو علاج ڪيو ويندو آهي ته جيئن لڪير واري ڊي اين اي ماليڪيولز جي خاصيتن جو فائدو وٺندي ڊي اين اي جي ٽڪڙن کي ڊينيچر ٿيل پروٽين ۽ سينٽريفيوگريشن ذريعي سيلولر ڊبرس جي ٺهندڙ ترڪيب کان الڳ ڪري سگهجي.
6. Nanomagnetic موتي جو طريقو
نانو ٽيڪنالاجي کي استعمال ڪندي سپرپيرامگنيٽڪ نانو پارٽيڪلز جي مٿاڇري کي بهتر ۽ تبديل ڪرڻ لاءِ، سپرپارمگنيٽڪ سلڪون آڪسائيڊ نانو-مقناطيسي موتي تيار ڪيا ويا آهن. مقناطيسي موتي خاص طور تي هڪ خوردبيني انٽرفيس تي نيوڪلڪ ايسڊ ماليڪيولز کي خاص طور تي سڃاڻي ۽ موثر طريقي سان پابند ڪري سگھن ٿا. سليڪا نانوسفيئرز جي سپرپارماگنيٽڪ پراپرٽيز کي استعمال ڪندي، Chaotropic نم (guanidine hydrochloride، guanidine isothiocyanate، وغيره) جي عمل هيٺ ۽ هڪ خارجي مقناطيسي ميدان، ڊي اين اي ۽ آر اين اي کي رت، جانورن جي ٽشو، کاڌي، پيٿوجينڪ مائڪروجنزم ۽ ٻين نمونن کان ڌار ڪيو ويو.
پوسٽ ٽائيم: مارچ-18-2022