جي طريقنپروٽين جي صفائي:

پروٽين کي صاف ڪرڻ، جدا ڪرڻ ۽ پروٽين کي صاف ڪرڻ جو طريقو، پروٽين اصل سيلز يا بافتن مان هڪ تحليل حالت ۾ آزاد ٿي ويندو آهي ۽ حياتياتي سرگرمي جي نقصان کان سواء اصل قدرتي حالت ۾ رهي ٿو. انهي سبب لاء، مواد کي جانورن ۽ ايڊپوز ٽشو کي ختم ڪرڻ گهرجي، ٻج جي مواد کي پڻ گهرجي ته ٻج جي کوٽ جي آلودگي کي ختم ڪرڻ گهرجي، جهڙوڪ ٽينين، ۽ تيل جي ٻج کي ترجيح طور تي گهٽ ابلندڙ نامياتي محلول استعمال ڪرڻ گهرجي.

1. پروٽين کي صاف ڪرڻ جو طريقو، سائيز ۽ مختلف علحدگيءَ جي تجزيي جا طريقا: dialysis ۽ ultrafiltration انهن پروٽينن کي ماليڪيولن جي فطرت مان گذرڻ لاءِ استعمال ڪن ٿا جيڪي نيم پارميبل جھلي مان گذري نٿا سگهن. density gradient centrifugation وچولي ۾ پروٽين جي معيار ۽ کثافت جو ذرات تي وڏو اثر پوندو. آبادي جي رفتار تيز آهي؛ جيل فلٽريشن هڪ قسم جي ڪالمن ڪروميٽوگرافي آهي.

2. استعمال ۾ solubility جي فرق جي علحدگي: electro-precipitation ڇاڪاڻ ته پروٽين جي ماليڪيولن جو خالص چارج صفر isoelectric point تي هوندو آهي، ماليڪيولن جي وچ ۾ electrostatic repulsion کي گھٽائيندي، آسانيءَ سان گڏ ڪرڻ، ۽ گھٽ ۾ گھٽ حل ڪرڻ؛ لوڻ جو حل لوڻ جي حل سان استعمال ڪيو وڃي ٿو ڪنسنٽريشن وڌائي ٿو يا گھٽائي ٿو پروٽين جي محلوليت.

3. چارج کي الڳ ڪيو ويو آهي ۽ مختلف طريقن سان تجزيو ڪيو ويو آهي، مکيه مواد شامل آهن اليڪٽرروفورسس ۽ آئن ايڪسچينج ڪروميٽگرافي.

4. جا طريقاپروٽين جي صفائيپروٽينن جي چونڊيل جذب ۽ علحدگيءَ کي ذرو جذب ڪرڻ جي قوت استعمال ڪري ٿي.

5. لاڳاپو ڪروميٽوگرافي ligands جي الڳ ٿيڻ تي ٻڌل آهي. هي حياتياتي خصوصيت پروٽين جي ماليڪيولن کي خاص طور تي پابند ڪرڻ جي اجازت ڏئي ٿي بلڪه هڪ ٻئي ماليڪيول جنهن کي ligand سڏيو وڃي ٿو.

6. پروٽين کي صاف ڪرڻ جو طريقو: گھٽ گرمي پد واري نامياتي محلولن جو ورن جو طريقو: نامياتي محلولن جو استعمال ڪريو جيڪي پاڻيءَ سان ملائي سگھن ٿا، جهڙوڪ ميٿانول، ايٿانول، گھڻائي پروٽينن جي گھلائي ۽ ورن کي گھٽائڻ لاءِ. اهو طريقو ريزوليوشن لوڻ کان وڌيڪ آهي، پر پروٽين وڌيڪ denatures جڏهن آسان، ان کي گهٽ درجه حرارت تي ڪيو وڃي.

ڪيئن صاف ڪرڻپروٽين جي صفائي:

پروٽين کي ڪيئن صاف ڪجي، پروٽين هڪ وڏو ماليڪيول آهي، ۽ البومين جي مختلف ماليڪيولر سائزن ۾، پروٽين ۽ ننڍڙن ماليڪيول جي مواد کي الڳ ڪرڻ لاءِ ڪجهه آسان طريقا آهن، ۽ پروٽين جو ميلاپ پڻ الڳ ڪيو ويو آهي. مختلف ماليڪيولر سائيز جي پروٽين کي الڳ ڪرڻ جا مکيه طريقا ڊائليسز، الٽرا فلٽريشن، جيل فلٽريشن، ۽ سينٽرفيوگل علحدگيءَ جا آهن. Dialysis ۽ ultrafiltration عام طور تي پروٽين جي الڳ ڪرڻ جي طريقن ۾ استعمال ٿيندا آهن. ڊائليسس جو مرکب جيڪو الڳ ٿيڻو آهي، ان کي هڪ نيم پارميبل جھلي مان ٺهيل هڪ ڊائليسس بيگ ۾ رکيو ويندو آهي، ۽ پوءِ الڳ ڪرڻ لاءِ ڊائليسس محلول ۾ وجھو ويندو آهي. الٽرا فلٽريشن پاڻي ۽ ٻين ننڍڙن ماليڪيولن کي گذرڻ جو عمل آهي جيڪو سينٽرفيوگل قوت يا دٻاءُ کي استعمال ڪندي نيم پارميبل جھلي ۾ ۽ پروٽينن کي نيم پارميبل جھلي ۾ ڦاسائڻ جو. انهن ٻن طريقن کي پروٽين تي ٻڌل ميڪروموليڪولس ۽ غير نامياتي لوڻ تي ٻڌل ننڍڙن ماليڪيولن کان الڳ ڪري سگهجي ٿو. اهي اڪثر ڪري لوڻ ڪڍيا ويندا آهن، لوڻ جي ڦهلائڻ واري طريقي سان استعمال ڪيو ويندو آهي، يا غير نامياتي لوڻ جي حل کي استعمال ڪندي لوڻ کان پوء انهن ٻن طريقن کي ڪڍڻ لاء متعارف ڪرايو ويندو آهي.

1. لوڻ ڪڍڻ واري طريقي سان پروٽين کي ڪيئن صاف ڪجي: لوڻ ڪڍڻ واري طريقي جو بنياد اهو آهي ته لوڻ جي ٺهڪندڙ حل ۾ پروٽين جي محلوليت وڌندي ويندي آهي، پر جڏهن لوڻ جو مقدار هڪ خاص قدر تائين وڌي ويندو آهي، پاڻي جي سرگرمي کي وڌايو ويندو. گھٽتائي، جنهن جي نتيجي ۾ ڪجهه پروٽينن کي ماليڪيولر ڍانچي جي مٿاڇري ذريعي چارجز پيدا ڪرڻ جو سبب بڻائيندو آهي، بتدريج غير جانبدار ٿيڻ لاء، ۽ هائيڊريشن جھلي بتدريج تباهه ٿي ويندي آهي، جيڪو آخرڪار لاڳاپيل پروٽين ۽ ماليڪيولن کي گڏ ڪرڻ ۽ مختلف حلن مان تيز ٿيڻ جو سبب بڻائيندو.

2. نامياتي محلولن جي ورهاڱي جو طريقو: نامياتي محلولن ۾ پروٽين جي محلوليت کي گھٽائڻ جا ٻه سبب آهن: پروٽين کي ڪيئن صاف ڪجي جيئن لوڻ جي حل سان ڊيهائيڊريشن؛ ٻيو ته، پاڻي جي ڀيٽ ۾ نامياتي محلولن جي ڊائليڪٽرڪ تسلسل کي پولر سولوينٽس ۾ گھٽائي سگهجي ٿو.

3. پروٽين ورهائيندڙ ايجنٽ: پروٽين صرف هڪ قسم يا پروٽين جي ورهاڱي جي هڪ قسم تي عمل ڪري ٿو، عام طور تي الڪائن، پروٽين، ليڪٽين ۽ ڳري ڌاتو آهن.

4. Polyethylene glycol ورن: پاڻي ۾ حل ٿيندڙ غير آئنڪ پوليمر کي ڪيئن صاف ڪجيپروٽين جي صفائي, جيئن ته polyethylene glycol ۽ sodium dextran sulfate پروٽين کي ترسائڻ لاء.