Методы и очистка очистки белков

Методыочистка белка:

Метод очистки белка, разделение и очистка белка, при котором белок высвобождается из исходных клеток или тканей в растворенном состоянии и остается в исходном природном состоянии без потери биологической активности. По этой причине в материале следует удалять животную и жировую ткань, семенной материал должен даже очищать от загрязнений семенной оболочки такими веществами, как дубильные вещества, а для масличных семян желательно использовать низкокипящий органический растворитель.

1. Метод очистки белков, размер и различные методы анализа разделения: диализ и ультрафильтрация используют эти белки для прохождения через природу молекул, которые не могут пройти через полупроницаемую мембрану; Центрифугирование в градиенте плотности Качество и плотность белка в среде оказывают большее влияние на частицы. Скорость урегулирования быстрее; Гель-фильтрация – это разновидность колоночной хроматографии.

2. Разделение разницы в растворимости при использовании: электроосаждение, поскольку чистый заряд молекул белка находится в нулевой изоэлектрической точке, что снижает электростатическое отталкивание между молекулами, легко агрегирует и обеспечивает минимальную растворимость; солевой раствор, используемый с солевым раствором. Концентрация увеличивает или уменьшает растворимость белка.

3. Заряд отделяется и анализируется различными методами, основное содержание включает электрофорез и ионообменную хроматографию.

4. Методыочистка белкаСелективная адсорбция и разделение белков используют силу адсорбции частиц.

5. Аффинная хроматография основана на разделении лигандов. Эта биологическая характеристика позволяет молекулам белка связываться специфически, а не ковалентно с другой молекулой, называемой лигандом.

6. Метод очистки белка: метод осаждения низкотемпературным органическим растворителем: используйте органические растворители, смешивающиеся с водой, такие как метанол, этанол, чтобы уменьшить растворимость и осаждение большинства белков. Этот метод выше, чем разрешение высаливания, но белок денатурирует сильнее. При простоте это следует делать при низкой температуре.

6ca4b93f5

Как очиститьочистка белка:

Как очистить белок, белок представляет собой большую молекулу и альбумин различных размеров, существует несколько более простых методов разделения белка и низкомолекулярных материалов, а также разделения белковой смеси. Основными методами разделения белков разного размера молекул являются диализ, ультрафильтрация, гель-фильтрация и центрифугирование. В методах разделения белков обычно используются диализ и ультрафильтрация. Подлежащую разделению диализную смесь помещают в диализный мешок, изготовленный из полупроницаемой мембраны, а затем погружают в диализный раствор для разделения. Ультрафильтрация — это процесс пропускания воды и других небольших молекул с использованием центробежной силы или давления через полупроницаемую мембрану и улавливания белков полупроницаемой мембраной. Эти два метода можно отделить от макромолекул на основе белков и малых молекул на основе неорганических солей. Их часто высаливают, используют в сочетании с методом растворения солей или могут вводить для устранения этих двух методов после высаливания с использованием растворов неорганических солей.

1. Как очистить белок методом высаливания: В основе метода высаливания лежит то, что растворимость белка в разбавленном растворе соли увеличивается с увеличением концентрации соли, но когда концентрация соли увеличивается до определенного значения, растворимость белка в разбавленном растворе соли увеличивается. Активность воды увеличится. Снижение, что, в свою очередь, может привести к тому, что некоторые белки генерируют заряды через поверхность молекулярной структуры, которые постепенно нейтрализуются, а гидратная мембрана постепенно разрушается, что в конечном итоге может привести к тому, что родственные белки и молекулы начнут агломерироваться и осаждаться из разных растворов.

2. Метод осаждения органическим растворителем. Существует две причины снижения растворимости белка в органических растворителях: как очистить белок в виде солевого раствора с помощью обезвоживания; во-вторых, диэлектрическая проницаемость органических растворителей может быть меньше воды, чем у полярных растворителей.

3. Агент, осаждающий белок: белок как осаждающий агент действует только на один или один тип осаждения белка, распространенными являются щелочные, белковые, лектиновые и тяжелые металлы.

4. Осаждение полиэтиленгликолем: как очистить водорастворимые неионогенные полимеры дляочистка белка, такие как полиэтиленгликоль и декстрансульфат натрия, для осаждения белков.


Время публикации: 27 октября 2020 г.