Separação grosseira e separação fina de purificação de proteínas

A separação e purificação de proteínas é amplamente utilizada em pesquisas e aplicações bioquímicas e é uma habilidade operacional importante. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument compilou a separação bruta e o conteúdo de separação fina deproteínapurificação para todos. Uma célula eucariótica típica pode conter milhares de proteínas diferentes, algumas são muito ricas e outras contêm apenas algumas cópias. Para estudar uma determinada proteína, é necessário primeiro purificar a proteína de outras proteínas e moléculas não proteicas.

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Separação grosseira

Quando o extrato proteico (às vezes misturado com ácidos nucleicos, polissacarídeos, etc.) é obtido, um conjunto de métodos apropriados é selecionado para separar o extrato desejado.proteínade outras impurezas. Geralmente, esta etapa de separação utiliza métodos como salga, acumulação de ponto isoelétrico e fracionamento com solvente orgânico. Esses métodos são caracterizados pela simplicidade e grande capacidade de processamento, podendo remover muitas impurezas e concentrar a solução proteica. Alguns extratos proteicos são grandes em volume e não são adequados para concentração por acumulação ou salga. Você pode escolher ultrafiltração, filtração em gel, secagem por congelamento a vácuo ou outros métodos de concentração.

Separação fina

Após o fracionamento bruto da amostra, o volume é geralmente pequeno e a maioria das impurezas foi removida. Para purificação adicional, os métodos de cromatografia geralmente incluem filtração em gel, cromatografia de troca iônica, cromatografia de adsorção e cromatografia de afinidade. Se necessário, você também pode escolher a eletroforese, incluindo eletroforese de zona, conjunto de pontos isoelétricos, etc. como processo de purificação final. O método utilizado para separação de níveis de subdivisão é geralmente pequeno no planejamento, mas com alta resolução.

A cristalização é o processo final de separação e purificação de proteínas. Embora o processo de cristalização não garanta que a proteína seja uniforme, é somente quando uma determinada proteína tem vantagem na solução para formar um cristal. O próprio processo de cristalização é acompanhado por um certo grau de purificação, e a recristalização pode remover uma pequena quantidade de proteína adulterada. Desde desnaturadoproteínanunca foi encontrado durante o processo de cristalização, a cristalização de proteínas não é apenas um sinal de pureza, mas também uma diretriz poderosa para determinar se o produto está em seu estado natural.


Horário da postagem: 19 de novembro de 2020