د پروټینونو جلا کول او پاکول په پراخه کچه د بایو کیمیا تحقیق او غوښتنلیک کې کارول کیږي او یو مهم عملیاتي مهارت دی. یو عادي یوکریوټیک حجره کولی شي په زرګونو مختلف پروټینونه ولري، ځینې یې خورا بډایه دي او ځینې یې یوازې یو څو کاپي لري. د یوې ټاکلې مطالعې لپارهپروټیندا اړینه ده چې لومړی پروټین د نورو پروټینونو او غیر پروټین مالیکولونو څخه پاک کړئ.

1. د مالګې اچولو طریقهپروټین:

غیر جانبدار مالګه د پروټین په محلولیت کې د پام وړ اغیزه لري. عموما، د مالګې د کم غلظت لاندې د مالګې د غلظت په زیاتوالي سره، د پروټین محلول زیاتیږي. دې ته مالګه ویل کیږي؛ کله چې د مالګې غلظت دوام ومومي، د پروټین محلول په مختلفو درجو کې کمیږي او یو له بل وروسته جلا کیږي. دې پدیدې ته د مالګې اچولو په نوم یادیږي.

2. د Isoelectric point stacking طریقه:

د ذراتو تر منځ د الکتروسټاتیک تکرار تر ټولو کوچنی دی کله چې پروټین جامد وي، نو محلولیت هم ترټولو کوچنی دی. د مختلفو پروټینونو isoelectric points مختلف دي. د کنډیشن محلول pH د پروټین اسو الیکټریک نقطې ته د رسیدو لپاره کارول کیدی شي دا راټول کړي ، مګر دا میتود په ندرت سره یوازې کارول کیږي او د مالګې کولو میتود سره یوځای کیدی شي.

3. ډیالیزیز او الټرا فلټریشن:

Dialysis د مختلف مالیکولر اندازې پروټینونو جلا کولو لپاره نیمه وړ وړ جھلی کاروي. د الټرا فلټریشن طریقه د لوړ فشار یا سینټرفیوګال ځواک څخه کار اخلي ترڅو اوبه او نور کوچني محلول مالیکولونه د نیمه وړ وړ غشا څخه تیریږي، پداسې حال کې چېپروټینپه غشا کې پاتې کیږي. تاسو کولی شئ د مختلف مالیکولر وزنونو پروټینونو د مینځلو لپاره مختلف سور اندازې غوره کړئ.

4. د جیل فلټر کولو طریقه:

د اندازې جلا کولو کروماتګرافي یا مالیکولر سیو کروماتګرافي هم ویل کیږي ، دا د مالیکولر اندازې سره سم د پروټین مخلوط جلا کولو لپاره یو له خورا ګټور میتودونو څخه دی. په کالم کې ډیر عام کارول شوي بسته بندي توکي د ګلوکوز جیل (Sephadex ged) او agarose gel (agarose gel) دي.

5. الکتروفورسیس:

د ورته pH حالت لاندې، مختلف پروټینونه د مختلف مالیکولر وزنونو او په بریښنایی ساحه کې د مختلف چارجونو له امله جلا کیدی شي. دا د isoelectric set electrophoresis ته د پاملرنې ارزښت لري ، کوم چې د کیریر په توګه امفولیټ کاروي. د الکتروفورسیس په جریان کې، امفولیټ د pH تدریجي بڼه جوړوي په تدریجي ډول د مثبت الکترود څخه منفي الکترود ته اضافه کیږي. کله چې پروټین د یو ټاکلي چارج سره په دې کې تیریږي، دا به یو بل ته ورسیږي. د بریښنایی نقطې pH موقعیت متقابل دی ، او دا میتود د مختلف پروټینونو تحلیل او چمتو کولو لپاره کارول کیدی شي.

6. د آیون ارتباطي کروماتګرافي:

د ion مخابراتي اجنټانو کې د cationic مخابراتو اجنټان (لکه carboxymethyl cellulose؛ CM-cellulose) او anionic مخابراتي اجنټان (diethylaminoethyl cellulose) شامل دي. کله چې د آیون ارتباطي کروماتګرافي کالم څخه تیریږي، پروټین د ایون ارتباطي اجنټ ته د مخالف چارج سره د آیون ارتباط اجنټ کې جذب کیږي، او بیا جذب کیږي.پروټیند pH یا ionic ځواک په بدلولو سره جلا کیږي.

7. عاطفي کروماتګرافي:

د پروتینونو د جلا کولو لپاره د عاطفي کروماتګرافي خورا ګټور میتود دی. دا ډیری وختونه یوازې یو ګام ته اړتیا لري ترڅو یو مشخص پروټین جلا کړي ترڅو د لوړ پاکوالي سره د خندا پروټین مخلوط څخه پاک شي.

دا طريقه د ځانګړو پروټينونو د يو بل ماليکول سره چې د ligand (Ligand) په نوم ياديږي د کوونالينټ پابندۍ پر بنسټ ولاړه ده.

اساسي اصول:

پروټینونه په نسجونو یا حجرو کې په ګډوډ مخلوط کې شتون لري، او هر ډول حجره په زرګونو مختلف پروټینونه لري. له همدې امله، د پروټینونو ترمنځ توپیر د بایو کیمیا یوه مهمه برخه ده، او دا یوازې نه وه. یا د چمتو شوي میتودونو سیټ کولی شي د ګډوډ مخلوط پروټین څخه هر ډول پروټین لرې کړي ، نو ډیری میتودونه اکثرا په ترکیب کې کارول کیږي.