Rozdzielanie i oczyszczanie białek jest szeroko stosowane w badaniach i zastosowaniach biochemicznych i stanowi ważną umiejętność operacyjną. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument zebrało zawartość surowego oddzielania i drobnego oddzielaniabiałkooczyszczenie dla wszystkich. Typowa komórka eukariotyczna może zawierać tysiące różnych białek, niektóre są bardzo bogate, a inne zawierają tylko kilka kopii. Aby zbadać określone białko, konieczne jest najpierw oczyszczenie białka z innych białek i cząsteczek niebiałkowych.

Zgrubna separacja

Po otrzymaniu ekstraktu białkowego (czasami zmieszanego z kwasami nukleinowymi, polisacharydami itp.) dobiera się zestaw odpowiednich metod w celu oddzielenia pożądanegobiałkood innych zanieczyszczeń. Ogólnie rzecz biorąc, na tym etapie rozdzielania wykorzystuje się takie metody, jak wysalanie, akumulacja punktu izoelektrycznego i frakcjonowanie rozpuszczalnikiem organicznym. Metody te charakteryzują się prostotą i dużymi możliwościami przetwórczymi, dzięki którym można usunąć wiele zanieczyszczeń i zagęścić roztwór białka. Niektóre ekstrakty białkowe mają dużą objętość i nie nadają się do zagęszczania poprzez akumulację lub wysalanie. Można wybrać ultrafiltrację, filtrację żelową, suszenie próżniowe z zamrażaniem lub inne metody zatężania.

Dobra separacja

Po zgrubnym frakcjonowaniu próbki objętość jest na ogół niewielka, a większość zanieczyszczeń została usunięta. Do dalszego oczyszczania metody chromatograficzne obejmują na ogół filtrację żelową, chromatografię jonowymienną, chromatografię adsorpcyjną i chromatografię powinowactwa. W razie potrzeby jako końcowy proces oczyszczania można wybrać także elektroforezę obejmującą elektroforezę strefową, ustawienie punktu izoelektrycznego itp. Metoda stosowana do separacji poziomów podziału jest na ogół niewielka w planowaniu, ale charakteryzuje się dużą rozdzielczością.

Krystalizacja to końcowy proces oddzielania i oczyszczania białek. Chociaż proces krystalizacji nie zapewnia jednorodności białka, kryształ tworzy się tylko wtedy, gdy określone białko ma przewagę w roztworze. Samemu procesowi krystalizacji towarzyszy pewien stopień oczyszczenia, a rekrystalizacja może usunąć niewielką ilość zafałszowanego białka. Od denaturatubiałkonigdy nie stwierdzono podczas procesu krystalizacji, krystalizacja białka jest nie tylko oznaką czystości, ale także potężną wskazówką pozwalającą określić, czy produkt jest w swoim naturalnym stanie.