Rozdzielanie i oczyszczanie białek jest szeroko stosowane w badaniach i zastosowaniach biochemicznych i stanowi ważną umiejętność operacyjną. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument zebrało zawartość surowego oddzielania i drobnego oddzielaniabiałkooczyszczenie dla wszystkich. Typowa komórka eukariotyczna może zawierać tysiące różnych białek, niektóre są bardzo bogate, a inne zawierają tylko kilka kopii. Aby zbadać określone białko, konieczne jest najpierw oczyszczenie białka z innych białek i cząsteczek niebiałkowych.

Zgrubna separacja

Po otrzymaniu ekstraktu białkowego (czasami zmieszanego z kwasami nukleinowymi, polisacharydami itp.) dobiera się zestaw odpowiednich metod w celu oddzielenia pożądanegobiałkood innych zanieczyszczeń. Ogólnie rzecz biorąc, na tym etapie rozdzielania wykorzystuje się takie metody, jak wysalanie, akumulacja punktu izoelektrycznego i frakcjonowanie rozpuszczalnikiem organicznym. Metody te charakteryzują się prostotą i dużymi możliwościami przetwórczymi, dzięki którym można usunąć wiele zanieczyszczeń i zagęścić roztwór białka. Niektóre ekstrakty białkowe mają dużą objętość i nie nadają się do zagęszczania poprzez akumulację lub wysalanie. Można wybrać ultrafiltrację, filtrację żelową, suszenie próżniowe z zamrażaniem lub inne metody zatężania.

Dobra separacja

Po zgrubnym frakcjonowaniu próbki objętość jest na ogół niewielka, a większość zanieczyszczeń została usunięta. Do dalszego oczyszczania metody chromatograficzne obejmują na ogół filtrację żelową, chromatografię jonowymienną, chromatografię adsorpcyjną i chromatografię powinowactwa. W razie potrzeby jako końcowy proces oczyszczania można wybrać także elektroforezę obejmującą elektroforezę strefową, ustawienie punktu izoelektrycznego itp. Metoda stosowana do separacji poziomów podziału jest na ogół niewielka w planowaniu, ale charakteryzuje się dużą rozdzielczością.

Krystalizacja to końcowy proces oddzielania i oczyszczania białek. Chociaż proces krystalizacji nie zapewnia jednorodności białka, kryształ tworzy się tylko wtedy, gdy określone białko ma przewagę w roztworze. Samemu procesowi krystalizacji towarzyszy pewien stopień oczyszczenia, a rekrystalizacja może usunąć niewielką ilość zafałszowanego białka. Od denaturatubiałkonigdy nie została odkryta podczas procesu krystalizacji, krystalizacja białka jest nie tylko oznaką czystości, ale także potężną wskazówką pozwalającą określić, czy produkt jest w swoim naturalnym stanie.