Metodyoczyszczanie białek:

Metoda oczyszczania białek, separacji i oczyszczania białek, białko jest uwalniane z pierwotnych komórek lub tkanek w stanie rozpuszczonym i pozostaje w pierwotnym stanie naturalnym bez utraty aktywności biologicznej. Z tego powodu w materiale należy usunąć tkankę zwierzęcą i tłuszczową, w materiale siewnym nawet złuszczać zanieczyszczenia okrywy nasiennej substancjami takimi jak garbniki, a w przypadku nasion oleistych najlepiej zastosować niskowrzący rozpuszczalnik organiczny.

1. Metoda oczyszczania białek, wielkość i różne metody analizy separacji: dializa i ultrafiltracja wykorzystują te białka do przejścia przez naturę cząsteczek, które nie mogą przejść przez błonę półprzepuszczalną; wirowanie w gradiencie gęstości Jakość i gęstość białka w pożywce będzie miała większy wpływ na cząstki. Prędkość osadzania jest większa; Filtracja żelowa jest rodzajem chromatografii kolumnowej.

2. Oddzielenie różnicy rozpuszczalności w zastosowaniu: elektrostrącanie, ponieważ ładunek netto cząsteczek białka ma zerowy punkt izoelektryczny, co zmniejsza odpychanie elektrostatyczne między cząsteczkami, ułatwia agregację i minimalną rozpuszczalność; roztwór soli stosowany z roztworem soli Stężenie zwiększa lub zmniejsza rozpuszczalność białka.

3. Ładunek oddziela się i analizuje różnymi metodami, główne zajęcia obejmują elektroforezę i chromatografię jonowymienną.

4. Metodyoczyszczanie białekSelektywna adsorpcja i separacja białek wykorzystuje siłę adsorpcji cząstek.

5. Chromatografia powinowactwa opiera się na rozdziale ligandów. Ta cecha biologiczna pozwala cząsteczkom białka wiązać się specyficznie, a nie kowalencyjnie z inną cząsteczką zwaną ligandem.

6. Metoda oczyszczania białek: Metoda wytrącania rozpuszczalnikami organicznymi w niskiej temperaturze: Należy stosować rozpuszczalniki organiczne mieszające się z wodą, takie jak metanol, etanol, w celu zmniejszenia rozpuszczalności i wytrącania większości białek. Ta metoda jest wyższa niż rozdzielczość wysalania, ale białko ulega większej denaturacji. Jeśli jest to łatwe, należy to robić w niskiej temperaturze.

Jak oczyścićoczyszczanie białek:

Jak oczyścić białko, białko jest dużą cząsteczką i albuminą o różnych rozmiarach molekularnych, istnieje kilka prostszych metod oddzielania białek i materiałów drobnocząsteczkowych, a także oddzielonej mieszaniny białek. Głównymi metodami rozdzielania białek o różnej wielkości cząsteczek są dializa, ultrafiltracja, filtracja żelowa i separacja wirówkowa. W metodach rozdzielania białek powszechnie stosuje się dializę i ultrafiltrację. Rozdzielaną mieszaninę dializacyjną umieszcza się w worku dializacyjnym wykonanym z półprzepuszczalnej membrany, a następnie zanurza w roztworze dializacyjnym w celu rozdzielenia. Ultrafiltracja to proces przepuszczania wody i innych małych cząsteczek przy użyciu siły odśrodkowej lub ciśnienia przez półprzepuszczalną membranę i wychwytywanie białek w półprzepuszczalnej membranie. Te dwie metody można oddzielić od makrocząsteczek na bazie białek i małych cząsteczek na bazie soli nieorganicznych. Często są one solone, stosowane w połączeniu z metodą rozpuszczania soli lub można je wprowadzić w celu wyeliminowania tych dwóch metod po wysalaniu przy użyciu nieorganicznych roztworów soli.

1. Jak oczyścić białko metodą wysalania: Podstawą metody wysalania jest to, że rozpuszczalność białka w rozcieńczonym roztworze soli będzie rosła wraz ze wzrostem stężenia soli, natomiast gdy stężenie soli wzrośnie do określonej wartości, aktywność wody zostanie zwiększona. Spadek, co z kolei może spowodować, że niektóre białka będą wytwarzać ładunki przez powierzchnię struktury molekularnej, które zostaną stopniowo zneutralizowane, a membrana hydratacyjna ulegnie stopniowemu zniszczeniu, co może ostatecznie spowodować aglomerację powiązanych białek i cząsteczek i wytrącanie się z różnych roztworów.

2. Metoda wytrącania rozpuszczalnikiem organicznym: Istnieją dwa powody, dla których należy zmniejszyć rozpuszczalność białka w rozpuszczalnikach organicznych: jak oczyścić białko w postaci roztworu soli poprzez odwodnienie; po drugie, stałą dielektryczną rozpuszczalników organicznych niż wody można zmniejszyć w rozpuszczalnikach polarnych.

3. Środek wytrącający białka: białko jako środek wytrącający działa tylko na jeden lub jeden rodzaj wytrącania białek, powszechnie stosowane są środki alkaliczne, białka, lektyny i metale ciężkie.

4. Wytrącanie glikolu polietylenowego: Jak oczyścić rozpuszczalne w wodzie polimery niejonoweoczyszczanie białek, takie jak glikol polietylenowy i siarczan dekstranu sodu, w celu wytrącenia białek.