ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਵਿਧੀ ਕੀ ਹੈਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਸਿਸਟਮ? ਸ਼ੁੱਧ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੇ ਕੋਡਿੰਗ ਡੀਐਨਏ ਕ੍ਰਮ ਨੂੰ ਜਾਣਨਾ ਜ਼ਰੂਰੀ ਹੈ, ਇਹ ਵੇਖਣ ਲਈ ਕਿ ਟੀਚੇ ਵਾਲੇ ਜੀਨ ਵਿੱਚ ਕਿਹੜੇ ਸੈੱਲ ਜਾਂ ਟਿਸ਼ੂ ਜ਼ਿਆਦਾ ਐਕਸਪ੍ਰੈਸ ਹੋਏ ਹਨ, ਅਤੇ ਟੀਚੇ ਦੇ ਡੀਐਨਏ ਟੁਕੜੇ ਦੇ ਆਰਫ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣ ਲਈ ਜੀਨ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਨੂੰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਕਰਨ ਲਈ। ਇਹ ਟੀਚਾ ਜੀਨ ਦੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੀ ਅਖੌਤੀ ਪ੍ਰਾਪਤੀ ਹੈ।

ਸਮੀਕਰਨ ਵੈਕਟਰ ਦੀ ਉਸਾਰੀ: ਪ੍ਰੋਕੈਰੀਓਟਿਕ ਜਾਂ ਯੂਕੇਰੀਓਟਿਕ ਸਮੀਕਰਨ ਵੈਕਟਰ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਜੀਨ ਸਮੀਕਰਨ ਦੀਆਂ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਦੇ ਨਾਲ, ਇਸ ਪੜਾਅ ਦੀ ਮੁੱਖ ਸਮੱਸਿਆ ਪਲਾਜ਼ਮੀਡ ਅਤੇ ਦਿਲਚਸਪੀ ਦੇ ਜੀਨ, ਅਤੇ ਸਮੀਕਰਨ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦਾ ਨਿਰਮਾਣ ਕਰਨਾ ਹੈ। ਪ੍ਰੋਕੈਰੀਓਟਿਕ ਸਮੀਕਰਨ ਸਮਾਂ ਛੋਟਾ ਹੈ, ਲਾਗਤ ਘੱਟ ਹੈ, ਅਤੇ ਸਮੀਕਰਨ ਦੀ ਇੱਕ ਵੱਡੀ ਮਾਤਰਾ ਇੱਕ ਤਰਜੀਹ ਹੈ; ਜੀਨ ਈ. ਕੋਲੀ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਗਟ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ, ਅਤੇ ਸਮੱਸਿਆ ਕੋਡੋਨ ਅਨੁਕੂਲਨ ਵਿੱਚ ਵਾਪਰਦੀ ਹੈ। ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੀ ਬਿਹਤਰ ਗਤੀਵਿਧੀ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਦੇ ਮੱਦੇਨਜ਼ਰ, ਖੋਜਕਰਤਾਵਾਂ ਨੇ ਪਿਚੀ ਖਮੀਰ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਗਟ ਕਰਨਾ ਚੁਣਿਆ। ਕੋਡੋਨ ਓਪਟੀਮਾਈਜੇਸ਼ਨ ਦਾ ਸਫਲ ਪ੍ਰਗਟਾਵਾ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਹੈ।

ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਵਿਧੀ ਕੀ ਹੈ:

1. ਵਰਖਾ.

2. ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ: ਇੱਕ ਚਾਰਜ ਕੀਤਾ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਇਸਦੇ ਆਈਸੋਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਬਿੰਦੂ ਤੋਂ ਉੱਚਾ ਜਾਂ ਘੱਟ ਹੁੰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਫੀਲਡ ਵਿੱਚ ਨੈਗੇਟਿਵ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਜਾਂ ਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਫੀਲਡ ਦੇ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਵਿੱਚ ਭੇਜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਫਿਲਮ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰਸਿਸ, ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ, ਆਦਿ ਦਾ ਸਮਰਥਨ ਕਰੋ.

3. ਡਾਇਲਸਿਸ: ਇੱਕ ਵਿਧੀ ਜੋ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਤੇ ਛੋਟੇ ਅਣੂ ਜੈਵਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਤੋਂ ਵੱਡੇ ਅਣੂਆਂ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਦੋ ਡਾਇਲਸਿਸ ਬੈਗਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੀ ਹੈ।

4. ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ: ਆਇਨ ਐਕਸਚੇਂਜ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੇ ਮੁਕਤ ਗੁਣਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੀ ਹੈ। ਇੱਕ ਖਾਸ pH ਦੇ ਤਹਿਤ, ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੇ ਚਾਰਜ ਅਤੇ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਵੱਖਰੀਆਂ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ, ਅਤੇ ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਆਇਨ ਐਕਸਚੇਂਜ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਦੁਆਰਾ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਐਨੀਅਨ ਐਕਸਚੇਂਜ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਵਿੱਚ, ਘੱਟ ਨੈਗੇਟਿਵ ਪਾਵਰ ਵਾਲੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਪਹਿਲਾਂ ਅਲੋਪ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ। ਮੌਲੀਕਿਊਲਰ ਸਿਵਜ਼, ਜਿਸ ਨੂੰ ਜੈੱਲ ਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ ਵੀ ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਛੋਟੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਪੋਰਸ ਵਿੱਚ ਦਾਖਲ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਤੱਕ ਉਹਨਾਂ ਵਿੱਚ ਰਹਿੰਦੇ ਹਨ। ਵੱਡੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਪੋਰਸ ਵਿੱਚ ਦਾਖਲ ਨਹੀਂ ਹੋ ਸਕਦੇ ਅਤੇ ਸਿੱਧੇ ਬਾਹਰ ਵਹਿ ਸਕਦੇ ਹਨ।

5. ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਵਿਧੀ ਕੀ ਹੈਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਸਿਸਟਮ? Ultracentrifugation: ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਅਣੂ ਦੇ ਭਾਰ ਨੂੰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੇ ਤੌਰ ਤੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ. ਵੱਖ-ਵੱਖ ਘਣਤਾ ਵਾਲੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੇ ਗਠਨ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ.