Hva er rensemetoden tilproteinrensingssystem? Det er nødvendig å kjenne den kodende DNA-sekvensen til det rensede proteinet, for å se hvilke celler eller vev som er overuttrykt i målgenet, og å designe genprimere for å amplifisere arf av mål-DNA-fragmentet. Dette er den såkalte anskaffelsen av målgenfragmenter.

Konstruksjon av ekspresjonsvektor: I den prokaryote eller eukaryote ekspresjonsvektoren med egenskapene til det oppnådde genuttrykket i seg selv, er hovedproblemet med dette trinnet å konstruere plasmidet og genet av interesse, og ekspresjonssystemet. Den prokaryote uttrykkstiden er kort, kostnaden er lav, og en stor mengde uttrykk er en prioritet; genet kommer ikke til uttrykk i E. coli, og problemet oppstår ved kodonoptimalisering. Av hensyn til bedre aktivitet og rensing av proteinet, valgte forskerne å uttrykke i Pichi-gjær. Vellykket uttrykk for kodonoptimalisering er viktig.

Hva er rensemetoden til proteinrensesystemet:

1. Nedbør.

2. Elektroforese: Et ladet protein er høyere eller lavere enn dets isoelektriske punkt og kan flyttes til den negative elektroden eller den positive elektroden til det elektriske feltet i det elektriske feltet. Støttefilmelektroforese, elektroforese, etc.

3. Dialyse: En metode som bruker to dialyseposer for å skille store molekyler fra proteiner og små molekylære organiske forbindelser.

4. Kromatografi: Ionebytterkromatografi bruker de frie egenskapene til proteiner. Under en bestemt pH er ladningene og egenskapene til proteiner forskjellige, og de kan separeres ved ionebytterkromatografi. Ved anionbytterkromatografi elueres proteiner med lav negativ kraft først. Molekylære sikter, også kjent som gelfiltrering. Små proteiner kommer inn i porene og blir værende i dem lenge. Store proteiner kan ikke komme inn i porene og strømme direkte ut.

5. Hva er rensemetoden tilproteinrensingssystem? Ultrasentrifugering: Proteinrensing kan brukes til å bestemme molekylvekten og kan brukes som protein. Dannelsen av proteiner med forskjellige tettheter separeres.