Grovseparasjon og finseparasjon av proteinrensing

Separasjon og rensing av proteiner er mye brukt i biokjemiforskning og anvendelse og er en viktig operasjonell ferdighet. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument har samlet råseparasjons- og finseparasjonsinnholdet tilproteinrensing for alle. En typisk eukaryot celle kan inneholde tusenvis av forskjellige proteiner, noen er svært rike og noen inneholder bare noen få kopier. For å studere et bestemt protein er det nødvendig å først rense proteinet fra andre proteiner og ikke-proteinmolekyler.

19

Grov separasjon

Når proteinekstraktet (noen ganger blandet med nukleinsyrer, polysakkarider, etc.) er oppnådd, velges et sett med passende metoder for å skille de ønskedeproteinfra andre urenheter. Generelt bruker dette separasjonstrinnet metoder som utsalting, isoelektrisk punktakkumulering og organisk løsningsmiddelfraksjonering. Disse metodene er preget av enkelhet og stor prosesseringskapasitet, som kan fjerne mange urenheter og konsentrere proteinløsningen. Noen proteinekstrakter er store i volum og egner seg ikke for konsentrasjon ved akkumulering eller utsalting. Du kan velge ultrafiltrering, gelfiltrering, frysevakuumtørking eller andre metoder for konsentrasjon.

Fin separasjon

Etter grovfraksjoneringen av prøven er volumet generelt lite, og de fleste urenhetene er fjernet. For ytterligere rensing inkluderer kromatografimetoder generelt gelfiltrering, ionebytterkromatografi, adsorpsjonskromatografi og affinitetskromatografi. Ved behov kan du også velge elektroforese, inkludert soneelektroforese, isoelektrisk punktsett osv. som den endelige renseprosessen. Metoden som brukes for separasjon på underavdelingsnivå er generelt liten i planleggingen, men med høy oppløsning.

Krystallisering er den siste prosessen med proteinseparasjon og rensing. Selv om krystalliseringsprosessen ikke sikrer at proteinet må være ensartet, er det først når et bestemt protein har en fordel i løsningen til å danne en krystall. Selve krystalliseringsprosessen er ledsaget av en viss grad av rensing, og rekrystallisering kan fjerne en liten mengde forfalsket protein. Siden denaturertproteinhar aldri blitt funnet under krystalliseringsprosessen, er proteinkrystallisering ikke bare et tegn på renhet, men også en kraftig retningslinje for å fastslå at produktet er i sin naturlige tilstand.


Innleggstid: 19. november 2020