Metoder og rensing av proteinrensing

Metoder forproteinrensing:

Metoden for proteinrensing, separasjon og rensing av protein, proteinet frigjøres fra de opprinnelige cellene eller vevet i en oppløst tilstand og forblir i den opprinnelige naturlige tilstanden uten tap av biologisk aktivitet. Av denne grunn bør materialet fjerne dyre- og fettvev, frømaterialet skal til og med skrelle av forurensningen av frøskallet fra stoffer som tanniner, og oljefrøet bør helst bruke et lavtkokende organisk løsningsmiddel.

1. Metoden for proteinrensing, størrelse og forskjellige separasjonsanalysemetoder: dialyse og ultrafiltrering bruker disse proteinene til å passere gjennom naturen til molekyler som ikke kan passere gjennom den semipermeable membranen; tetthetsgradient sentrifugering Kvaliteten og tettheten til proteinet i mediet vil ha større innvirkning på partikler. Settehastigheten er raskere; gelfiltrering er en slags kolonnekromatografi.

2. Separasjon av løselighetsforskjell i bruk: elektroutfelling fordi nettoladningen til proteinmolekyler er på null isoelektrisk punkt, reduserer den elektrostatiske frastøtingen mellom molekyler, lett å aggregere og minimal løselighet; saltløsning brukt med saltløsning Konsentrasjonen øker eller reduserer løseligheten til proteinet.

3. Ladningen separeres og analyseres ved forskjellige metoder, hovedinnholdet inkluderer elektroforese og ionebytterkromatografi.

4. Metoder forproteinrensingDen selektive adsorpsjonen og separasjonen av proteiner utnytter styrken til partikkeladsorpsjon.

5. Affinitetskromatografi er basert på separasjon av ligander. Denne biologiske egenskapen gjør at proteinmolekyler binder seg spesifikt i stedet for kovalent til et annet molekyl kalt en ligand.

6. Metode for proteinrensing: Lavtemperatur organisk løsningsmiddelutfellingsmetode: Bruk organiske løsningsmidler som er blandbare med vann, slik som metanol, etanol, for å redusere løseligheten og utfellingen av de fleste proteiner. Denne metoden er høyere enn oppløsningen ved utsalting, men proteinet denaturerer mer Når det er enkelt, bør det gjøres ved lav temperatur.

6ca4b93f5

Hvordan renseproteinrensing:

Hvordan rense protein, protein er et stort molekyl, og forskjellige molekylstørrelser av albumin, det er noen enklere metoder for å skille protein og små molekylmaterialer, og også separert proteinblanding. Hovedmetodene for å separere proteiner av forskjellige molekylstørrelser er dialyse, ultrafiltrering, gelfiltrering og sentrifugalseparasjon. Dialyse og ultrafiltrering er ofte brukt i proteinseparasjonsmetoder. Dialyseblandingen som skal separeres legges i en dialysepose laget av en semipermeabel membran, og senkes deretter ned i dialyseløsningen for separering. Ultrafiltrering er prosessen med å passere vann og andre små molekyler ved å bruke sentrifugalkraft eller trykk i en semipermeabel membran og fange proteiner i den semipermeable membranen. Disse to metodene kan skilles fra proteinbaserte makromolekyler og uorganiske saltbaserte små molekyler. De saltes ofte ut, brukes i forbindelse med saltoppløsningsmetoden, eller kan introduseres for å ta ut disse to metodene etter utsalting ved bruk av uorganiske saltløsninger.

1. Hvordan rense protein ved utsaltingsmetode: Grunnlaget for utsaltingsmetoden er at løseligheten av protein i fortynnet saltløsning vil øke med økningen av saltkonsentrasjonen, men når saltkonsentrasjonen øker til en viss verdi, vil vannaktiviteten vil økes. Nedgang, som igjen kan føre til at noen proteiner genererer ladninger gjennom overflaten av molekylstrukturen som gradvis nøytraliseres, og hydratiseringsmembranen blir gradvis ødelagt, noe som til slutt kan føre til at relaterte proteiner og molekyler utvikler agglomerasjon og utfelles fra forskjellige løsninger.

2. Organisk løsningsmiddelutfellingsmetode: Det er to grunner til å redusere løseligheten av protein i organiske løsningsmidler: hvordan rense protein som en saltløsning med dehydrering; for det andre kan den dielektriske konstanten til organiske løsningsmidler enn vann reduseres i polare løsningsmidler.

3. Proteinutfellingsmiddel: protein som utfellingsmiddel virker kun på én eller én type proteinutfelling, vanlige er alkalisk, protein, lektin og tungmetaller.

4. Polyetylenglykolutfelling: Hvordan rense vannløselige ikke-ioniske polymerer forproteinrensing, slik som polyetylenglykol og natriumdekstransulfat for å utfelle proteiner.


Innleggstid: 27. oktober 2020