De scheiding en zuivering van eiwitten wordt veel gebruikt in biochemisch onderzoek en toepassing en is een belangrijke operationele vaardigheid. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument heeft de inhoud van ruwe scheiding en fijne scheiding samengesteldeiwitzuivering voor iedereen. Een typische eukaryote cel kan duizenden verschillende eiwitten bevatten, sommige zijn erg rijk en sommige bevatten slechts een paar exemplaren. Om een ​​bepaald eiwit te kunnen bestuderen, is het noodzakelijk om het eiwit eerst te zuiveren van andere eiwitten en niet-eiwitmoleculen.

Grove scheiding

Wanneer het eiwitextract (soms gemengd met nucleïnezuren, polysachariden, enz.) wordt verkregen, wordt een reeks geschikte methoden geselecteerd om de gewenste eiwitten te scheiden.eiwitvan andere onzuiverheden. Over het algemeen wordt bij deze scheidingsstap gebruik gemaakt van methoden zoals uitzouten, accumulatie van iso-elektrische punten en fractionering van organische oplosmiddelen. Deze methoden worden gekenmerkt door eenvoud en grote verwerkingscapaciteit, waardoor veel onzuiverheden kunnen worden verwijderd en de eiwitoplossing kan worden geconcentreerd. Sommige eiwitextracten hebben een groot volume en zijn niet geschikt voor concentratie door ophoping of uitzouten. U kunt kiezen voor ultrafiltratie, gelfiltratie, vriesvacuümdrogen of andere concentratiemethoden.

Fijne scheiding

Na de ruwe fractionering van het monster is het volume over het algemeen klein en zijn de meeste onzuiverheden verwijderd. Voor verdere zuivering omvatten chromatografiemethoden in het algemeen gelfiltratie, ionenuitwisselingschromatografie, adsorptiechromatografie en affiniteitschromatografie. Indien nodig kunt u ook kiezen voor elektroforese, inclusief zone-elektroforese, iso-elektrische puntinstelling, enz. als het uiteindelijke zuiveringsproces. De methode die wordt gebruikt voor scheiding op onderverdelingsniveau is over het algemeen klein qua planning, maar met een hoge resolutie.

Kristallisatie is het laatste proces van eiwitscheiding en -zuivering. Hoewel het kristallisatieproces er niet voor zorgt dat het eiwit uniform moet zijn, is het alleen mogelijk als een bepaald eiwit een voordeel heeft in de oplossing om een ​​kristal te vormen. Het kristallisatieproces zelf gaat gepaard met een zekere mate van zuivering, en herkristallisatie kan een kleine hoeveelheid vervalst eiwit verwijderen. Sinds gedenatureerdeiwitis nooit aangetroffen tijdens het kristallisatieproces, eiwitkristallisatie is niet alleen een teken van zuiverheid, maar ook een krachtige richtlijn om vast te stellen dat het product zich in zijn natuurlijke staat bevindt.