प्रोटिन शुद्धिकरण प्रणाली को शुद्धिकरण विधि के हो

को शुद्धिकरण विधि के होप्रोटीन शुद्धीकरण प्रणाली? शुद्ध प्रोटिनको कोडिङ डीएनए अनुक्रम जान्न आवश्यक छ, लक्ष्य जीनमा कुन कोशिका वा तन्तुहरू ओभरएक्सप्रेस गरिएको छ भनेर हेर्न, र लक्ष्य डीएनए टुक्राको एआरएफ विस्तार गर्न जीन प्राइमरहरू डिजाइन गर्न आवश्यक छ। यो लक्ष्य जीन टुक्राहरूको तथाकथित अधिग्रहण हो।

अभिव्यक्ति भेक्टरको निर्माण: प्रोकारियोटिक वा युकेरियोटिक अभिव्यक्ति भेक्टरमा प्राप्त जीन अभिव्यक्तिको विशेषताहरू सहित, यस चरणको मुख्य समस्या प्लाज्मिड र रुचिको जीन, र अभिव्यक्ति प्रणाली निर्माण गर्नु हो। प्रोकारियोटिक अभिव्यक्ति समय छोटो छ, लागत कम छ, र अभिव्यक्तिको ठूलो मात्रा प्राथमिकता हो; जीन ई. कोलाई मा व्यक्त गरिएको छैन, र समस्या कोडोन अनुकूलन मा हुन्छ। राम्रो गतिविधि र प्रोटीन को शुद्धीकरण को विचार मा, शोधकर्ताहरु Pichi खमीर मा व्यक्त गर्न रोजे। कोडोन अनुकूलनको सफल अभिव्यक्ति महत्त्वपूर्ण छ।

१९

प्रोटिन शुद्धिकरण प्रणाली को शुद्धिकरण विधि के हो:

1. वर्षा।

2. इलेक्ट्रोफोरेसिस: चार्ज गरिएको प्रोटिन यसको आइसोइलेक्ट्रिक बिन्दु भन्दा माथि वा कम हुन्छ र नकारात्मक इलेक्ट्रोड वा विद्युतीय क्षेत्रमा विद्युतीय क्षेत्रको सकारात्मक इलेक्ट्रोडमा सार्न सकिन्छ। समर्थन फिल्म इलेक्ट्रोफोरेसिस, इलेक्ट्रोफोरेसिस, आदि।

3. डायलाइसिस: एक विधि जसले प्रोटीन र सानो आणविक जैविक यौगिकहरूबाट ठूला अणुहरूलाई अलग गर्न दुईवटा डायलिसिस झोलाहरू प्रयोग गर्दछ।

4. क्रोमेटोग्राफी: आयन एक्सचेन्ज क्रोमाटोग्राफीले प्रोटिनहरूको मुक्त गुणहरू प्रयोग गर्दछ। एक विशिष्ट pH अन्तर्गत, प्रोटीनहरूको शुल्क र गुणहरू फरक हुन्छन्, र तिनीहरूलाई आयन एक्सचेंज क्रोमेटोग्राफीद्वारा अलग गर्न सकिन्छ। आयन एक्सचेन्ज क्रोमेटोग्राफीमा, कम नकारात्मक शक्ति भएका प्रोटिनहरू पहिले एल्युट हुन्छन्। आणविक sieves, जेल निस्पंदन पनि भनिन्छ। साना प्रोटीनहरू छिद्रहरूमा प्रवेश गर्छन् र लामो समयसम्म रहन्छन्। ठूला प्रोटिनहरू छिद्रहरूमा प्रवेश गर्न र सीधै बाहिर निस्कन सक्दैनन्।

5. को शुद्धिकरण विधि के होप्रोटीन शुद्धीकरण प्रणाली? Ultracentrifugation: प्रोटीन शुद्धीकरण आणविक वजन निर्धारण गर्न प्रयोग गर्न सकिन्छ र प्रोटीन रूपमा प्रयोग गर्न सकिन्छ। विभिन्न घनत्वहरु संग प्रोटीन को गठन अलग छ।


पोस्ट समय: अप्रिल-21-2021