प्रोटिनको पृथकीकरण र शुद्धीकरण जैव रसायन अनुसन्धान र अनुप्रयोगमा व्यापक रूपमा प्रयोग गरिन्छ र एक महत्त्वपूर्ण परिचालन कौशल हो। एससीजी प्रोटिन प्युरिफिकेशन सिस्टम कम्पनी-साइपु इन्स्ट्रुमेन्टले कच्चा पृथकीकरण र राम्रो पृथकीकरण सामग्री कम्पाइल गरेको छ।प्रोटिनसबैको लागि शुद्धिकरण। एक सामान्य युकेरियोटिक कोशिकामा हजारौं विभिन्न प्रोटीनहरू हुन सक्छन्, केही धेरै धनी हुन्छन् र केहीमा थोरै प्रतिहरू मात्र हुन्छन्। कुनै निश्चित प्रोटिनको अध्ययन गर्नको लागि, पहिले प्रोटिनलाई अन्य प्रोटिन र गैर-प्रोटीन अणुहरूबाट शुद्ध गर्न आवश्यक छ।

मोटो विभाजन

जब प्रोटिन एक्स्ट्र्याक्ट (कहिलेकाहीँ न्यूक्लिक एसिड, पोलिसेकराइड, आदिसँग मिसाइन्छ) प्राप्त गरिन्छ, इच्छित अलग गर्न उपयुक्त विधिहरूको सेट चयन गरिन्छ।प्रोटिनअन्य अशुद्धताबाट। सामान्यतया, पृथकीकरणको यो चरणले नुन निकाल्ने, आइसोइलेक्ट्रिक बिन्दु संचय र जैविक विलायक अंशीकरण जस्ता विधिहरू प्रयोग गर्दछ। यी विधिहरू सरलता र ठूलो प्रशोधन क्षमता द्वारा विशेषता छन्, जसले धेरै अशुद्धताहरू हटाउन र प्रोटीन समाधान केन्द्रित गर्न सक्छ। केही प्रोटीन अर्कहरू मात्रामा ठूला हुन्छन् र जम्मा गरेर वा नुन निकालेर एकाग्रताका लागि उपयुक्त हुँदैनन्। तपाईं अल्ट्राफिल्ट्रेशन, जेल निस्पंदन, फ्रिजिङ भ्याकुम सुकाउने वा एकाग्रताका लागि अन्य विधिहरू छनौट गर्न सक्नुहुन्छ।

राम्रो विभाजन

नमूनाको कुनै न कुनै अंश पछि, भोल्युम सामान्यतया सानो हुन्छ, र धेरैजसो अशुद्धताहरू हटाइएका छन्। थप शुद्धिकरणको लागि, क्रोमेटोग्राफी विधिहरूमा सामान्यतया जेल फिल्टरेशन, आयन एक्सचेन्ज क्रोमाटोग्राफी, शोषण क्रोमाटोग्राफी, र एफिनिटी क्रोमैटोग्राफी समावेश छ। आवश्यक भएमा, तपाइँ अन्तिम शुद्धिकरण प्रक्रियाको रूपमा जोन इलेक्ट्रोफोरेसिस, आइसोइलेक्ट्रिक बिन्दु सेट, आदि सहित इलेक्ट्रोफोरेसिस पनि छनौट गर्न सक्नुहुन्छ। उपविभाग स्तर विभाजनको लागि प्रयोग गरिएको विधि योजनामा ​​सामान्यतया सानो छ, तर उच्च संकल्पको साथ।

क्रिस्टलाइजेशन प्रोटीन विभाजन र शुद्धीकरण को अन्तिम प्रक्रिया हो। यद्यपि क्रिस्टलाइजेसन प्रक्रियाले प्रोटीन एकरूप हुनुपर्छ भनेर सुनिश्चित गर्दैन, यो केवल तब हुन्छ जब एक निश्चित प्रोटीनको समाधानमा क्रिस्टल बनाउनको लागि फाइदा हुन्छ। क्रिस्टलाइजेशन प्रक्रिया आफैंमा शुद्धिकरणको एक निश्चित डिग्रीको साथ हुन्छ, र पुन: स्थापनाले थोरै मात्रामा मिसावट प्रोटीन हटाउन सक्छ। विकृत भएदेखिप्रोटिनक्रिस्टलाइजेशन प्रक्रियाको समयमा कहिल्यै फेला परेको छैन, प्रोटीन क्रिस्टलाइजेशन शुद्धताको संकेत मात्र होइन, तर उत्पादन यसको प्राकृतिक अवस्थामा छ भनेर निर्धारण गर्न एक शक्तिशाली दिशानिर्देश पनि हो।