न्यूक्लिक एसिडलाई डिओक्साइरिबोन्यूक्लिक एसिड (डीएनए) र रिबोन्यूक्लिक एसिड (आरएनए) मा विभाजन गरिएको छ, जसमध्ये आरएनएलाई विभिन्न कार्यहरू अनुसार राइबोसोमल आरएनए (आरआरएनए), मेसेन्जर आरएनए (एमआरएनए) र ट्रान्सफर आरएनए (टीआरएनए) मा विभाजन गर्न सकिन्छ।

डीएनए मुख्यतया न्यूक्लियस, माइटोकोन्ड्रिया र क्लोरोप्लास्टमा केन्द्रित हुन्छ, जबकि आरएनए मुख्यतया साइटोप्लाज्ममा वितरित हुन्छ।

किनभने प्यूरिन आधारहरू र पाइरिमिडाइन आधारहरूले न्यूक्लिक एसिडहरूमा संयुग्मित दोहोरो बन्डहरू छन्, न्यूक्लिक एसिडहरूमा पराबैंगनी अवशोषणको विशेषताहरू छन्। DNA सोडियम लवणको पराबैंगनी अवशोषण लगभग 260nm छ, र यसको अवशोषण A260 को रूपमा व्यक्त गरिएको छ, र यो 230nm मा अवशोषण ट्रफमा छ, त्यसैले अल्ट्राभायोलेट स्पेक्ट्रोस्कोपी प्रयोग गर्न सकिन्छ। न्यूक्लिक एसिड मात्रात्मक र गुणात्मक रूपमा एक ल्युमिनोमिटर द्वारा निर्धारित गरिन्छ।

न्यूक्लिक एसिड एम्फोलाइट्स हुन्, जुन पॉलीएसिड्सको बराबर हो। न्यूक्लिक एसिडहरूलाई तटस्थ वा क्षारीय बफरहरू प्रयोग गरेर एनोनहरूमा पृथक गर्न सकिन्छ, र एनोड तिर जानको लागि विद्युतीय क्षेत्रमा राखिन्छ। यो इलेक्ट्रोफोरेसिस को सिद्धान्त हो।

न्यूक्लिक एसिड निकासी र शुद्धीकरण सिद्धान्त र आवश्यकताहरू

१. न्यूक्लिक एसिड प्राथमिक संरचनाको अखण्डता सुनिश्चित गर्नुहोस्

2. अन्य अणुहरूको प्रदूषण हटाउनुहोस् (जस्तै DNA निकाल्दा RNA हस्तक्षेप बाहेक)

3. न्यूक्लिक एसिड नमूनाहरूमा इन्जाइमहरूलाई रोक्ने कुनै पनि जैविक विलायकहरू र धातु आयनहरूको उच्च सांद्रता हुनु हुँदैन।

४. प्रोटिन, पोलिसेकराइड र लिपिड जस्ता म्याक्रोमोलेकुलर पदार्थलाई सकेसम्म कम गर्नुहोस्

न्यूक्लिक एसिड निकासी र शुद्धीकरण विधि

1. फिनोल/क्लोरोफर्म निकासी विधि

यो 1956 मा आविष्कार गरिएको थियो। फिनोल/क्लोरोफर्मको साथ सेल टुटेको तरल वा टिस्यु होमोजेनेटको उपचार गरेपछि, न्यूक्लिक एसिड घटकहरू, मुख्य रूपमा डीएनए, जलीय चरणमा विघटन हुन्छन्, लिपिडहरू मुख्य रूपमा जैविक चरणमा हुन्छन्, र प्रोटीनहरू दुई बीचमा अवस्थित हुन्छन्। चरणहरू।

2. रक्सी वर्षा

इथानोलले न्यूक्लिक एसिडको हाइड्रेसन तहलाई हटाउन सक्छ र नकारात्मक रूपमा चार्ज गरिएको फस्फेट समूहलाई पर्दाफास गर्न सक्छ, र NA﹢ जस्ता सकारात्मक रूपमा चार्ज गरिएका आयनहरूले फस्फेट समूहसँग मिलाएर अवक्षेपण बनाउन सक्छ।

3. क्रोमेटोग्राफिक स्तम्भ विधि

विशेष सिलिका-आधारित अवशोषण सामग्रीको माध्यमबाट, डीएनए विशेष रूपमा सोस्न सकिन्छ, जबकि आरएनए र प्रोटीन सजिलैसँग पास गर्न सकिन्छ, र त्यसपछि न्यूक्लिक एसिडलाई बाँध्न उच्च नुन र कम pH प्रयोग गर्न सकिन्छ, र न्यूक्लिकलाई अलग गर्न र शुद्ध गर्न कम नुन र उच्च pH भएको एल्युट। एसिड।

4. थर्मल क्र्याकिंग क्षार विधि

क्षारीय निकासीले मुख्यतया कोभ्यालेन्टली बन्द गोलाकार प्लाज्मिडहरू र रैखिक क्रोमाटिन बीचको टोपोलोजिकल भिन्नताहरू प्रयोग गर्दछ तिनीहरूलाई अलग गर्न। क्षारीय अवस्थाहरूमा, विकृत प्रोटीनहरू घुलनशील हुन्छन्।

5. उमाल्ने पाइरोलिसिस विधि

डीएनए समाधानलाई रेखीय डीएनए अणुहरूको गुणहरूको फाइदा लिनको लागि तातो-उपचार गरिन्छ र सेन्ट्रीफ्यूगेशनद्वारा विकृत प्रोटीनहरू र सेलुलर भग्नावशेषहरूद्वारा निर्मित अवक्षेपबाट डीएनए टुक्राहरू अलग गर्न।

6. Nanomagnetic मोती विधि

सुपरपाराम्याग्नेटिक न्यानो कणहरूको सतह सुधार गर्न र परिमार्जन गर्न नानो टेक्नोलोजी प्रयोग गरेर, सुपरपाराम्याग्नेटिक सिलिकन अक्साइड नानो-चुम्बकीय मोतीहरू तयार गरिन्छ। चुम्बकीय मोतीहरूले विशेष रूपमा माइक्रोस्कोपिक इन्टरफेसमा न्यूक्लिक एसिड अणुहरूलाई पहिचान गर्न र कुशलतापूर्वक बाँध्न सक्छ। सिलिका नानोस्फियरको सुपरपारामग्नेटिक गुणहरू प्रयोग गरेर, चाओट्रोपिक लवण (गुआनिडाइन हाइड्रोक्लोराइड, गुआनिडाइन आइसोथियोसाइनेट, इत्यादि) र बाह्य चुम्बकीय क्षेत्र, डीएनए र आरएनए रगत, जनावरको तन्तु, खाना, रोगजनक सूक्ष्मजीवहरू र अन्य नमूनाहरूबाट अलग गरिएको थियो।